肌肉生长抑制素免疫对雌兔促性腺激素的影响

为了探讨肌肉生长抑制素(MSTN)蛋白主动免疫对雌兔生殖激素合成与分泌的作用,本试验选择30只2月龄的雌兔随机分为3组,分别用生理盐水(对照组)、0.26 mL MSTN蛋白(试验1组)、0.52 mL MSTN蛋白(试验2组)进行免疫,每隔15 d以原剂量再免疫1次,共免疫4次。以第1次免疫当天为0 d,分别在0 d、15 d、30 d、45 d、60 d采集血样,采用酶联免疫吸附法分析血样中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)的含量。结果表明:MSTN蛋白免疫后,试验2组血清中FSH、LH与对照组差异显著(P<0.05);试验1组血清中FSH、LH与对照组差异不显著(P>0.05);各组的血清中E2无显著差异(P>0.05)。研究表明,MSTN蛋白在雌性动物生殖中具有调节作用。     

抑制素被动免疫对黄体中期山羊生殖激素分泌的影响

为了探讨抑制素在山羊生殖激素分泌调节中的作用 ,本试验用抗抑制素血清对黄体中期雌山羊进行了被动免疫试验。将酪 30 -抑制素 α(1,30 ) NH2 与兔血清白蛋白螯合 ,用去势雄山羊制备抗抑制素血清 (INH- AS) ,最终滴度为 1∶96 0 0 0。对照血清来自牛血清白蛋白免疫的去势雄山羊。 12只黄体期日本 SHIBA山羊 ,肌注 PGF2α(2 mg/只 )进行同期发情处理 ,处理后 3～ 5 d母羊出现发情。在发情后 10 d(发情当天为 0 d) ,将母羊分为 2组 ,每组 6只。试验组颈静脉注射 INH- AS(2 0 m L /只 ) ,并在注射前 (0 h)和注射后 6、12、2 4、4 8、72、96、12 0 h采取外周血样 (肝素抗凝 ) ;对照组注射对照血清 (2 0 m L/只 )。抗凝血样离心 (4℃、170× g、15 min)分离血清 ,- 2 0℃保存待测。血清 FSH和 L H含量用NIDDK放免试剂盒测定 ,其中 FSH标记纯品为 NIDDK- o FSH- I- 1,标准品为 NIDDK- o FSH- RO- 1,一抗为 NIDDK-抗- o FSH- 1;L H标记纯品为 NIDDK- o L H- I- 3,标准品为 NIDDK- o L H- RP- 2 4 ,一抗为抗 - o L H- YM。二抗为山羊抗家兔Ig G。血清 E2 和 P含量用1 2 5I放免盒测定。测 E2 时 ,为除去游离脂肪 ,样品用 0 .5 m L乙腈 +2 m L乙烷处理。试验结果表明 ,注射 INH- AS后 12 h,血清 FSH含量显著提高     

维生素E对蛋鸡血清皮质酮浓度的影响

研究维生素E水平和免疫应激处理对蛋鸡血清皮质酮浓度的影响.采用3×3双因子设计,选用270只19周龄的健康白来航蛋鸡,随机分为9组,每组5个重复,每重复6只鸡.其中,3个日粮维生素E添加水平分别为0、40和100 IU/kg,3种免疫应激方式分别为不注射、肌肉注射氯化钠注射液和肌肉注射减蛋综合征(EDS)疫苗.第2次免疫应激前12 h,后24 h、72 h和120 h测定其血清中皮质酮含量.结果表明:维生素E水平和免疫应激对血清中皮质酮浓度没有显著影响.注射和疫苗应激可增加血清中皮质酮的浓度.随着维生素E水平的提高,血清皮质酮浓度达到峰值的时间推迟,并有缓和免疫应激的趋势.     

AA鸡感染大肠杆菌后某些血清矿物质元素的检测

为了解大肠杆菌 (E .coli,O78)感染对病鸡血液中矿物质元素含量的影响 ,将 6 0只 2 3日龄AA鸡均分为 2组 ,试验组经胸肌注射E .coli3.77× 10 6个 /只 ,感染后每隔 10h经心脏采血 6只 ,每只只采一次 ,取血清检测钙、无机磷和铁的含量。结果 ,血清钙含量在感染后 2 0 ,30 ,4 0和 5 0h显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;血清无机磷含量在感染后 2 0和 30h极显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,在 4 0h显著低于对照组 ;血清铁含量在感染后 2 0h极显著低于对照组 ,在 30和 4 0h显著低于对照组     

水鸭类病毒性肝炎的诊治

1　发病情况　 1 999年 9月至 1 0月 ,广东南海一水鸭养殖户温某在饲养肉水鸭的过程中 ,连续 3批雏鸭 (每批 2 50 0只 ) ,均从第 4天开始发生急性传染病。这 3批雏鸭均是经鸭肝炎疫苗免疫母鸭的后代 ,先后出现严重的发病和死亡。第 3批雏水鸭是从 1 0月 1 6号进苗 ,2 0号发现小鸭突然死亡 1 3 2只 ,禽主立即采用鸭肝炎蛋黄抗体作紧急被动免疫 ,分点肌肉注射 1 .1 ml/只 ,第 2天发现鸭子死亡 1 56只 ,第3天死亡 1 3 8只 ,那天晚上 ,禽主又使用鸭肝炎蛋黄抗体作紧急免疫 ,方法同上 ,一直到第 1 0天 ,每天仍死亡 1 0 0多只 ,疫情仍未能得到控制…     

人工授精技术在骡鸭生产中的应用

番鸭与家鸭为不同属的鸭种 ,自然交配受精率较低 ,平均受精率为 30 %～ 4 0 %。本研究通过对公番鸭进行隔离调教 ,采用按摩法采精 ,调教时间为 1～ 2周。平均公番鸭的采精量可达 0 .8mL/只·次。采精频率为 1次 /d ,连续使用 3d ,休息 1d。随机选择樱桃谷产蛋母鸭 2 0 0只 ,金定鸭产蛋母鸭 2 0 0只 ,樱金杂交产蛋母鸭 4 5只。以翻肛法输精 ,每次每只母鸭输精量以 0 .0 4mL为最佳。输精后第 4d种蛋受精率最高 ,平均为 94 .12 %。初步研究表明 ,输精时间间隔以 3～ 4d为宜 ,常温下采出的新鲜精液最好在 30min用完。     

人抑制素主动免疫对母鸡产蛋和内分泌的影响

本文报道了主动免疫抑制素对母鸡卵泡发育、排卵率和外周E2 和P的影响。用人工合成人抑制素α亚基 ( 1 -2 6Tyr.Gly)片断与KLH连接作免疫原 ,免疫 8只母鸡 ,1 2只作对照 ,观察其产蛋率的变化、卵巢卵泡的发育 ;用放免法测定排卵周期中外周E2 和P。免疫组产蛋率比对照组高 (P <0 0 5) ,卵巢上≥ 1 0mm的卵泡数无显著差异 ,但白泡、小黄泡数差异较大。第 3、4、5次免疫后产蛋率显著提高 ,但在实验期抑制素免疫对蛋重没有影响。用放免法测定发现处理组外周基础水平的雌二醇比对照组上升     

不同能量水平饲粮对云上黑山羊泌乳期繁殖激素的影响

试验研究了饲粮能量对羊繁殖激素的影响。选择60只云上黑山羊哺乳母羊,分为3组,分别饲喂3个不同能量水平饲粮。每个组随机选择5只母羊,在母羊产羔后第1、7、14、21、28、42 d采血。同时在这15只母羊发情时连续间隔12 h采血3次,测定血清促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)和催乳素(PRL)浓度。结果表明,第21 d中水平组FSH和LH浓度最高(P0.01);第1 d高水平组E2浓度高于中水平组(P0.05);第21 d,中水平组E2浓度高于高水平组(P0.01);发情12 h内高水平组E2浓度最高(P0.05);第42 d中水平组P浓度高于低水平组(P0.05);第28 d中水平组PRL浓度最高(P0.05);发情36 h低水平组PRL浓度最高(P0.01)。研究发现,饲粮能量水平对云上黑山羊泌乳期及泌乳期发情阶段的生殖激素没有显著影响,仅得到了云上黑山羊母羊繁殖激素的基础数据。     

堆型艾美耳球虫重组DNA质粒pcDNA3-3-1E的免疫原性

用E.acervulina重组质粒pcDNA3-3-1E免疫雏鸡,观察其对雏鸡细胞免疫和体液免疫功能的影响。将7日龄雏鸡随机分为4组,即空白对照组、pcDNA3.1空质粒组、重组质粒免疫组和卵囊免疫组,每组30只。pcDNA3-3-1E经肌肉注射途径免疫雏鸡,剂量为50μL/只（含质粒1g/L）。7日龄免疫1次,14日龄加强免疫1次。检测雏鸡血液T淋巴细胞增殖率,测定血清抗体水平。结果显示,与空质粒组和健康对照组相比,重组质粒组淋巴细胞的增殖能力明显增强（P〈0.05）,外周血中IgG的含量均显著升高（P〈0.05）,表明pcDNA3-3-1E裸质粒DNA能有效的提高雏鸡的细胞免疫和体液免疫水平。     

苦马豆素抗血清治疗家兔小花棘豆中毒

通过检测苦马豆素（swainsonine,SW）抗血清治疗小花棘豆中毒家兔血清免疫和生化指标变化,评价SW抗血清对家兔小花棘豆中毒的治疗效果。将18只家兔随机分为对照组（6只）、攻毒组（6只）和攻毒治疗组（6只）,攻毒试验兔按干重拌料饲喂10g／（kg·d）小花棘豆草粉,攻毒组试验兔出现死亡时（第70天）停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW抗血清,每只兔每天0．5mL,连续注射4d。以攻毒试验开始进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW含量显著高于对照家兔（P〈0．05）;第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔（P〈0．05）,血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔（P〈0．05）;第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU含量显著高于对照家兔（P〈0．05）。攻毒治疗组家免注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性及BuN、CRE、GLU、SW含量较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E～玫瑰花环率显著上升。结果表明,SW抗血清可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

山羊免疫弓形虫代谢分泌抗原后的免疫应答

将山羊随机分为6组,即E／SA纽、E／SA＋cpG组（未乳化）、E／SA＋CpG组、E／SA＋IL-2组、E／SA＋IL-2＋CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊外周全血及涂血片,IHA法检测抗体滴度的动态变化;ELISA法检测IFN-γ、TNF—a、IL-2、IL-4的表达水平;ANAE染色法检测T淋巴细胞的动态变化。结果显示,免疫后各免疫组的IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-4及T淋巴细胞水平显著高于对照组（P〈0．05）,各免疫组的抗体水平均高于对照组。结果表明,E／SA可引起IFN—γ、TNF—a、IL-2、IL-4、T淋巴细胞及抗体水平的升高,说明E／SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答。     

mC3d3-DINHα（1～32）基因免疫对大鼠卯泡发育和生殖激素的影响

选择32只60日龄雌性性成熟大鼠分为4组，分别肌肉注射pcDNA-DPPISS-DINH（试验组1）50μg，poD—NA—DPPISS-DINH—mC3d3（试验组2）50μg，空载体pcDNA3．1（对照组1）50μg，生理盐水（对照组2）1mL。首次免疫20、40d后各组分别同剂量同样免疫程序加强免疫注射1次。结果发现，试验1和2组卵巢的重量都显著高于对照组1和2，但试验1和2组之间的差异不显著（P〉0．05）；试验2组卵巢成熟卵泡发育个数和FSH的浓度显著高于试验1组和对照1和2组（P〈0．05）；加强免疫第40天，试验1、2组的E1的浓度分别显著高于本试验组免疫前第0天，免疫后第20天的激素浓度；试验组与对照组在各个免疫试验时间LH的浓度在统计上差并不显著（P〉0．05）。结果证明，应用重组抑制素真核表达质粒pcDNA-DPPISS-DINH—mC3d3（试验组2）免疫动物可以促进大鼠卵泡的发育，可提高血浆FSH、E2水平，为抑制素基因免疫大动物提供了试验依据。     

人工授精技术在骡鸭生产中应用的研究

番鸭与家鸭为不同属的鸭种 ,自然交配受精率较低 ,平均受精率为 3 0 %～ 40 %。本研究通过对公番鸭进行隔离调教 (调教时间为 1～ 2周 ) ,采用按摩法采精 ,采精量平均可达 0 .8毫升 /只·次。采精频率为 1次 /天 ,连续使用 3天 ,休息 1天。随机选择樱桃谷产蛋母鸭 2 0 0只、金定鸭产蛋母鸭 2 0 0只、樱金杂交产蛋母鸭 45只。以翻肛法输精 ,每次每只母鸭输精量以 0 .0 4毫升为最佳。公番鸭的精子在输精后 4天活力最强 ,种蛋受精率最高 ,平均为94.12 %。初步研究表明 ,输精时间隔以 3～ 4天为宜。常温下采出的新鲜精液最好在 3 0分钟内用完     

超排山羊内源性激素含量变化与卵巢反应的关系

26只波尔山羊随机分成4组(第1、2组各7只,第3、4组各6只),用1.5mg孕酮耳皮下埋植,11d后移去并注射5mgPGF2α2次(间隔12h)进行同期发情。孕酮移去前2d,第1、2、3组用16AUFSH分6次注射(4、4、2、2、2、2AU),间隔12h;第4组同样用16AUFSH,仅将1d的剂量1次注射。第1组纯用pFSH,第2、3、4组用pFSH添加40%pLH。第1、3组山羊在最后2次注射FSH时加注200μgpLH。孕酮移去前,将采血导管插入试验羊颈静脉内并加以固定,孕酮移去前及移去后不同时间采集血样,用ELISA方法测定血浆中17β-雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)的含量。孕酮移去后,每8h用试情公羊试情,发情后用公羊每天配种1~2次至发情结束。胚胎回收前1d,用内窥镜检查卵巢反应。最后1次配种后6~7d,进行非手术回收胚胎。结果显示,试验羊在最后2次注射FSH时加注LH,能缩短孕酮移去后E2上升、E2最高浓度和E2下降的时间。E2的最高浓度出现的时间相对稳定,为孕酮移去后28.7~38.9h。不同的超排处理对FSH的分泌、卵巢反应和胚胎产量没有影响。试验羊用pFSH/40%pLH不加注pLH,能获得较多的卵子或胚胎和可移胚胎。黄体数与E2的最高浓度存在显著的正相关(r=0.44,P<0.05)。E2上升至下降的时间与黄体数存在极显著的负相关(r=-0.52,P<0.05)。黄体数与第2次FSH上升和第2次FSH最高浓度出现的时间均存在显著的正相关(r=0.54和r=0.52,P<0.05)。结果显示,用pFSH/40%pLH超排处理山羊能取得比较满意的效果。E2最高浓度出现的时间为孕酮移去后29~39h。此时间内E2的浓度能表明供体卵巢反应的好坏。     

mC3d3-DINHα(1～32)基因免疫对大鼠卵泡发育和生殖激素的影响

选择32只60日龄雌性性成熟大鼠分为4组,分别肌肉注射pcDNA-DPPISS-DINH(试验组1) 50 μg,pcDNA-DPPISS-DINH-mC3d3 (试验组2) 50 μg,空载体pcDNA3.1 (对照组1) 50 μg,生理盐水(对照组2)1 mL.首次免疫20、40 d后各组分别同剂量同样免疫程序加强免疫注射1次.结果发现,试验1和2组卵巢的重量都显著高于对照组1和2,但试验1和2组之间的差异不显著(P＞0.05);试验2组卵巢成熟卵泡发育个数和FSH的浓度显著高于试验1组和对照1和2组(P＜0.05);加强免疫第40天,试验1、2组的E2的浓度分别显著高于本试验组免疫前第0天,免疫后第20天的激素浓度;试验组与对照组在各个免疫试验时间LH的浓度在统计上差异不显著(P＞0.05).结果证明,应用重组抑制素真核表达质粒pcDNA-DPPISS-DINH-mC3d3(试验组2)免疫动物可以促进大鼠卵泡的发育,可提高血浆FSH、E2水平,为抑制素基因免疫大动物提供了试验依据.     

“黄白散”对兔接种RHD疫苗后免疫功能的影响

在注射兔病毒性出血症 (RHD)疫苗后 ,30只兔随机分为 2组 ,试验组兔饲喂含 1 5 %黄白散的饲料。从接种到第 1 80天 ,每组取兔 8只 ,每隔 1 5d采血 1次 ,检测血凝抑制 (HI)抗体 ;在接种前 1天及接种后 5、 1 0、 1 7、 2 4、 31、 41、 5 1d ,每组取兔 1 0只 ,采血检测ANAE+淋巴细胞百分率 ;在 1 80、 2 4 0、 30 0d时 ,每组分别取兔 5只做攻毒保护试验。结果表明 :2组兔HI抗体峰值分别为 7 3log2和 9 8log2 ,差异极显著 (P <0 0 1 ) ;试验组疫苗保护期可延长 60d ;试验组ANAE+率从第 1 0天至 5 1天与对照组比较 ,差异极显著(P<0 0 1 )。所以黄白散可增强兔接种RHD疫苗后的特异性免疫功能 ,增强RHD疫苗的免疫效果。     

牛病毒性腹泻病毒E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5对犊牛的免疫保护作用

将构建的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,观察其对犊牛抗BVDV感染的免疫保护效果。选取1月龄犊牛,随机挑选20头分成4组,每组5只。1～3组为免疫组,分别口服接种1,5,10 mL重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5(10~(10 )CFU/mL),共免疫3次,每次连续免疫3 d,每次免疫间隔1周;第4组为空白对照组。分别于免疫后0,10,20,30 d检测血清IgG和粪便sIgA的水平和白细胞介素-12(IL-12)表达水平。三免后7 d用BVDV攻毒,5 mL/只(10~(5.5)/mL TCID_(50)),观察免疫犊牛对BVDV感染的免疫保护效果。结果显示,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛体内血清IgG抗体和粪便sIgA抗体含量、血清IL-12表达水平显著高于对照组(P0.05或P0.01),且对BVDV感染的保护率明显高于对照组。结果表明,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,可诱生血清IgG和粪便sIgA类抗体,提高机体IL-12表达水平,有效抵抗BVDV的感染。本试验为研制用于预防BVDV感染的嗜酸乳杆菌活载体疫苗提供依据。     

日粮添加硒与维生素E对母山羊血清激素水平的影响

为了探讨日粮添加硒和维生素E对母山羊血清激素水平的影响,试验选择生理状态相近的已受孕的56只母波尔山羊,以3×2+1因子的处理方式随机分为7个处理组(G0组~G6组),其中硒(纳米硒)设3个水平(0.1,0.2,0.3 mg/kg),维生素E设2个水平(100,200 IU/kg)。预试期7 d,分别在正试期第30,60,90,120天,采用非抗凝真空采血管颈静脉采集血液,离心后测定血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨基酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平。结果表明:1)日粮添加不同水平硒、维生素E及硒和维生素E联合对妊娠第120天时母山羊血清FSH水平的影响均显著高于对照组(P0.05);2)日粮添加不同水平硒、维生素E及硒和维生素E联合对妊娠第30,60,90天时母山羊血清E2水平的影响明显;3)日粮添加不同水平硒、维生素E及硒和维生素E联合对妊娠第90,120天时母山羊血清P水平影响明显,其中添加0.2 mg/kg硒和100 IU/kg维生素E组(G3组)中P水平显著高于对照组(P0.05);4)日粮添加不同水平硒、维生素E及硒和维生素E的联合对妊娠第120天时母山羊血清T4水平的影响与对照组比较均差异显著(P0.05);5)日粮添加不同水平硒、维生素E及硒和维生素E联合对妊娠第30,60天时母山羊血清中FT3水平影响明显,其中添加0.2 mg/kg硒和100 IU/kg维生素E组(G3组)中FT3水平显著高于对照组(P0.05);6)日粮添加不同水平硒、维生素E及硒和维生素E联合对妊娠第90天时母山羊血清FT4水平的影响明显。说明日粮中硒添加量为0.2 mg/kg、维生素E添加量为100 IU/kg时促进激素分泌的作用最佳。     

堆型艾美耳球虫早熟株免疫雏鸡后血清抗体水平动态变化的研究

用堆型艾美耳球虫早熟株对雏鸡进行一次免疫和二次免疫试验 ,研究雏鸡血清抗体的动态变化。试验结果显示 ,在一次免疫试验中 ,各剂量组雏鸡均在免疫后 2天血清抗体出现较高的 OD值 ,之后呈下降趋势 ,11天后逐渐上升 ,到 12～ 13天时出现第 2个峰值 ,各组间的血清抗体 OD值比较 ,3 0 0 0个卵囊 /只剂量组极显著 (P<0 .0 1)高于 10 0 0个 /只、2 0 0 0个 /只和 5 0 0 0个 /只剂量组。在二次免疫试验中 ,8日龄首免、14日龄二免组雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势 ,峰值 (0 .3 75 )出现在二免后第 10天 ,其后稳定地维持在较高水平 (平均 OD值为 0 .3 5 ) ,并且其抗体水平显著地高于 6日龄首免、12日龄二免组 (P<0 .0 5 )。抗体水平动态变化表明 ,堆型艾美耳球虫早熟株有较强的免疫保护力 ,其免疫方式可选用一次免疫 ,剂量为 3 0 0 0个卵囊 /只 ,也可采用二次免疫 ,即 8日龄首免 (15 0 0个 /只 ) ,14日龄二免 (15 0 0个 /只 ) ,从抗体动态变化的稳定性看 ,二次免疫更佳     

阳离子A对内毒素诱导兔自由基损伤的保护作用

将56只白兔随机分成3组Ⅰ组为正常对照组,共8只;Ⅱ组为内毒素(endotoxin,ET)处理组,共24只;Ⅲ组为阳离子A(cationA,CA)+ET组,共24只.Ⅰ组静注等量的生理盐水,Ⅱ组静注ET 300 μg/kg,Ⅲ组静注CA 200 mg/kg后,静注ET 300μg/kg.1、2、3、4、5 h后分别采集血液制备血浆样品.2、5 h捕杀Ⅰ组兔4只,Ⅱ、Ⅲ组兔各12只,迅速采集肝脏制备组织匀浆.检测血浆T-AOC、CAT活性和MDA含量,肝GSH、GSH-ST、GSH-Px活性.结果显示Ⅰ组各项指标均保持相对稳定;Ⅱ组MDA含量比Ⅰ组升高(P＜0.01),Ⅲ组MDA含量升高不显著;Ⅱ组T-AOC、CAT活性比Ⅰ组降低(P＜0.01),Ⅲ组显著高于Ⅱ组(1、2、3 h,P＜0.01;4、5 h,P＜0.05);Ⅱ组肝脏GSH和GSH-ST活性显著降低(P＜0.01),第5 h GSH-Px活性降低(P＜0.01),第2 h(P＜0.05);Ⅲ组GSH、GSH-Px(第5 h显著降低)、GSH-ST活性降低不明显.结果提示自由基参与了ET休克的病理过程,CA能有效地保护血浆和肝脏免受自由基的损伤.