蟹源益生芽孢杆菌的筛选

本试验根据菌体对高温和低pH的耐受性、产酶能力及对病原菌的抑菌效果,对中华绒螯蟹肠道中的芽孢杆菌进行了筛选.结果表明,在筛选到的3株芽孢杆菌中,ESB3菌株抑制中华绒螯蟹病原菌嗜水气单胞菌CL99920菌株的能力最强,产蛋白酶和淀粉酶的能力也较好,在肉汤培养基初始pH 3.0的条件下培养2 h时,其存活率为(32.56±2.87)%,90 ℃水浴处理10 min存活率为(68.54±8.28)%;浓度低于1×108CFU/mL对中华绒螯蟹无毒害作用,1×107 CFU/mL的ESB3能提高中华绒螯蟹对嗜水气单胞菌感染的抵抗力;经形态学和生理生化反应鉴定,ESB3为地衣芽孢杆菌.     

动物肠道益生菌地衣芽孢杆菌的筛选及培养基的优化

为了研制新型微生态制剂,以常用益生菌株--地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为试验菌株,在测定了初发菌株的极限耐受性后,运用紫外诱变技术筛选到了一株耐酸性较强,耐胆汁,耐高温的地衣芽孢杆菌D-11.其极限耐受条件为：pH 4.18,胆盐浓度0.4 g/L,温度58 ℃.并通过试验对该菌株进行了形态和生理生化特征的鉴定.最后通过单因素和正交试验对地衣芽孢杆菌D-11的发酵培养基成分配比进行了选择和优化,为以后的工业化生产提供依据.结果显示当培养基的配比浓度为：玉米淀粉15 g/L、豆粕粉90 g/L、玉米浆6 g/L时菌体的培养效果最好.     

益生菌腊样芽孢杆菌的筛选及培养基的优化

为开发具有特定生理活性的新型微生态制剂,以益生菌腊样芽孢杆菌(BacillusCereus)为初发菌株,对蜡样芽孢杆菌的初发菌株进行了耐受性试验,其耐受性结果为:pH4.8;胆盐浓度(W/V)0.01%;温度48℃。然后对蜡样芽孢杆菌的初发菌株通过紫外线诱变,筛选出能够适应肠道生存环境,耐受胆盐和高温的优良菌株,其极限耐受条件为:pH4.2,胆盐浓度0.045克/100毫升,温度55℃。通过单因素试验和正交实验确定了腊样芽孢杆菌发酵培养基的最佳配比为(W/V):葡萄糖1.0%,豆粕粉3.0%,玉米浆0.3%。对诱变后的菌株进行了生长曲线的测定,并通过生理生化试验对筛选出来的菌株进行鉴定。     

真鲷胃肠道产蛋白酶菌株的分离与筛选

利用酪蛋白培养基和脱脂乳培养基,从健康真鲷肠道中筛选产蛋白酶菌株,并利用福林-酚试剂法测定其酶活力.通过形态学和生理生化手段对产酶能力较强的菌株进行初步鉴定.从健康真鲷肠道中共筛选出20株产蛋白酶菌株,占真鲷肠道茵群的17.4%;其中H1-16、D1-7、X1-5和X2-3产酶活力特别强,所测酶活力分别为45.45、54.55、63.65和59.1 U/mL.为今后制成益生茵制品应用于水产养殖,提高养殖动物的存活率和生长速度提供了理论基础.     

产木聚糖酶芽孢杆菌的筛选鉴定及肉兔饲喂效果研究

为了筛选可以添加于动物饲粮中的产木聚糖酶芽孢杆菌,试验采用刚果红平板变色圈法进行产木聚糖酶芽孢杆菌的初筛,通过液体发酵测定酶活力的方法展开复筛,并进行动物安全性和胃肠道耐受性试验。通过形态特征观察、生理生化试验和16S r DNA全序列分析与发育树构建将其鉴定到种。制备该菌菌剂并将其添加于肉兔日粮中,考察对肉兔的饲喂效果。结果表明:筛选到产木聚糖酶的菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtils)A-5,其产酶活力为56.848 U/ml,耐受p H值2.0,在0.1%的胆酸盐溶液和人工肠液中可正常生长。日粮中添加0.25%的菌剂,可使试验兔日增重较对照组提高7.92%(P<0.01),料重比降低6.09%(P<0.01)。说明在肉兔日粮中添加耐受胃肠道环境的产酶菌剂可以促进动物对饲料的利用率,显著促进肉兔生长。研究结果为饲料的合理利用、肉兔的高效养殖提供了新的思路。     

发酵饲料用具有潜在益生功能芽孢杆菌的筛选及性质研究

试验旨在筛选1株发酵饲料用拮抗大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌的益生芽孢杆菌菌株。通过十字划线法和平板扩散法进行拮抗大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌菌株的筛选,将筛选出的具有较强抑菌活性的菌株进行菌种鉴定,研究其在不同pH值、温度、胆盐浓度下的生长势,以及代谢产物的酶活力。结果表明:筛选得到3株可同时拮抗大肠杆菌、沙门氏菌以及痢疾杆菌的芽孢杆菌菌株,分别为B-1d、B-2d、A14,经过形态学观察和16S rDNA序列分析初步确定B-1d为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),B-2d、A14为莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus Mojave)。3株菌均可以在27～47℃正常繁殖,在pH值4.5～6.5之间能正常生长,在0.6 g/L的胆盐下仍可以生长,还代谢产生蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶。试验得到了3株具有潜在益生功能的发酵饲料用芽孢杆菌菌株。     

一株具有产酸能力的芽孢杆菌的筛选及性能检测

 为了分离具有产酸能力的芽孢杆菌,使用菌种分离培养基从牛粪中分离得到一株具有产酸能力的芽孢菌,命名为GF1。根据该菌株的生理生化特性鉴定和16S rDNA序列测定分析, 初步鉴定该菌为蜡样芽孢杆菌。对GF1发酵液中的代谢产物进行液相色谱分析,发现GF1可代谢产生乳酸、乙酸等有机酸。对GF1进行液体发酵,通过在沸水中加热10 min灭活菌体,检测GF1最终芽孢率可达到90%以上,对GF1进行耐热、耐酸和耐胆盐处理,发现GF1具有良好的耐热性能和较强的耐酸耐胆盐特性,以小鼠做安全性试验,结果成活率为100 %,表明GF1安全无毒。GF1不仅能够产酸,还可以产生芽孢,可以突破乳酸菌在颗粒料中添加的瓶颈。     

反式-4-羟基-L-脯氨酸发酵菌株的筛选

为选育出反式-4-羟基-L-脯氨酸发酵生产的优良菌株,以8株产反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌（Escherichia coli）为出发菌株,对其生长特性、发酵效率进行了比较分析,筛选出2株遗传稳定性好、生产效率高的菌株Hyp-Y1801、Hyp-Y1808,其发酵效价分别为50.4 g/L、47.5g/L,对实现反式-4-羟基-L-脯氨酸的工业化生产具有重要意义。     

鸡源芽孢益生菌的筛选及JM-11菌株的鉴定

为了筛选对鸡腹泻有治疗作用的益生菌,试验利用琼脂扩散法,以大肠杆菌菌株为病源指示菌,在鸡肠道内分离得到具有较强抑菌活性的颉颃细菌70株。利用发酵液平板打孔对其中24株进行复筛,得到1株颉颃活性较高的菌株JM-11。对该菌株进行形态特征的观察和生理生化试验,结合16SrDNA序列分析,并与相应种和属的菌株进行对比,表明JM-11与芽孢杆菌相应性状相近。用BLAST软件在Genbank数据库中对JM-11菌株的序列进行比对,经分析JM-11菌株与枯草芽孢杆菌的相似性水平达到100%,且二者在所构建的系统发育树上处于同一个分支。最终鉴定JM-11菌株为枯草芽孢杆菌。     

传统发酵酸马奶中瑞士乳杆菌耐酸性的筛选

从新疆地区牧民家庭32份自然发酵酸马奶样品中分离鉴定出的82株瑞士乳杆菌中，通过耐酸实验选出39株可在pH3．0和pH3．5酸性环境中生长的菌株进行pH为3．0的人工胃液的耐受性实验。结果表明不同菌株对人工胃液的耐受能力有很大差异。     

鸡源芽孢杆菌的分离鉴定与益生菌株筛选

芽孢杆菌广泛存在于自然界中,能够形成内生孢子,有很强的可逆性,而且能在肠道内产生多种消化酶,为动物机体提供多种维生素等营养物质,有效提高动物生长速度和饲料利用率,是制备微生态制剂的理想菌株.     

益生菌的筛选、功能及其在动物饲养中的应用

随着人们对于益生菌的关注度增加,筛选益生菌的来源已经从传统的发酵制品发展到动植物,其安全性评价也日趋完善。益生菌的生理功能及相关机理研究逐渐深入,包括调节肠道菌群平衡、营养、降胆固醇、提高机体免疫、抗过敏、抗幽门螺旋杆菌感染等方面。益生菌具有多样的生理功能,将其作为饲料添加剂应用于动物饲养中也得到较多地研究。文章就益生菌的分离筛选、生理功能以及相关的作用机理及其在动物饲养中的应用进行阐述,以供参考。     

反刍动物微生态制剂高活性菌种的筛选与比较

该研究的目的是对8株酵母菌和4株霉菌生物学活性进行比较研究,筛选出优良高活性菌株。方法:通过对8株酵母菌的生物量、粗蛋白含量、活菌数、发酵香味及4株霉菌生物量和产酶能力等指标的测定,筛选优良菌株作为试验基础菌种。结果表明,酿酒酵母BC和BD、产朊假丝酵母BY、热带假丝酵母BR和黑曲霉H3,以其优良的生产性能被选为反刍动物微生态制剂试验用菌种。     

一株芽孢杆菌的分离鉴定及其益生潜质分析

 从健康肉鸡的粪便中分离出一株BF3芽孢杆菌,经培养特征、形态观察、生理生化试验以及16SrDNA序列分析相似度为99%,确定该菌株为枯草芽孢杆菌,对该株芽孢杆菌对肠道致病菌的拮抗作用进行研究。结果表明BF3菌株在培养过程中,可以抑制鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌的生长。拮抗作用的强弱与芽孢杆菌和致病菌的接种时间有关。先接种芽孢杆菌后接种致病菌,拮抗作用最强;芽孢杆菌和致病菌同时接种次之;先接种致病菌后接种芽孢杆菌,拮抗作用最弱。并且BF3菌株代谢产物对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌具有非常明显的拮抗作用。     

鸡肠道芽胞杆菌的分离鉴定及产蛋白菌株的筛选试验

本试验从鸡肠道中分离出菌种50株,通过对菌种菌落培养特性、形态观察、生理生化实验,初步鉴定出8株为芽胞杆菌。经产蛋白菌株的筛选试验筛选出1株能够分泌蛋白的芽胞杆菌,该菌株可望成为外源蛋白高效分泌表达的宿主。     

一株解淀粉芽孢杆菌的益生特性及抑菌性研究

本试验旨在研究自筛解淀粉芽孢杆菌DHN04的生长曲线、人工胃肠液、pH及猪胆盐耐受性,并研究其抑菌特性及抗生素敏感性。试验采用生长速率法测定该菌生长曲线,活菌计数法测定人工胃肠液耐受性、耐酸性和耐胆盐等特性,牛津杯法测定抑菌活性,药敏试片测定抗生素敏感性。结果表明,解淀粉芽孢杆菌DHN04在经过4~6 h的缓慢生长期后,进入对数生长期,12~24 h为该菌的稳定生长期;在人工胃液和人工肠液中保持3 h后存活率分别为55.55%和53.33%;pH 2.0时该菌存活率为14.14%,随着酸性的减弱,存活率逐渐上升,在pH 7.0时存活率可以达到93.85%;随着胆盐浓度增加,解淀粉芽孢杆菌的存活率逐渐下降,相同的胆盐浓度,24 h的存活率低于3 h。解淀粉芽孢杆菌对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及四联球菌均具有一定的抑制作用;对抗生素阿莫西林耐药。综上,解淀粉芽孢杆菌能够快速活化,对人工胃肠液、胆盐及pH的耐受性良好,对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等具有一定的抑制作用,对阿莫西林耐药。因此,解淀粉芽孢杆菌DHN04可作为一种潜在的益生菌菌株应用于畜禽养殖生产。     

产蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定及酶学特性分析

为了分离筛选产蛋白酶芽孢杆菌,以开发新型饲料添加剂,本研究选取小鼠肠道内容物为样品,通过对样品进行预处理以及酪蛋白平板检测法分离筛选获得产蛋白酶芽孢杆菌,对该菌进行形态学和分子生物学鉴定并分析其生长规律、产酶规律以及所产蛋白酶的酶学特性。结果表明,经形态学和分子生物学鉴定该菌为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis),其所产蛋白酶的最适反应条件为50℃,pH=8.0,具有一定的高温耐受性,在弱酸、中性和弱碱性条件下表现出一定的稳定性,Ca²⁺和Mn²⁺能够显著提高酶活(P<0.05),Zn²⁺、Mg²⁺、Cu²⁺和EDTA、尿素溶液对蛋白酶活力具有显著抑制作用(P<0.05),培养至16 h菌体量达到最大值,发酵22 h上清液中的蛋白酶活力达到最高值(57.77 U/mL)。该芽孢杆菌的成功筛选分离以及其所产蛋白酶的分析研究,为新型饲料添加剂的开发利用提供了物质基础。