吕梁山引种金银花花蕾质量分析

[目的]评估引种到吕梁山的不同品种金银花花蕾质量,选出适合在山西省吕梁山区规模化种植的最优品种。[方法]在吕梁山开展种植试验,并采用随机抽样方法对产自山东平邑、河南封丘、陕西杨陵的4个品种金银花(北花1号、四季金银花、豫纯1号、金花3号)的花蕾大小、千针重量、折干率、色泽等外观质量指标进行测量;同时,采用高效液相色谱法对4个品种金银花花蕾的绿原酸和木犀草苷含量进行测定。[结果]4个品种金银花花蕾长度、直径、千针干重、折干率等指标差异不显著(P>0.05),千针鲜重差异显著(P<0.05),总色差(ΔE)、绿原酸含量、木犀草苷含量差异极显著(P<0.01);在4个引种的金银花中,北花1号的每个花蕾质量指标均优于其他品种。[结论]山西省吕梁山区非常适合种植金银花,尤其是从山东省平邑县引种的北花1号表现出明显的品质优势,可作为吕梁山规模化种植的金银花品种。     

不同品种金银花不同花期绿原酸含量比较

[目的]为忍冬科药用植物资源合理开发和综合利用提供依据。[方法]采用紫外分光光度计法,比较不同品种金银花不同花期的绿原酸含量。[结果]贵州蕊帽忍冬和河南小花银花花中绿原酸含量随发育阶段提高而降低,贵州蕊帽忍冬绿原酸含量在各发育阶段均比引种的河南封丘小花银花高。[结论]从贵州金银花药材资源开发利用角度而言,贵州花溪蕊帽忍冬作为乡土种比河南金银花更适合。     

不同施肥方式对金银花质量的影响

金银花是大宗常用珍贵中药,绿原酸含量及木犀草素苷含量是金银花产品质量主要指标。在遵循平衡施肥原则前提下,通过不施肥、单施无机肥、单施有机肥、无机肥有机肥配施的四种不同施肥方式,对金银花产品中绿原酸、木犀草素苷含量进行了比较。结果表明:施肥能显著提高金银花产品质量,单施无机肥与单施有机肥差别不显著;只施用有机肥更优于只施用无机肥;有机肥无机肥结合施肥,十分接近于只施用有机肥,可作为大规模商品化生产种植的依据。     

不同施氮量和采收期对金银花主要成分的影响

为金银花药材的生产及质量控制提供科学依据,设5个施氮水平、4个采收期,研究了不同施氮量和采收期对金银花中绿原酸和木犀草苷含量的影响.结果表明:施氮23g/株可明显提高绿蕾期、白蕾期、白花期和黄花期金银花中的绿原酸含量和木犀草苷含量;在白蕾期采收,金银花中绿原酸和木犀草苷含量均较高,可作为金银花中药材的适宜采收时期.     

金银花药材的HPLC指纹图谱及绿原酸、木犀草苷含量的同时测定

【目的】建立金银花药材的HPLC指纹图谱,并同时测定不同产地商品中绿原酸和木犀草苷的含量,全面评价金银花药材质量。【方法】采用Aglient TC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱。采用梯度洗脱,流动相A为1%HAC,流动相B为乙腈,洗脱程序为:0~5min,A为95%→92%;5~7min,A为92%→87%;7~28min,A为87→85%;28~38min,A为85→84%;38~43min,A为84→82%;43~53min,A为82→72%;53~63min,A为72→50%;63~65min,A为50→5%;75min,A为5%。流速为0.8mL/min;检测波长250nm;柱温30℃。指纹图谱共有模式的建立采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"进行处理分析。【结果】在指纹图谱研究中,标定了15个共有峰,建立了对照指纹图谱,10批药材与共有模式之间相似性良好,相似度均在0.9以上;在所建立的分析条件下,绿原酸、木犀草苷均达到了基线分离,且两者在线性范围内线性关系良好,两种成分的加样回收率分别为99.2%、99.4%。【结论】本法灵敏、准确、简便,可用于金银花药材的综合质量评价。     

不同产地金银花中绿原酸及木犀草苷的快速检测

[目的]利用HPLC法同时检测不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷。[方法]采用迪马公司Kromasil-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为350nm,柱温为室温,流速1ml/min,进样量5μl。[结果]绿原酸浓度在0~1mg/ml内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9991),回收率为98.79%~101.67%,相对标准偏差为1.05%;木犀草苷浓度在0~0.1mg/ml内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9987),回收率为98.06%~101.17%,相对标准偏差为1.17%。[结论]该方法可同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量,结果准确度高、精密度好,可为金银花药材的质量控制研究提供一种可靠的参考方法。     

浙江产金银花的调查与评估

对原产乐清、永嘉以及文成引种的"金银花"进行原植物鉴定,并利用HPLC法对样品绿原酸和木犀草苷含量进行检测。结果表明,原产乐清的"金银花"为灰毡毛忍冬(Lonicera macreanthoides Hand.-Mazz.),产于永嘉的为红腺忍冬(L.hypoglauca Miq.),文成引种的为忍冬(L.japonica Thunb.)。忍冬样品花与花蕾绿原酸和木犀草苷含量均符合2005版《中国药典》金银花项下规定,其中文成引种栽培金银花花中绿原酸和木犀草苷含量分别达到3.42%和0.21%。产于乐清、永嘉的灰毡毛忍冬、红腺忍冬样品中绿原酸含量也符合2005版《中国药典》山银花项下规定。资源调查结果表明:原产乐清、永嘉的"金银花"实属山银花,文成引种的为正品金银花。     

GA3和BR对金银花花期及绿原酸含量的影响

在金银花现蕾初期进行不同浓度赤霉素（GA3）和芸苔素内酯（BR）喷施试验,探讨GA3和BR对金银花花期及绿原酸含量的影响。结果表明：GA3使金银花始花期提前3-5 d,而BR使其延迟2-6 d;GA3和BR分别使千蕾重平均增加2.17、2.53 g;1000 mg/L GA3和0.5 mg/L BR分别使金银花花蕾绿原酸含量由3.38%（清水对照）提高到5.62%、4.90%。选择适宜浓度的GA3和BR,可以显著提高金银花千蕾重和品质,促使花期提前或延迟,实现金银花生产中的“分批成熟,分批采摘”,有效解决花农春季农忙金银花“丰产不丰收”的问题。     

金银花和山银花有效成分测定及比较分析

为了比较金银花与山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量差异.采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),分别以流动相乙腈-0.5%磷酸(10∶90)和检测波长327nm,流动相乙腈-0.5%醋酸梯度洗脱和检测波长348nm测定绿原酸、木犀草苷,以蒸发光散射检测器和流动相乙腈-0.4%醋酸梯度洗脱检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.结果发现:绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的线性范围分别为15.28~76.4、10.8~43.2、49~196和54.6~218.4μg/mL.山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙含量分别为0.0513%、6.953%、1.132%、5.59%;金银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙含量分别为2.82%、0.1847%、0.056%.本结果可为有效鉴别金银花和山银花提供依据,同时HPLC方法为全面控制金银花和山银花药材的质量提供了可靠的方法.     

金银花不同花期总黄酮含量的测定

采用芦丁比色法对宁夏引种金银花不同花期(金花、银花、白蕾、绿蕾)中的总黄酮的含量进行了测定。结果表明,银花中总黄酮含量最高,达到3.433%,而绿蕾中含量最低,为2.539%,金花中含量为2.988%,白蕾中含量为2.621%。     

金银花中产绿原酸内生真菌的分离与鉴定

以不同产区金银花的不同部位为材料,采用组织块法对金银花内生真菌进行分离鉴定,并结合TLC法和HPLC法对菌株发酵液进行定性分析.结果表明,共分离得到内生真菌80株,分属于5目、5科、10属,筛选出3株产绿原酸的菌株,均属于链格孢属.金银花中存在着丰富的内生真菌,不同产区及不同部位间内生真菌的种类和数量均存在差异,河南新密产绿原酸活性菌株较多.     

金银花愈伤组织诱导及绿原酸含量测定

优化金银花愈伤组织诱导主要条件,建立愈伤组织培养体系并测定其绿原酸含量。结果表明,金银花芽为最佳的诱导外植体,经过70%酒精30 s、5%的次氯酸钠10 min消毒处理,接种于激素配比为NAA 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.75 mg/L+6-BA 0.15 mg/L的MS培养基中,暗培养9 d后再进行光、暗交替培养,可诱导出淡黄色,疏松、生长旺盛的愈伤组织;愈伤组织生长曲线呈S型,24 d生长量为(21.62±0.54)g/瓶;通过高效液相检测,愈伤组织每100 g样品含有绿原酸57 mg。经验证金银花愈伤组织诱导条件稳定,含一定的绿原酸为进一步建立细胞悬浮培养体系高效生物积累金银花细胞及绿原酸功能成分奠定基础。     

忍冬茎叶中绿原酸的提取工艺研究

以高效液相色谱为检测手段,绿原酸提取率为考察指标,比较了回流法和超声法提取忍冬茎叶中绿原酸的影响;采用单因素和正交试验设计,探讨了回流法提取忍冬茎叶中绿原酸的最佳工艺参数。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度70%,料液比1∶14,提取时间2h,提取温度60℃,提取溶剂最初pH 6,此时绿原酸提取率最高,可达1.37%。     

忍冬不同器官中绿原酸的提取及含量测定

[目的]提取忍冬不同器官中的绿原酸并进行含量测定。[方法]采用酸乙醇回流法对＂巨花一号＂忍冬的藤、叶、花和花蕾中绿原酸进行提取,并采用高效液相色谱法对绿原酸进行检测和含量测定。[结果]忍冬不同器官中绿原酸的含量不同,其中花和花蕾中绿原酸的含量较高,藤和叶中含量较少;其排序为：花（3.798 mg/g）〉花蕾（3.795 mg/g）〉藤（2.558 mg/g）〉叶（2.185 mg/g）。[结论]从忍冬药材资源开发利用的角度而言,藤和叶也可以作为绿原酸提取和综合利用的材料。     

分离纯化金银花绿原酸工艺研究

[目的]研究从金银花中提取、纯化绿原酸的工艺。[方法]通过单因素试验和正交试验,筛选最佳提取条件和纯化条件。[结果]最佳提取工艺条件为：提取温度60℃,提取溶剂为60%乙醇（V/V）,pH值为4,提取时间为1.5h,料液比为1∶25。在此条件下,提取的绿原酸得率为4.52%。最佳纯化工艺条件为：洗脱液浓度20%,洗脱液体积为5BV,洗脱液pH值为8,洗脱液流速为5ml/min。在此条件下,纯化的绿原酸产品纯度为58.3%。[结论]该试验得到了绿原酸最佳提取条件和纯化条件,为绿原酸的工业化生产提供了理论试验依据。     

HPLC法定量盐碱地红白忍冬和金银花不同器官中5种活性物质

[目的]建立同时测定盐碱地种植的红白忍冬和金银花中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、木犀草苷和木犀草素的HPLC方法,并比较不同植物器官中5种成分的含量。[方法]色谱柱为InertsilODS-SP C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈;体积流量1.0 m L/min;检测波长327 nm;柱温30℃。[结果]新绿原酸、绿原酸在1.0~500.0μg/m L,咖啡酸在0.2~100.0μg/m L,木犀草苷、木犀草素在0.1~50.0μg/m L具有良好的线性关系;5种成分的日内和日间精密度RSD值均≤4.2%,且在36 h内稳定,平均回收率为95.60%~97.35%。红白忍冬和金银花药材样品中5种化合物的含量差异较显著,在各器官中金银花5种化合物均比红白忍冬高,但红白忍冬中5种化合物的含量亦有较高水平。[结论]该方法简单便捷,适合于红白忍冬中生物活性化合物的定量测定研究,能为该药材的质量控制制定提供科学、可靠的分析技术。     

金银花开花过程中花瓣几种酶活性的变化

[目的]研究金银花开花过程中花瓣几种酶活性的变化。[方法]以金银花不同花期(米蕾期、三青期、二白期、大白期、银花期、金花期)的花朵为试验材料,研究金银花开花过程中可溶性蛋白质和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性的变化。[结果]在金银花开花过程中,随着花瓣可溶性蛋白质含量的下降,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性也随之下降;从银花期到金花期,随花色的变化,丙二醛(MDA)含量逐渐增加。[结论]该研究可为金银花花色变化的生理机制研究提供科学依据。     

不同采收时间·花期及干燥方法对秀山金银花中绿原酸含量的影响

[目的]测定不同采收时间、花期和干燥方法制备的秀山金银花中的绿原酸含量。[方法]按2005年版《中国药典》规定的HPLC法测定样品中绿原酸。[结果]绿原酸的标准曲线为Y=3.6E＋7X-1.5E＋5,r=0.999 7。[结论]金银花的采摘时间、花期、干燥方法均是影响金银花药材绿原酸含量的重要因素,建议在7：00前采摘二白期金银花,采用杀青烘干。