共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
2.
3.
根癌农杆菌介导FPF1基因转化菊花的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
经过转化材料的筛选、KM筛选浓度、Cef抗菌浓度以及延迟筛选时间的测定,以根癌农杆菌(Agrobactriumtumefaciens)LBA4404菌株介导FPF1基因转化菊花,对转化材料进行连续KM筛选,获得105株抗性苗,部分植株经PCR检测呈阳性.田间观察部分抗性株与对照相比在株型、叶色及花期上表现出差异. 相似文献
4.
根癌农杆菌介导FPF1基因转化菊花的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
经过转化材料的筛选、KM筛选浓度、Cef抗菌浓度以及延迟筛选时间的测定,以根癌农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)LBA4404菌株介导FPF1基因转化菊花,对转化材料进行连续KM筛选,获得105株抗性苗,部分植株经PCR检测呈阳性.田间观察部分抗性株与对照相比在株型、叶色及花期上表现出差异. 相似文献
5.
利用建立的遗传转化体系,以携带Npt II筛选标记基因和胰蛋白酶抑制剂基因的LBA4404/pRok2(农杆菌/质粒)对山农995604小麦愈伤组织进行遗传转化,获得了三株含有胰蛋白酶抑制剂基因的转基因小麦。通过PCR扩增和Southern杂交检测,证明了外源基因已整合到了三株转基因小麦基因组中。 相似文献
6.
7.
以菊花愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法,利用番茄红素β-环化酶基因(LycB)对菊花进行转化,以抗性愈伤率为指标,探讨了侵染时间、共培养时间、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对转化的影响,建立了LcyB基因转化菊花的遗传转化体系。结果表明:农杆菌侵染菊花愈伤组织的最佳时间为5min;农杆菌菌液浓度OD600值0.55;愈伤组织与农杆菌共培养的时间以3d效果最好;添加AS可提高抗性愈伤率,适宜的AS浓度为100μmol/L;采用Hyg浓度由低到高的筛选方式可有效提高抗性愈伤率;PCR分子检测初步证明目的基因LycB已转入菊花愈伤组织中。 相似文献
8.
9.
农杆菌介导茄子叶转基因体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
本文选择3份茄核心种质,研究Hyg B浓度、农杆菌浓度(OD600)、侵染时间、共培养时间对茄遗传转化效果的影响。同时,选择7份核心种质进行转化研究,以确定茄遗传转化的最佳受体。结果表明,筛选阳性植株的最适Hyg B浓度为50mg/L;菌液浓度(OD_(600))0.6,侵染外植体15min和共培养4d时,抗性愈伤百分率最高;获得的Hyg B抗性植株,经PCR检测及GUS组织化学鉴定,确认外源基因GUS已成功整合到茄基因组中;不同茄遗传型转化效果差异较大,最高转化率可达到10%。 相似文献
10.
根癌农杆菌介导获得转基因西瓜植株 总被引:2,自引:0,他引:2
利用包含双元载体pBI121的农杆菌LBA4404转化西瓜子叶外植体,获得转基因西瓜植株。结果表明:转化受体材料西瓜品种早花、克伦生、黑美人母本F23的分化效率没有明显差别;外植体浸染菌液10 min的处理较为合适;125 mg/L卡那霉素和300 mg/L羧苄青霉素适合于外植体筛选培养。通过PCR检测获得了3株转基因植株,转化效率为1.5%,其中只有2株整合了gus报告基因。Southern杂交和gus染色检测证明2株的基因组中整合了外源基因,报告基因在植株T0-1-3后代呈现3∶1分离。 相似文献
11.
为建立虎杖高效遗传转化体系,用携带有植物表达载体pCAMBIA1301的发根农杆菌ATCC15834侵染虎杖无菌苗获得毛状根。对影响虎杖毛状根诱导的因素如外植体种类、农杆菌活力、培养基种类、超声波辅助时间进行优化以获得最佳培养条件。通过潮霉素筛选阳性毛状根并确定最佳潮霉素浓度。结果表明以叶片为外植体,1/2MS为培养基,菌液OD600=0.8,超声波辅助5s时,虎杖遗传转化毛状根效果最佳。筛选出的毛状根经GUS染色和PCR分子鉴定表明,该方法的阳性转化率为92%。该研究优化了虎杖毛状根的培养条件,为后期实验探究建立了更加高效的虎杖转基因体系。 相似文献
12.
13.
根癌农杆菌介导转化抗虫基因获得转基因烟草 总被引:5,自引:0,他引:5
将抗虫PI基因构建到pIG121Hm质粒的T-DNA上,利用农杆菌LBA4404介导转化烟草,获再生植株。经GUS检测和Dot blot分析,证实外源基因已插入植物细胞基因组中,再生植株的转化率为64.3%。 相似文献
14.
农杆菌介导水稻幼胚转化获转基因植株 总被引:10,自引:0,他引:10
本研究以根癌农杆菌LBA4404(pTOK233)为供试菌株,以水稻幼胚为供试材料,对影响农杆菌介导基因的转化效率的因素进行了研究,确立了农杆菌介导的水稻高效转化体系。采用所确立的转化体系转化了Radon、中国91、02428 3个水稻品种(系)幼胚,结果表明,gus A基因的瞬时表达率均在70%左右,最高为76%;gus A基因稳定表达率均在20%以上,平均为23%。转基因植株的GUS活性检测及Southern杂交分析表明,外源基因事于水稻基因组中,进行了有效地表达,且能稳定地遗传给后代,外源基因在后代遗传符合孟德尔遗传规律。 相似文献
15.
根癌农杆菌介导茶树转基因体系的建立 总被引:2,自引:1,他引:1
利用茶树[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze]品种"农抗早"的叶片进行培养,诱导形成愈伤组织。选择生长旺盛、致密的愈伤组织块与根癌农杆菌EHA105进行共培养,通过潮霉素(Hygromycin)抗性筛选、GUS染色及PCR的验证,获得部分转基因愈伤组织。在添加100μmol·L-1的乙酰丁香酮(AS)处理后,转化率约为10%。同时试验结果证明,AS可以提高农杆菌的转化效率,增加渗透压却不能提高转化率。 相似文献
16.
17.
18.
将抗虫PI基因构建到pIG121Hm质粒的T-DNA上,利用农杆菌LBA4404介导转化烟草,获再生植株.经GUS检测和Dotblot分析,证实外源基因已插入植物细胞基因组中,再生植株的转化率为64.3%. 相似文献
19.
研究了抗生素类药物对转基因载体农杆菌的影响,结果表明各类抗生素都能杀死或抑制农杆菌。其中以亚力希和氧氟沙星的作用最强,而较低浓度(125毫克/升)的吉他霉素和青霉素钠的作用较差。 相似文献