实验性甲状腺功能低下小鼠睾丸的组织学变化研究

研究低甲状态下小鼠睾丸组织结构的变化.结果表明随甲低时间的延长,实验组小鼠睾丸结构逐渐紧密,曲细精管管径及管壁厚度较对照组显著增大、增厚(p＜0.05),各级生精细胞分化减缓,管腔中的精子滞留.由此推测,甲状腺的机能状态直接或间接影响睾丸组织的发育.     

实验性甲低小鼠子宫肥大细胞组化性质的动态变化

研究"甲低"状态下小鼠子宫肥大细胞(Mast Cell)组化性质的动态变化.用组织学方法制做不同时期小鼠子宫的石蜡切片,并进行MTB,AB-S染色及CEC值侧定,观察肥大细胞的量变及其颗粒的组化性质.结果表明实验组小鼠子宫肥大细胞的数量在同期极显著的低于对照组(p＜0.01),且随"甲低"时间的延长均呈递增趋势;AB-S染色显示肥大细胞的红染,红蓝混合染色颗粒随"甲低"时间的延长而逐渐减少,蓝染颗粒逐渐增多,即肥大细胞颗粒由高硫酸化的糖胺多糖向低硫酸化的糖胺多糖转化.提示子宫肥大细胞的数量可反映子宫局部免疫水平.     

间接免疫荧光方法检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达

采用间接免疫荧光方法对小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达进行检测.结果表明,小鼠睾丸组织Hsp70呈极强的表达(+++),并且在各级生精细胞及支持细胞都呈极强表达;小鼠附睾头、附睾体、附睾尾的Hsp70呈现极强表达(+++),主要在附睾上皮细胞,而管腔内精子偶见阳性染色.说明间接免疫荧光方法能够特异性、原位地检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达,而且操作简单,适用于研究Hsp70在精子发生和成熟过程的作用.     

钼对小鼠睾丸NO含量及ATPase活性的影响

为探讨钼对小鼠睾丸NO含量及ATPase活性的影响,选用60只雄性昆明种小鼠,随机分成对照组、钼100组、钼200组、钼400组共4组,即饮水中分别添加0、100、200、400 mg/L钼(钼源为钼酸钠),连续染毒90 d,检测小鼠睾丸组织形态结构,睾丸组织NO含量及ATP酶活性。结果表明,钼染毒小鼠睾丸生精细胞变性,精子减少,睾丸组织NO含量升高,睾丸组织Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶的活性下降,这可能是钼导致雄性小鼠生殖障碍的毒性机制。     

硒对砷致雄性小鼠睾丸组织损伤的修复作用

为了研究硒对砷致雄性小鼠睾丸组织损伤的修复作用,试验选取雄性小鼠18只,随机分为3组,分别为:正常组(C组)、加砷组(砷的饮水质量分数为50 mg/kg,A组)和硒砷联合组(砷的饮水质量分数为50 mg/kg,硒的灌胃量0.5 mg/kg,A+Se组),测量小鼠和睾丸组织的质量,检测抗氧化指标以及睾丸的组织形态和细胞凋亡。结果表明,A组小鼠食欲下降,生长迟缓,出现严重掉毛现象;砷染毒小鼠经硒联合作用后,A+Se组小鼠饮食活动正常,生长发育状态良好,C组和A+Se组小鼠体质量显著高于A组小鼠,A+Se组小鼠睾丸组织质量显著高于A组;A+Se组小鼠血清和睾丸组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化力(T-AOC)的活性极显著高于A组,显著高于C组,A+Se组小鼠血清中丙二醛(MDA)含量显著高于C组,极显著低于A组;砷染毒并加硒的A+Se组,各级生精细胞的数量都较A组有所增加,形态结构也比较完整;A+Se组睾丸组织中的细胞凋亡数极显著低于A组,凋亡只发生于精原细胞,初级精母细胞和睾丸间质细胞没有发生细胞凋亡。硒对砷的毒性起到明显拮抗作用,能够有效修复砷致小鼠睾丸组织的损伤。     

温度对小鼠睾丸生精机能的影响

研究了不同水浴温度对小鼠睾丸组织及生精机能的影响。结果表明：30℃水浴对公鼠睾丸组织无明显影响（P＞0．05）；35℃水浴组，公鼠睾丸组织的曲细精管出现明显退化变性现象（P＜0．05）；40℃水浴组公鼠睾丸组织退行性变化极显著（P＜0．01）。生精细胞对温度的敏感程度依次为：精子细胞＞合线期初级精母细胞＞A型精原细胞；生精上皮对温度也较为敏感，支持细胞及间质细胞对温度敏感性较差。     

香烟烟雾对雄性小鼠生育能力的影响

为了研究香烟烟雾对雄性小鼠生育能力的影响,将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分成烟雾处理组和正常对照组,将2组雄性小鼠分别与未经处理的母鼠一对一交配。统计观察亲本小鼠睾丸组织学改变、精子总数、活动精子比率,以及子代小鼠的平均产仔数、存活率等。结果发现,烟雾处理2周后,子代小鼠的平均产仔数比对照组的低26.03%,仔鼠存活率(吸烟组为87.96%,对照组为93.84%)低6%;精子总数(1.26×105个/mL)和活动精子比率(36%)均分别低于对照组(2.13×105个/mL)和(71%),二者间呈现显著性差异(P<0.001和0.05);组织切片HE染色结果显示:处理组小鼠睾丸组织的正常结构遭到破坏,变得松散,其中的精子数量减少,形态异常。结果表明,香烟烟雾可引起雄性小鼠睾丸组织生精功能障碍,出现精子减少、精子形态异常等病理变化,导致子代出生数和存活率下降。     

小鼠睾丸、肌肉和心脏Ldhc基因表达的比较研究

Ldhc基因仅在哺乳动物成熟的睾丸和精子中表达,并在哺乳动物的睾丸中普遍存在剪接体现象,但是Ldhc基因在肌肉和心脏组织中的表达情况以及与睾丸中该基因的表达丰度比较尚不清楚。因此,以小鼠为研究对象,首先检测小鼠肌肉和心脏组织中Ldhc基因的表达类型,然后采用荧光定量和Western Blot比较分析3个组织中Ldhc基因和蛋白的表达丰度。结果表明,在小鼠肌肉和心脏组织中未检测到c DNA全长,却发现2种Ldhc剪接体,参照小鼠Ldhc基因结构分析了选择性剪接体的结构;剪接体1包含完整酶的NAD+结合结构域和酶的活性中心,有可能表达蛋白;剪接体2缺失第4、7外显子。对小鼠肌肉、心脏和睾丸组织乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的电泳分析未检测到潜在的Ldhc剪接体的表达。荧光定量检测发现,Ldhc基因在睾丸组织中的表达量要显著高于肌肉和心脏组织,而Western Blot仅在睾丸组织中检测到LDHC4蛋白的表达。以上结果表明,小鼠Ldhc基因的选择性剪接机制也存在于肌肉和心脏组织中,推测可能是调控该基因在肌肉和心脏组织中沉寂的方式之一。     

转基因大豆对雄性鼠生殖系统的安全性评估

以含转基因豆粕饲料喂食小鼠,观察对雄性小鼠生殖系统的影响。喂食小鼠120d后,通过PCR方法检测外源基因在睾丸中的存在情况;对睾丸组织制作石蜡切片,观察睾丸组织的病理损伤情况;通过流式细胞术检测睾丸组织中各生殖周期细胞比例;通过彗星电泳检测小鼠精子DNA损伤情况。结果表明:在睾丸组织中未检测到外源基因;睾丸组织切片未发现明显的病理学变化;试验组与对照组小鼠睾丸组织中各生殖周期精细胞比例无显著差异;未检测到精子DNA损伤。说明喂食转基因饲料对小鼠的生殖系统无显著影响。     

乌贼墨多糖对环磷酰胺介导小鼠睾丸氧化应激损伤的干预效应

[目的]探讨乌贼墨多糖对环磷酰胺致小鼠睾丸氧化应激损伤的保护作用.[方法]随机将70只成年雄性昆明小鼠分成7组：正常组、模型组、治疗组1、治疗组2、治疗组3、治疗组4和治疗组5,通过对小鼠腹腔注射环磷酰胺进行造模,灌胃乌贼墨多糖作为化疗保护剂,检测小鼠的体重、睾丸和附睾重量、睾丸指数和附睾指数、精子畸形率、睾丸中抗氧化指标,同时观察睾丸组织结构.[结果]乌贼墨多糖能提高小鼠体重和睾丸重量,降低精子畸形率,提高睾丸组织中抗氧化酶SOD和CAT活性,降低MDA含量,修复睾丸病理学损伤.乌贼墨多糖明显缓解环磷酰胺对睾丸的氧化损伤,其最佳灌胃剂量为80 mg/kg.[结论]乌贼墨多糖有可能作为临床上的化疗辅助药物.     

热应激对小鼠睾丸组织Hsp70表达的影响

利用化学恒温培养箱对小鼠实施42℃1 h/d的热应激处理,建立持续的全身热应激动物模型。在热应激持续到8、13、21和35 d时,颈椎脱臼处死小鼠,应用免疫荧光组织化学和蛋白质印迹分析的方法检测睾丸组织Hsp70的表达。结果显示,对照组的小鼠睾丸组织Hsp70呈极强表达;热应激组小鼠睾丸组织Hsp70表达减弱,但随着热应激持续时间的延长,Hsp70表达逐渐恢复。热应激处理8 d后的小鼠睾丸组织Hsp70呈弱表达、13和21 d后呈极弱表达、35 d后呈弱表达。结果表明,Hsp70在小鼠睾丸正常的精子发生过程中发挥重要的作用;持续性的热应激可以使机体建立热适应,Hsp70可作为睾丸组织对热应激产生热适应的生物学标志之一。     

绵羊睾丸季节变化的组织学研究

从睾丸的体积、重量、曲细精管直径、生精上皮高度、单位面积上曲细精管和间质组织的比例、曲细精管与间质的体积比、单位面积上间质细胞数量及间质细胞和支持细胞的直径等 11项指标进行了四个季节的测量和分析 ,并从生精过程的内分泌调节和绵羊的睾丸结构及结构功能上论述了睾丸组织、性活动和精液品质发生季节性变化的物质基础。另外 ,从外源性促性腺激素等方面探讨了提高家畜繁殖力的途径。     

环境雌激素双酚A对小鼠睾丸功能的影响

为探讨双酚A(bisphenol A,BPA)对雄性小鼠睾丸功能的影响及可能机制,用低剂量(50μmol/kg)、中剂量(250μmol/kg)、高剂量(500μmol/kg)的BPA连续5 d对雄性小鼠腹腔注射给药0.1 ml,以注射E2为阳性对照,阴性对照组腹腔注射等体积大豆油溶剂,首次给药15 d后对小鼠睾丸及附睾的脏器系数、精子数、活动精子百分率、精子畸形率进行统计分析,并对睾丸进行组织病理学研究。结果表明:BPA处理后,小鼠睾丸重量、附睾重量变化不显著;睾丸和附睾脏器系数变化不显著;精子数下降,其中BPA中剂量组下降显著(P<0.05),BPA高剂量组下降极显著(P<0.01);活动精子率下降,其中BPA高剂量组显著下降(P<0.05);精子畸形率BPA各剂量组均升高非常明显(P<0.05);BPA各处理组睾丸精细小管排列出现了松散现象,睾丸间质出现不同程度的水肿,睾丸间质细胞分布稀疏,精细小管管腔内生殖细胞排列层次发生不同程度的紊乱,生殖细胞周围的Sertoli细胞数目稀少,Sertoli细胞脱落到管腔,管腔内的精子细胞数目稀少,损伤程度随BPA浓度增加而愈加严重。认为BPA对雄性小鼠的睾丸功能有损伤作用,并可能对子一代的发育有不良影响。     

睾丸支持细胞对体外精子活力的影响

通过建立小鼠睾丸支持细胞与精子共培养的方法,达到体外提高精子活力的目的.利用睾丸组织切片技术,观察并分析支持细胞对生精细胞的作用.从6~7日龄小鼠睾丸中分离睾丸支持细胞,体外培养两天后,形成细胞单层作为滋养层.取小鼠附睾尾内精子,转移到以支持细胞为滋养层的培养液中培养,同时设立对照组.通过精子分析仪观察各组精子的活力,结果显示,以支持细胞为滋养层的精子前向运动百分比为56.1±5.81%,显著高于对照组40.7±2.96% (P<0.05).利用激光共聚焦显微镜观察精子结构,结果显示两组精子形态结构差异不显著,表明支持细胞能够提高体外精子的活力,但不改变精子的形态结构.     

不同睾丸注射方法对转基因效率的影响

将pEGFP-C1质粒与脂质体混合后注入小鼠睾丸内,30d后观察睾丸形态和组织变化;检测精子和配种后仔鼠转基因阳性率,探讨小鼠睾丸网、曲精细管和睾丸间质3种注射方法对转基因小鼠生产效率的影响。结果显示:3种不同注射方法对小鼠睾丸造成损伤由大到小依次为睾丸网注射、曲精细管注射和睾丸间质注射。荧光检测小鼠精子,睾丸网和曲精细管注射法阳性率分别为(35.13±1.72)%和(15.13±1.45)%,睾丸间质注射法没有观察到阳性精子。PCR检测仔鼠,三者的转基因效率分别为33.3%、12.5%和0。     

曲阜孔林不同月份黑线仓鼠睾丸组织变化的比较研究

采用形态解剖和组织切片手段,对世界最大的人造园林－－曲阜孔林中不同月份黑线仓鼠睾丸的形态结构及质量变化进行了观察比较。结果表明：黑线仓鼠睾丸质量和曲细精管直径在不同月份呈规律性变化,且二者存在显著的正相关关系。从生殖生物学角度探讨了黑线仓鼠睾丸组织随月份变化的规律。     

人参,三七,刺五加和五味子对小鼠睾丸重量的影响

本文研究了人参，三七，刺五加和五味子对小鼠睾丸重量的影响，结果表明，人参，刺五加和五味子能不同程度地使小鼠睾丸的重增加，其中，人参的作用稍强，而高剂量的三七（３ｇ／ｋｇ）却使小鼠睾丸的重量有所降低。     

Caspase-3和Bcl-2在小鼠出生后睾丸发育和精子发生过程的表达

采用免疫组织化学方法研究了Caspase-3和Bcl-2蛋白在7日龄、14日龄、28日龄和56日龄小鼠睾丸组织的表达,旨在观察小鼠出生后睾丸发育和精子发生过程中细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Bcl-2的定位。结果发现Caspase-3在7日龄、14日龄小鼠睾丸组织表达于曲精小管中央和管周生精细胞,在28日龄和56日龄表达于管周精原细胞与支持细胞,初级精母细胞及以后各级生精细胞无Caspase-3表达;Bcl-2在7日龄、14日龄睾丸组织表达于曲精小管中央和管周生精细胞,28日龄和56日龄广泛表达于初级精母细胞以后各级生精细胞,精原细胞选择性表达Bcl-2。Caspase-3和Bcl-2在小鼠睾丸组织发育和精子发生过程中表达。在小鼠出生后睾丸发育的早期,Caspase-3和Bcl-2表达于曲精小管中央,参与曲精小管管腔形成的调节;在性成熟后的睾丸组织中Caspase-3表达于精原细胞,诱导其凋亡;Bcl-2于初级精母细胞以后各级生精细胞高表达,抑制精母以后生殖细胞的凋亡。     

QSA的mRNA在人和小鼠各组织中表达规律

从基因水平上检测精子中新基因QSA的表达规律及时空分布,并推测其可能的生物学作用.采用RT-PCR和原位杂交法检测QSA在人和小鼠多种组织中的表达.RT-PCR结果显示QSA在小鼠的睾丸、精子和受精卵中特异性表达,而在小鼠卵细胞、囊胚等组织中未检测到该基因的mRNA.原位杂交结果表明QSA在人的部分腺体组织(如:睾丸、...     

白消安注射法建立昆明小鼠精原干细胞移植受体模型

【目的】通过对6周龄昆明小鼠腹腔内单次注射不同剂量的白消安来制作精原干细胞移植受体模型。【方法】将104只昆明小鼠随机分成4组,分别注射0(对照组,注射等量的白消安溶解液二甲基亚砜(DMSO)),10,20和30mg/kg白消安,于注射白消安后5,7,9,11和13周记录小鼠的死亡数、小鼠睾丸外观体积、小鼠睾丸质量和小鼠体质量,计算睾丸指数;通过组织学观察注射不同剂量白消安后小鼠曲细精管精子的恢复情况,并检测受体小鼠血液中红细胞和白细胞数量的变化。【结果】注射0(对照组),10,20和30mg/kg白消安13周后,小鼠死亡率分别为0(0/22),11.54%(3/26),17.86%(5/28)和89.29%(25/28)。10mg/kg白消安组小鼠的睾丸指数在注射后5,7和9周显著小于对照组(P0.05),而在注射后11和13周,与对照组差异不显著(P0.05);在注射后不同时间,对照组和10mg/kg白消安组的睾丸指数均显著高于20mg/kg白消安组(P0.05)。在注射白消安5,7,9,11和13周后,对照组曲细精管上皮无变化;10和20mg/kg白消安组有完整精子发生的曲细精管占总曲细精管的百分比分别为(49.56±8.23)%,(66.61±6.13)%,(80.24±10.42)%,(93.87±3.23)%,(92.49±4.58)%;(8.73±9.22)%,(9.89±6.39)%,(29.21±12.31)%,(49.64±3.59)%和(81.99±4.98)%。受体小鼠红细胞和白细胞数量均随着处理时间及白消安处理剂量的变化而变化。【结论】腹腔内注射20mg/kg白消安小鼠的死亡率、睾丸指数均较低,中空的曲细精管数量多,且恢复较慢,适于做精原干细胞移植的受体,合适的移植时间是白消安处理后5~7周。