基于PFGE技术的酸乳中乳酸菌的基因分型

采用选择性培养基分离酸乳中的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌,并利用生理生化和糖发酵实验结合16S rDNA同源性分析对分离所得菌株进行鉴定,获得保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分离菌株。利用脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）分别对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分离株进行基因分型。结果表明：所检测的酸乳样品中均含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌;仅有2 种酸乳的嗜热链球菌为同一菌株,其余酸乳中的保加利亚乳杆菌及嗜热链球菌均为不同菌株。PFGE可以对保加利亚乳杆菌和嗜热     

发酵乳后熟期间嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌产乙醛特性

目的:分析嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌在发酵乳后熟期间产乙醛特性,并研究乙醛合成与其关键调控基因表达量之间的关系.方法:以传统发酵乳制品中筛选出的具有优良发酵特性的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌为研究对象,将各试验菌株在复原全脂乳中进行单菌发酵,发酵结束后(pH4.5～4.6)于4℃冷藏后熟,测定48 h内发酵乳中的乙醛含量;采用反转录定量PCR技术检测乙醛合成关键调控基因pdc、pdh、ald、ldh的表达特征.结果:6株嗜热链球菌产乙醛量介于2.59～14.53 μg/g之间,6株保加利亚乳杆菌产乙醛量介于9.17～39.45 μg/g之间;乙醛合成量随着基因pdc、ald及pdh表达量的升高而增加,而与基因ldh的表达量呈负相关.结论:发酵乳后熟期间嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌不同菌种、不同菌株乙醛产量差异显著,相同菌株在不同后熟时间产乙醛量差异明显,存在菌株特异性和时序变异性;调控基因pdc、pdh及ald具有促进乙醛合成的作用,基因ldh的表达不利于乙醛含量的积累.     

酸奶发酵剂菌种的产香物质及发酵特性研究

对分离自不同来源的国内外直投式发酵剂和酸奶中的13株保加利亚乳杆菌和14株嗜热链球菌在乳中的产酸特性、产生乙醛能力、产生双乙酰能力及产黏特性,总结了保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌对不同酸奶品质的影响.结果表明,嗜热链球菌的前期产酸速度比保加利亚乳杆菌的快,发酵酸乳后产酸主要由保加利亚乳杆菌发酵引起;主要风味物质乙醛由保加利亚乳杆菌发酵产生、双乙酰由嗜热链球菌发酵产生;嗜热链球菌的产粘特性明显高于保加利亚乳杆菌的;嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌中,菌株S5、S7、S9、S10、LB5、TK1适宜加工凝固型发酵酸乳;菌株S5、S11、L9、L2、L1、L8、L6适宜生产风味型酸奶.为筛选优良菌株、研制开发优良酸奶及发酵乳饮料发酵剂提供理论指导.     

乳酸菌固态混合发酵研究

以玉米粉、豆粕、麦麸为基质,以保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌为发酵菌种,采用固态发酵技术,以活菌数为指标,通过单因素和L9(34)正交试验确定了三种菌混合发酵的最佳条件,并对其发酵产物的常规营养成分进行分析测定。结果表明:固态基质中玉米粉:豆粕:麦麸=1:1:1、培养基初始含水量80%p、H值6.3、接种量为10%、三种菌接种比例为1:1:1、发酵温度40℃时的发酵效果最好。在此条件下,保加利亚乳杆菌数为3.0×109 CFU/g,嗜酸乳杆菌数为4.6×109 CFU/g,嗜热链球菌数为5.8×109 CFU/g,发酵产物粗蛋白质、粗脂肪和氨基酸态氮含量分别是发酵前的1.16、1.12和6.94倍。为开发一种新型生物饲料打下基础。     

发酵豆乳的研制

本试验以大豆为主要原料,由保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus,简称Lb)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus,简称St)发酵,采用稀释倾注平板法、吉尔涅尔度(°T)测定和感官评定等试验方法最终确定发酵型酸豆乳的最佳配方。研制成具有豆乳特殊香味,口感酸甜适口,无任何异味,呈浅黄色的凝固性酸豆乳。该酸豆乳最佳配方工艺条件:接菌量5%,蔗糖添加量8%,保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌比例1:4,料水比1:6,115℃15min高压灭菌,42.5℃发酵12h。     

α-乳白蛋白酶解物-钙络合物对酸乳发酵特性的影响

本文旨在探究α-乳白蛋白酶解物-钙络合物(α-LAH-Ca)对酸乳发酵特性的影响。研究不同添加量的α-LAH-Ca对酸乳发酵过程中的滴定酸度、p H值、保加利亚乳杆菌数和嗜热链球菌数的影响。结果表明,α-LAH-Ca的添加可以增加酸乳发酵过程中的滴定酸度值,降低p H值;促进发酵过程中嗜热链球菌的生长,对保加利亚乳杆菌的生长无明显作用。     

乳酸菌冷冻保护剂的选择

乳酸菌浓缩发酵剂的制备过程中,冷冻对菌体的损伤比较明显。通过在保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌菌悬液中添加不同的保护剂并测定冷冻前后乳酸菌菌数,筛选出适用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌的保护剂。最终确定的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌保护剂配方为:蔗糖浓度为10%,脱脂乳浓度为10%,谷氨酸钠浓度为5%。菌体经冷冻处理后,冷冻存活率可达到95.00%,比不添加保护剂的菌体存活率大大提高。此配方也简单易得,完全可以满足生产需要。     

乳酸菌冷冻保护剂选择的研究

乳酸菌浓缩发酵剂的制备过程中,冷冻对菌体的损伤比较明显。通过在保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌菌悬液中添加不同的保护剂并测定冷冻前后乳酸菌菌数,筛选出适用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌的保护剂。最终确定的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌保护剂配方为:蔗糖浓度为10%,脱脂乳浓度为10%,谷氨酸钠浓度为5%。菌体经冷冻处理后,冷冻存活率可达到95.00%,比不添加保护剂的菌体存活率大大提高。此配方也简单易得,完全可以满足生产需要。     

酸奶冰淇淋的发酵剂复配与益生菌存活率的测定

为了开发富含益生菌的酸奶冰淇淋产品,本研究以产酸、产黏以及感官得分为综合评价指标,对发酵剂嗜热链球菌MN-1、嗜热链球菌MN-2分别与保加利亚乳杆菌MN-3、保加利亚乳杆菌MN-4的组合效应进行了研究。结果表明,当嗜热链球菌MN-2与保加利亚乳杆菌MN-4组合,且球菌与杆菌添加比例为10∶1时,最先到达发酵终点,且产品感官评分最高。将婴儿双歧杆菌BI07、乳双歧杆菌BB12、嗜酸乳杆菌La14与干酪乳杆菌LC11加入到酸奶冰淇淋中,在贮藏第90天时干酪乳杆菌LC11活菌数大于106cfu/g,可以作为益生菌酸奶冰淇淋的益生菌株使用。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌促生长因子的研究

研究了保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在改良MRS和PYG培养基中,添加生长因子后的增菌效果,挑选出对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌增菌效果最好的三种生长因子后做三因素三水平的正交试验。试验结果表明,在改良MRS液体培养基中添加7％的番茄汁、10％的麦芽汁和6％的胡萝卜汁时,保加利亚乳杆菌的活菌数达到最高;在改良PYG培养基中添加7％的番茄汁、4％的香菇浸汁和5％的啤酒时,嗜热链球菌的活菌数达到最高。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌促生长剂的研究

研究了保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在改良MRS和PYG培养基中,添加促生长剂后的增菌效果,挑选出对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌增菌效果最好的三种促生长剂后做三因素三水平的正交试验。试验结果表明,在改良MRS液体培养基中添加7％的番茄汁、10％的麦芽汁和6％的胡萝卜汁时,保加利亚乳杆菌的活菌数达到最高;在改良PYG培养基中添加7％的番茄汁、4％的香菇浸汁和5％的啤酒时,嗜热链球菌的活菌数达到最高。     

芽孢杆菌和嗜热链球菌相互作用机理的研究

对芽孢杆菌与嗜热链球菌的相互作用机理进行了初步研究,结果表明:混合培养时嗜热链球菌的生物量和产酸量均显著高于单独培养,芽孢杆菌活菌数是先上升后下降的趋势.芽孢杆菌代谢产生的的蛋白酶水解乳中蛋白质产生的寡肽和氨基酸是促进嗜热链球菌生长的主要因素.芽孢杆菌与嗜热链球菌之间是偏利关系,可以利用这种关系进行新型快速发酵乳的研制.     

影响原料奶发酵因素的初探及其控制

通过用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌(1:1)3%的接种量,42.5℃培养,做发酵试验分析,主要存在以下几个因素影响着原料乳的发酵质量:抗生素的残留量、原始酸度和pH值、蛋白含量和总固体含量。通过实验发现脂肪对其影响不大。     

不同乳酸菌对羊酸奶的感官和质构特性的影响

研究分析不同乳酸菌对羊酸奶感官与质构特性的影响作用,为筛选优良的羊酸奶发酵剂提供依据。使用双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、丁二酮乳链球菌发酵羊奶,对羊酸奶的感官品质、酸度及质构特性进行评定。结果表明,单一菌种发酵,四种菌发酵的羊酸奶的感官评分排序是双歧杆菌〉嗜热链球菌〉保加利亚乳杆菌〉丁二酮乳链球菌,不同乳酸菌发酵羊酸奶的质构特性差异显著,使用双歧杆菌发酵可以获得最佳的质构特性,其发酵的羊酸奶的硬度为34.96g、黏度为802.28g.s、凝聚性为44.65g、粘性指数为137.17g.s、保水力为85.00%;混合发酵剂发酵羊酸奶具有各自不同的感官和质构特性优势,双歧杆菌和嗜热链球菌发酵的羊酸奶的硬度和黏度最好,分别达到29.93g和715.09g.s,但风味欠佳;双歧杆菌和丁二酮乳链球菌发酵的羊酸奶的凝聚性、粘性指数和保水力最好,分别达到45.86g、143.49g.s、91.00%,且风味良好。综合感官评价与质构特性,复合菌种双歧杆菌和丁二酮乳链球菌适宜作为羊酸奶的发酵剂。     

不同球杆菌比例的发酵剂对发酵乳品质的影响

以商业发酵剂G027为对照,将嗜热链球菌PZST4和保加利亚乳杆菌PZLB5按照不同的比例复配,研究其对发酵乳发酵时间、贮藏过程中酸度、质构、脱水收缩性及风味的影响.结果显示,发酵剂中球杆菌活菌数比例的不同对发酵乳品质有显著影响,球杆菌活菌数比例为5000∶1时,发酵乳各项指标都优于其他组合,为最理想的球杆菌搭配组合.     

发酵牦牛乳菌种筛选及加工工艺优化

针对牦牛乳脂肪含量高、营养丰富等特点,本试验研究了适用于发酵牦牛乳的菌种和工艺。以发酵牦牛乳的感官、酸度以及活菌数为指标,从10株乳酸菌中筛选适合牦牛乳发酵的3株菌;在单因素试验基础上,利用响应面优化发酵牦牛乳配方及工艺;测定发酵牦牛乳的理化卫生指标,评估产品质量。结果表明:适用于发酵牦牛乳的3株菌为罗伊氏乳杆菌、约氏乳杆菌和发酵乳杆菌,可与保加利亚乳杆菌及嗜热链球菌按1:1:1:1:1比例复配制成发酵剂;发酵牦牛乳最佳工艺条件为:牦牛奶与荷斯坦牛奶按2:1配比,糖添加量为9%,菌种添加量为4%,30℃发酵30h。回归系数显著性表明,各因素对发酵乳感官评分的影响顺序为:菌种添加量发酵温度糖添加量发酵时间。理化和微生物指标结果显示,发酵牦牛乳的酸度、脂肪、蛋白质、酵母菌和霉菌数、大肠菌群数均符合标准,风味成分双乙酰含量为1.02μg/mL。     

菊芋对嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌生长影响的研究

以菊芋粉为材料,以嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌为实验菌株,研究菊芋在牛乳中对嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌生长的影响,以期为进一步开发菊芋资源和研制菊芋酸奶提供理论依据。结果表明,在牛乳中加入菊芋粉,凝乳时间有所缩短,菊芋粉对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的生长无抑制作用,0.6%菊芋粉添加量对保加利亚生长有显著促进作用。     

发酵乳中嗜酸乳杆菌的计数法

介绍了一种发酵乳中嗜酸乳杆菌的计数法.M17培养基能计数嗜热链球菌,MRS培养基能计数所有的乳杆菌,在MRS培养基中加入克林霉素,嗜酸乳杆菌能够生长,保加利亚乳杆菌不能生长,用这种方法可以专一地测出嗜酸乳杆菌数.     

C．B．T．三菌混合发酵益生菌酸奶发酵基本特性研究

利用酪乳杆菌干酪亚种,德氏乳杆菌保加利亚种和嗜热链球菌三菌混合发酵制作风味独特的酸奶。实验结果表明,在干酪乳杆菌接种量为10％,种子酸度为100^0T,混合发酵温度为38℃,发酵4．5—5h后能获得风味自然独特,口感良好,后酸不强的益生菌酸牛奶．     

水牛奶发酵乳工艺技术的研究

针对水牛奶脂肪含量高、蛋白质颗粒大,易导致水牛奶产品质地较硬、细腻度差、酸香味不足等问题,本文通过单因素试验和Box-Behnken中心组合设计筛选了水牛奶发酵乳的发酵剂和工艺配方,并对产品理化和卫生安全指标进行了检测。结果表明,保加利亚乳杆菌:嗜热链球菌:植物乳杆菌=2:1:3、菌种添加量4%、糖添加量8%、发酵时间6h时,水牛奶发酵乳的组织细腻,呈均匀乳白色,酸香味浓郁且具有丰富的营养价值,脂肪含量达到4.04%,蛋白质含量达到3.31%,乳酸菌含量为3.3x107CFU/m L,卫生指标符合标准。本研究旨在为水牛奶发酵乳生产加工提供参考依据。