茶树腋芽离体培养中的褐化控制研究

为降低茶树离体培养过程中外植体褐化程度,以‘凫早2号’当年生未木质化的春季健壮新梢为材料,带茎段和叶柄的单个腋芽为外植体,接种前用2.0 g/L PVP溶液浸泡1 h,采用正交试验研究不同培养基、起始培养温度和时间对外植体的褐化控制效果。结果表明,腋芽在1/4MS+BA 2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7.5 g/L培养基中,10℃下避光培养48 h褐变率最低,仅为5.6%;培养时间和培养基类型2个因素对降低腋芽褐化没有显著影响,温度对降低腋芽褐化有显著影响;温度因素外植体对褐化影响最大,培养基次之,培养时间最小,说明低起始培养温度是降低外植体褐化的主要因素。     

蝴蝶兰花梗腋芽离体快繁控制褐变的研究

摘要：褐变是蝴蝶兰离体培养中的常见现象,本试验尝试探寻蝴蝶兰花梗腋芽离体快繁过程中有效控制其褐变的方法,诱导丛生芽。试验证明：带腋芽花梗节段褐变程度比腋芽要轻;适当的暗培养有利于减轻外植体的褐变;细胞分裂素KT比BA的褐变症状要轻,但丛生芽的诱导率不如BA;适当添加一定剂量的PVP、活性炭、柠檬酸等可减轻褐变,柠檬酸、PVP效果比活性炭显著,为特色花卉的工厂化生产提供参考。     

十里香茶离体培养及再生体系研究

为了保护珍贵的十里香茶树资源,掌握利于十里香茶的最优组培条件,本研究对十里香茶组培过程中外植体类型、消毒时间、培养基添加物及培养条件进行了筛选。结果表明,采用轻微木质化的带腋芽茎段经升汞消毒15 min,接种后暗培养5 d,MS+0.2 mg·L^-1 NAA培养基中添加3 mg·L^-1 PVP+2000 mg·L^-1 Vc或者6 mg·L^-1 PVP+3000 mg·L^-1 AC,可在低污染率的前提下将褐化率降为10%左右,一定程度上解决了茶树组培中褐化率高的难题;采用1/8 MS+1 mg·L^-1 IBA培养基有利于外植体生根且增殖迅速。本研究建立了十里香茶的无菌苗离体培养及再生体系,可通过组培手段对其进行大量繁殖。     

毛叶木姜子组织培养中无菌苗建立的初探

为进一步开展毛叶木姜子组培再生研究,获得毛叶木姜子的无菌苗从外植体取材时间、不同消毒剂浓度与时间以及外植体抗褐变等多方面对无菌苗获得的前期条件进行分析。结果表明:于5月上旬采集当年生半木质化枝条剪取茎段,0.2%HgCl 2处理12 min为毛叶木姜子无菌体系建立时的最佳消毒方式,污染率为15.56%,但外植体的褐变率较高;进一步采用正交试验设计L 9(34)进行抗褐变试验,采用多指标综合平衡法进行分析,结果表明:外植体类型、冷藏时间、PVP为外植体抗褐变及腋芽萌动的主导因素,而AC对毛叶木姜子外植体抗褐变效果不明显,予以剔除,得出毛叶木姜子外植体抗褐变的最优水平组合为选用半木质化枝条作为外植体,接种前5℃低温冷藏5 h,培养基为MS+PVP 1.00 g·L^-1。     

影响红掌愈伤组织诱导、增殖和芽分化的因素

以Pink champion等盆栽植株和试管苗为材料，研究了影响红掌愈伤组织诱导、增殖和芽分化的因素。结果表明，不同品种的愈伤组织诱导率和外植体褐变率均存在显著差异，诱导率和褐变率之间呈显著的负相关关系。外植体、外源激素和培养基对愈伤组织的诱导有显著影响，不同品种和外植体的适宜诱导培养基不同。光照对愈伤组织的诱导有显著的抑制作用；高浓度生长素、低浓度细胞分裂素，促进愈伤组织的增殖，高浓度细胞分裂素及低浓度生长素促进愈伤组织芽分化；固体培养比液体培养更有利于愈伤组织的增殖和芽分化。     

云南大叶种茶树新梢带腋芽茎段组织培养初探

自 70年代末以来 ,许多研究者对茶树组织培养进行了研究 ,并取得了可喜的成果 ,以茶树营养器官和生殖器官作外植体培养均有成功报道。但云南大叶种茶树因其品种原因 ,茶多酚含量较高 ,外植体切段易氧化褐死。所以至今云南大叶种茶树组织培养成功的报道鲜见。本研究旨在了解大叶种茶树新梢带腋芽茎切段在不同的激素组合及浓度水平诱导下形成愈伤组织和芽分化的效果 ,为成功组培诱导大叶种茶树植株提供科学的理论依据。1　材料和方法1 .1　材料　供试材料为云南农业大学茶学系教学实验基地云抗 1 0号、云抗 1 4号第一轮一芽三、四叶新梢。1 .2…     

自由人槭‘秋焰’(Acer×freemanii‘Autumn Blaze’)组培的褐变控制研究

针对自由人槭‘秋焰’(Acer×freemanii‘Autumn Blaze’)初代培养外植体褐化严重问题,采取不同取材时间、添加抗褐变剂、暗处理等措施,研究了三种措施对自由人槭‘秋焰’组织培养中褐化的影响效应。结果表明:随着取材月份变化,外植体褐化率提高;AC和PVP对褐变的处理,与Vc和Na2S2O3的处理相比达到差异极显著,又以2.0g/L的PVP抑制褐化效果最佳;随着黑暗处理时间的加长,褐化率呈现高-低-高的变化趋势。春季4、5月份取材,接种于添加PVP2.0g/L的MS上时,直接进行光照培养,可有效控制褐变。     

茶树不同组织体细胞胚、不定芽分化的研究

根据茶树子叶柄、叶柄断面离腋芽的距离,将外植体依次分为C1, C2, C3和L1, L2, L3。通过上述外植体和不同培养基的研究结果表明:子叶柄外植体在MT1和MT3培养基上培养,其不定芽及总分化率是C1>C2>C3;体细胞胚的分化率是C3>C2>C1。叶柄外植体只有L1在MT3培养基上培养分化了芽,MT1培养基的胚性愈伤组织诱导率比MT,培养基高,     

山药组织培养褐化反应的研究

笔者从山药不同外植体（叶、茎段、零余子）、培养基中添加抗氧化剂和不同培养基质3个方面进行试验研究。结果表明,山药不同外植体的褐化程度也不一样,茎段褐化程度最轻;MS培养基中添加150mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)能有效抑制外植体的褐化;在山药组培苗的快繁阶段采用液体基质培养方式能显著降低褐化程度,提高山药组培苗成活率。     

台湾桤木外植体褐化机理初探

对台湾桤木组培褐变中的几个相关酶活性和总酚含量变化的影响进行研究,为台湾桤木组织培养技术做前提。以台湾桤木的腋芽或顶芽为外植体,研究Vc浓度、培养基pH值和外植体采集时间对褐化的影响。总酚含量、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)与外植体褐化相关。其中添加0.1 g/L Vc的培养基、pH为(5.0~5.8)的培养基、上午10:00采摘外植体都能有效抑制褐化。通过不同的处理抑制总酚含量及相关酶的活性,从而减轻台湾桤木外植体的褐化。     

降低魔芋球茎组培褐变的技术研究

以魔芋球茎为外植体,研究组织培养过程中有效降低外植体褐变的方法。采用MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L为基本培养基,用正交实验方法研究不同琼脂浓度、吸附剂及光、暗2种不同培养条件下,对魔芋组织培养过程中褐变的影响。在MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂 6 g/L+AC 0.5 g/L+PVP 0.05 g/L及暗培养条件下,魔芋外植体的褐变率减低为38.3%,愈伤组织诱导率提高到78.3%。在培养基中加入一定量的活性炭(AC)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP),并进行暗培养,可在一定程度上控制魔芋外植体的褐变,促进愈伤组织形成。     

擎天树组培外植体消毒与褐化抑制的研究

以擎天树种子和茎段为试验材料,探讨外植体脱毒及防褐化的方法,为建立擎天树微繁无菌体系奠定基础。结果表明：（1）直接利用种胚作为外植体培养脱毒效果较保留种皮好,且消毒过程添加600万单位青霉素处理,能有效降低种子培养污染率;（2）茎段外植体脱毒较困难,青霉素可在一定程度上减低污染率,但消毒效果并不理想,且培养中出现严重褐化现象;（3）添加VC、PVP和活性炭可有效控制外植体褐化现象,在1/2 MS培养基中添加0.2 mg/L VC、2 g/L PVP和0.5 g/L AC的效果最好。     

大花蕙兰外植体组培褐变的控制

对大花蕙兰离体繁殖中外植体的褐变进行了研究,结果表明：①假鳞茎切块和花茎切段褐变严重,选用茎尖褐变较轻。②在MS、改良MS和1/2MS三种培养基中,以无机盐浓度较低的1/2MS培养基、采用液体培养方式抑褐效果最好,但分化率差异不大,采用固体培养的材料,其分化率略高于液体培养。③在培养基中加入聚乙烯吡烙咯烷酮（PVP）、硫代硫酸钠、活性炭和维生素C,均能减轻褐变程度,其中以500mg/L PVP效果最好。④对褐变严重的外植体,进行接种前的抑褐剂预处理是有必要的,试验中以PVP（2g/L）和硫代硫酸钠（2g/L）预处理20min效果较好。     

马缨杜鹃组织培养过程中外植体褐变与多酚氧化酶及酚类物质的关系

在马缨杜鹃组织培养过程中测定了1～3年生马缨杜鹃叶片、茎尖、茎段的总酚含量和PPO活性.结果表明,1～2年生茎段的总酚含量和PPO活性均较低,两者无显著差异,组织培养中发现,2年生茎段的褐变率最低.进一部研究不同季节2年生茎段组培总酚含量和多酚氧化酶活性变化与褐变率的关系,褐变率和总酚含量呈极显著正相关(r=0.879**),PPO活性与外植体褐变率之间呈显著正相关(r=0.714*),说明外植体褐变率是由酚类物质和PPO引起的.     

植物组织培养中褐化现象控制方法分析

细胞若是受到损坏,会破坏细胞区隔作用,同时氧化物醌类物质和毒性酚类物质均会使组织发生褐变,使植物组织培养失败.在组织培养中,褐变情况是由外植体材料、生理状态、培养条件等因素共同决定的,对此可实施低温培养、添加抗氧化剂、勤转瓶的方式把控褐变.文章主要阐述植物组织培养中褐化现象控制方法,以供参考.     

柱状苹果组培外植体褐化控制与不定芽诱导方法探索

褐变是制约木本果树离体培养成功的重要因素,探讨苹果离体再生过程中经常遇到的外植体褐化问题,对苹果高效再生和遗传转化体系建立具有重要意义。本研究以柱状苹果‘润太一号’为试材,研究了遮光时间(0, 7 d, 14 d)、消毒时间(6 min, 7 min, 8 min, 9 min)、茎段长度和防褐化剂对外植体褐化率的影响,并用不同激素配比对不定芽进行诱导。结果表明,外植体的褐化率随遮光时间增加而有所降低,但外植体的生长势变弱,以遮光7 d的材料为宜,褐化率为25%。不同腋芽个数对褐化率的影响差异不显著。褐化率随着消毒时间的增加而增加,最佳的消毒时间为8 min,褐化率为23.33%。不同防褐化剂处理的结果发现以培养基中加入100 mg/L Cef褐化率最低。不定芽诱导的结果发现,不定芽诱导率随诱导天数增加而增加,以诱导50 d效果较好,最适宜的不定芽诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA。本研究结果可为柱状苹果高效再生体系提供理论依据。     

银杏组织培养中幼茎尖外植体抗褐化培养条件的优化

针对银杏幼茎尖在组培过程中容易出现的褐化问题,从外植体的幼嫩程度、选取长度、培养基的pH值、培养温度以及防褐剂的类型对银杏幼茎尖褐化的影响来控制银杏幼茎尖的褐化率。结果表明,防褐剂对银杏幼茎尖的褐化率的影响不大;选择当年生嫩枝条上2～3 cm的幼茎尖作为外植体,预培养温度15℃～20℃,培养基pH值为6～8时能将银杏幼茎尖的褐化率有效地控制在10%以下。通过探讨不同培养条件对降低银杏幼茎尖组织培养褐化率的效果,有利于促进银杏幼茎尖的丛生芽和根的诱导,达到优化银杏幼茎尖组织培养条件的目的。     

仁用杏离体培养技术

本项目主要研究仁用杏离体培养技术,为仁用杏遗传转化提供良好的再生体系。本试验以仁用杏品种‘围选1号’和‘优一’为试验材料,在仁用杏休眠期对其1年生枝进行短截和长放两种修剪处理。分别于5月、6月、7月、8月、9月上旬采集外植体,研究修剪、外植体采集时期、以及外源激素等因素对仁用杏离体培养的影响。结果表明:5、6月份采集外植体,仁用杏品种‘围选1号’和‘优一’的茎段腋芽的诱导率较高,同时短截处理茎段腋芽的诱导率高于长放处理;8、9月份采集外植体,茎段腋芽的诱导率较低,同时短截处理与长放处理相比较,茎段腋芽的诱导率无明显差异。外源激素6-BA、NAA有利于仁用杏品种‘围选1号’和‘优一’茎段腋芽的诱导、生长与分化。培养基中添加1.0 mg/L 6-BA、0.1 mg/LNAA时,茎段腋芽诱导率最高,组培苗生长最健壮。本研究结果为仁用杏离体培养提供科学数据,进而为仁用杏的基因工程育种提供帮助。     

‘中黄1号’茶树带腋芽茎段组培快繁体系建立

本研究以‘中黄1号’茶树带腋芽茎段为外植体,探索外植体的取样时间和消毒条件、最佳萌发和增殖培养基、生根和壮苗培养基配方以及炼苗移栽条件。结果表明:最佳外植体取样时间为4月份,茎段经75%酒精浸泡60 s,0.1%升汞浸泡12 min,外植体存活率为91.3%,污染率为2.7%,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L GA_3作为腋芽萌发培养基,培养40 d出芽率为91.7%,以MS+4 mg/L 6-BA+1 mg/L IBA作为增殖培养基,培养45 d增值系数可达3.8。以MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA作为壮苗培养基进行壮苗,经45 d可培养至约4～5 cm后诱导生根,在50 mg/L IBA无菌溶液中浸泡5 min后,转至1/2MS+1.5 mg/L IBA生根培养基中,生根率可达82.5%。自然光条件下开瓶室温炼苗5 d,移栽到以营养土和蛭石2∶1比例基质中,成活率最高,移栽成活率为66.7%。本研究建立‘中黄1号’带腋芽茎段组培快繁体系,为‘中黄1号’茶树工厂化育苗提供技术支持。     

大豆转化过程中的褐化现象研究

由大豆愈伤组织所产生的酚类物质可诱发组织产生褐化,并严重影响大豆离体培养时植株的转化率。本文以东农50为试验材料,研究了不同外植体和不同添加剂对抑制褐化的作用。结果表明,子叶节和胚尖作为外植体褐化率较低;L-半胱氨酸和AgNO3对大豆抑制褐化效果明显。