达氟沙星对鸡毒支原体的临床疗效试验

试管内抑菌试验测得达氟沙星，氧氟沙星对鸡毒支原体的最小抑菌浓度（MIC）分别为0．048μg/ml，0．098μg/ml。人式感染鸡毒支原体的鸡24小时后，100、50、25ppm的达氟沙星、50ppm的氧氟沙星连续饮水5天给药，死亡率分别为0、0、3．3％、6．7％，而阳性对照组的死亡率为33％。达氟沙星及对照药物能显著降低鸡的死亡率，气囊损伤率及体内抗体阳性率。     

鸡毒支原体的分离鉴定和最低抑菌浓度测定

从山东、河北、北京和天津等不同地区分离、鉴定了4株鸡毒支原体，通过体外最低抑菌浓度测定发现泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉索、罗红霉素、林可霉素／壮观霉素合剂、氧氟杀星、乳酸红霉素和盐酸林可霉素对该4个菌株的最低抑菌浓度(MIC)平均值分别是0．0062μg/ml、0．0171μg/ml、0．0682μg/ml、8．5248μg/ml、8．5248μg/ml、0．1024μg/ml、0．4550μg/ml和15．4944μg/ml，同时发现不同菌株之间的最低抑菌浓度有明显的差异。该试验结果表明鸡毒支原体容易对抗菌药物产生抗药性，目前临床预防或治疗鸡毒支原体感染可选用泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉素和氧氟杀星等药物，而常规使用的红霉素和罗红霉素效果不佳。     

恩诺沙星与其他抗菌药对鸡毒支原体的体外联合抑菌试验

采用2倍稀释法测定了恩诺沙星及其他8种抗菌药对鸡毒支原体BG44T株的最小抑菌浓度（MIC）,再以棋盘法测定恩诺沙星分别与其他8种抗菌药不同联合对鸡毒支原体BG44T株的敏感性。结果显示：恩诺沙星、替米考星、泰乐菌素、吉他霉素、林可霉素、沃尼妙林、泰妙菌素、氯霉素及氟苯尼考对鸡毒支原体BG44T株的MIC分别为0．063、0．004、0．016、0．063、16、〈0．004、0．008、8、8μg／mL。在8种不同联合用药对鸡毒支原体BG44T株的药敏试验中,恩诺沙星＋替米考星、恩诺沙星＋泰乐菌素、恩诺沙星＋吉他霉素、恩诺沙星＋林可霉素、恩诺沙星＋沃尼妙林、恩诺沙星＋泰妙菌素联合表现出相加作用,恩诺沙星＋氯霉素、恩诺沙星＋氟苯尼考表现出拮抗作用。     

壮观霉素对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡体内鸡毒支原体病的治疗试验

1　材料与方法1 .1　试验药物　壮观霉素为水溶性粉剂 ,批号940 71 2 ,由中国医学科学院医药生物技术研究所北抗药厂生产。对照药物壮观霉素 ,水溶性粉剂 ,由比利时生产 ,批号 573KS,由中国医学科学院医药生物技术研究所提供。1 .2　鸡毒支原体菌种　 R株、S6株 ,均由中国兽医药品监察所保存。1 .3　试验鸡　 9日龄北京白鸡 ,试验前经血清学检测 ,该鸡为鸡毒支原体血清学阴性反应。1 .4　鸡毒支原体血清平板凝集抗原　由中国兽医药品监察所生产 ,批号为 930 1。1 .5　抑菌试验　试验前将试验药壮观霉素用蒸馏水配成一定浓度的溶液过滤除菌…     

甲磺酸培氟沙星对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡毒支原体病的治疗 …

利用甲磺酸培氟沙星水溶性粉剂对鸡毒支原体分别进行体内外的抑菌治疗试验。体外抑菌试验结果表明：该药物能有效地抑制试管中鸡毒支原体的生长繁殖。体内试验结果表明：当饮水中药物浓度达到１００ｍｇ／Ｌ时,能有效地防止由于鸡毒支原体引起的死亡;当饮水中药物浓度达到５０ｍｇ／Ｌ以上时,能明显地减轻以至部分消除鸡毒支原体强毒引起的气囊损伤;和感染不对照组相比,该药物能提高鸡体增重;用甲磺酸培氟沙星治疗,能抑制感染     

抗菌药物联合应用对鸡毒支原体的药敏试验

抗菌药物联合应用对鸡毒支原体的药敏试验钟妮娜王红宁廖德惠赵红（四川农业大学,雅安６２５０１４）鸡败血支原体病是由禽败血性支原体引起的一种接触性传染病。由于发展缓慢,病程较长,又称鸡慢性呼吸道病（ＣＲＤ）。该病在世界范围内流行,在许多国家因此而造成严重...     

鸡毒支原体敏感药物的筛选

用泰乐菌素、强力霉素、罗红霉素、红霉素、丁胺卡那霉素、庆大霉素、环丙沙星、双氟沙星、呋喃唑酮、呋喃他酮、泰妙菌素等药物对3株鸡毒支原体进行体外抑菌试验。结果证明，它们对鸡毒支原体均有抑菌作用，但以泰乐菌素、泰妙菌素、环丙沙星和双氟沙星抑菌效果最好，达到10^-8g／L。     

甲磺酸培氟沙星对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡毒支原体病的治疗试验

利用甲磺酸培氟沙星水溶性粉剂对鸡毒支原体分别进行体内外的抑菌治疗试验。体外抑菌试验结果表明：该药物能有效地抑制试管中鸡毒支原体的生长繁殖。体内试验结果表明：当饮水中药物浓度达到１００ｍｇ／Ｌ时,能有效地防止由于鸡毒支原体引起的死亡;当饮水中药物浓度达到５０ｍｇ／Ｌ以上时,能明显地减轻以至部分消除鸡毒支原体强毒引起的气囊损伤;和感染不治疗对照组相比,该药物能提高鸡体增重;用甲磺酸培氟沙星治疗,能抑制感染鸡体内的鸡毒支原体,从而使部分鸡体内检测不到鸡毒支原体抗体。     

氧氟沙星对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡体内鸡毒支原体病的治疗试验

利用氧氟沙星水溶液对鸡毒支原体分别进行了体外抑菌试验和体内鸡毒支原体病的治疗试验。体外试验结果表明： 当饮水中药物浓度达到２５ｐｐｍ , 能较好地防止由于鸡毒支原体病引起的死亡;当浓度达到５０ｐｐ ｍ 时, 对提高鸡体增重、抑制体内鸡毒支原体产生方面也有一定的作用; 当浓度增至１００ｐｐｍ 时, 能有效地减轻感染鸡的气囊损伤。其作用优于强力米先。     

耐氟喹诺酮类药物鸡毒支原体DNA回旋酶及拓扑异构酶Ⅳ的突变特征

采用二倍稀释法测定临床分离的4株鸡毒支原体对常用抗菌药物的敏感性,PCR方法和基因测序法对鸡毒支原体DNA回旋酶编码基因gyrA、gyrB及拓扑异构酶Ⅳ编码基因parC和parE耐药决定区进行分析。敏感性测定结果表明,4株分离鸡毒支原体对泰乐菌素、泰妙林、沃尼妙林和替米考星有很高的敏感性,对四环素和红霉素中度敏感,对林可霉素、氟苯尼考和氟喹诺酮类药物呈现不同程度的耐药性。4株耐氟喹诺酮类药物鸡毒支原体均在GyrA和ParC的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)发生氨基酸的改变,GyrA的氨基酸取代模式有两种,分别为Ser81→Gly和Ser83→Ile,ParC仅在80位发生氨基酸取代(Ser80→Leu),GyrB和ParE均未发生氨基酸改变。     

三种抗菌药体外对鸡败血支原体的敏感性

本研究测定了蒽诺沙星、泰乐菌素及土霉素对鸡败血支原体（BG44T株）的体外最小抑菌浓度（MIC）及泰乐菌素与土霉素的联合药敏作用。MIC测定采用试管两倍稀释法，联合药敏采用棋盘法，重复三次试验，以平均值作为结果。蒽诺沙星、泰乐菌素及土霉素对鸡败血支原体的MIC分别为0.025μg/ml、0.00625μg/ml和0.5μg/ml。泰乐菌素与土霉素的联合药敏试验的抑菌浓度指数为0.5，合用有协同作用。     

1株鸡毒支原体的分离鉴定及体外敏感中药的筛选

本研究旨在对山东泰安地区鸡毒支原体的流行菌株进行分离培养及鉴定和纯化,并针对该分离株筛选体外敏感的中药,为后续进一步研究提供材料。采用液体培养法与固体培养法从病鸡组织样品中分离、培养和纯化鸡毒支原体,并通过瑞士染色和姬姆萨染色、血清学方法及分子生物学方法对分离株进行初步鉴定,在此基础上,采用微量稀释法测定8种中药对分离菌株的最小抑菌浓度（MIC）,从而筛选到对分离菌株敏感的中药。结果显示,分离菌株在鸡毒支原体液体培养基中增殖后,培养基颜色由红变黄且呈半透明状态,在固体培养基中培养后呈典型的"煎蛋"样儿菌落,均符合鸡毒支原体培养特性;瑞士染色和姬姆萨染色结果显示,菌体形态符合鸡毒支原体的特征;血清学鉴定结果显示,分离株与鸡毒支原体阳性血清发生凝集;分子生物学鉴定结果显示,所扩增的核酸序列与鸡毒支原体匹配度高达99%;MIC测定结果显示,中药黄连和黄柏对分离的鸡毒支原体的抑菌活性较强,属敏感范畴,其MIC分别为≤0.98和0.39 mg/mL,而中药金荞麦和鱼腥草对鸡毒支原体中度敏感,MIC均≥125 mg/mL,板蓝根、白鲜皮、当归、艾叶对鸡毒支原体均不敏感。综上所述,本研究成功分离到1株鸡毒支原体,并且筛选出4种对该菌株敏感的中药,分别为黄连、黄柏、金荞麦和鱼腥草,为后期进一步研究防治鸡毒支原体病的中药组方时提供参考依据。     

羊支原体性肺炎两标准株对抗菌药物敏感性的研究

本实验测定了环丙沙星、氧氟沙星、单诺沙星、红霉素、罗红霉素、泰勒菌素、泰妙菌素、四环素等8种药物对羊肺炎支原体两个标准株Y98和Y-goat的体外抑菌浓度以及红霉素与氧氟沙星、泰勒菌素对Y-goat和四环素与氧氟沙星、泰勒菌素对Y98的联合药敏作用。对羊肺炎支原体两个标准株对抗菌药物的敏感性进行了分析。     

鸡毒支原体感染病理模型复制

以鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)S6标准菌株不同浓度接种16日龄雏鸡,5d后用鸡新城疫疫苗(I系)诱导发病,对以鸡新城疫为诱导因子的鸡毒支原体野外环境病理模型复制进行研究。结果表明:鸡毒支原体S6攻毒菌液浓度为109CCU/mL,攻毒后第5天,用鸡新城疫疫苗(I系)喷雾,5羽份/只,进行激发,可成功复制出鸡毒支原体感染病理模型。     

氟罗沙星对禽败血霉形体（Mycoplasma gallisepticum）病的药效研究

体外抑菌试验测得氟罗沙星（Ｆｌｅｒｏｘａｃｉｎ）对禽败血霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ）的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）为０．０１５ｍｇ／Ｌ。体内药效试验表明,氟罗沙星以２５、５０、１００ｍｇ／Ｌ饮水给药和以５、１０、１５ｍｇ／ｋｇ肌注给药（１次／ｄ）,连续用药５ｄ,对人工气囊接种禽败血霉形体培养液（０．２ｍＬ,约含１０８ｃｆｕ）的雏鸡,保护率均为１００％（３０／３０）,而感染不给药组雏鸡存活率为９３．３％（２８／３０）;相对增重率分别为９０．８％、９１．５％、９２．３％和９１．５％、９１．８％、９２．９％,显著高于感染不给药组（７３．２％）;气囊损伤分分别为２．９３、２．６２、０．９３和１．８、１．１、１．０,而感染不给药组为６．５７,差异显著（Ｐ＜０．０５）;血清玻板凝集试验阳性率分别为２０％（２／１０）、１０％（１／１０）、０（０／１０）和３０％（３／１０）、１０％（１／１０）、１０％（１／１０）,均极显著低于感染不给药组１００％（１０／１０）（Ｐ＜０．０１）。氟罗沙星不同给药途径及不同剂量间药效差异不显著。     

鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重PCR检测方法的建立

为建立能同时检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum, MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的双重PCR诊断方法,该研究根据GenBank中登录的MG gapA基因序列和MS heat shock ATP-dependent protease基因序列,设计2对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了能够同时检测MG和MS的双重PCR诊断方法。特异性检测结果显示,该方法能够扩增出729 bp的MG和309 bp的MS特异性片段,对禽巴氏杆菌、大肠杆菌、鸡白痢沙门菌、副鸡禽杆菌核酸扩增均为阴性;敏感性检测结果显示,对MG和MS DNA的最低检出量均为5×10^-2 ng/μL;临床样品的检测结果显示,所建立的双重PCR方法可同时有效地检测出MG、MS混合感染和单独感染。该研究建立的鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,为快速、高效检测MG和MS提供了技术支持。     

鸡毒支原体磷酸酶PrpC活性检测

HPr激酶/磷酸酶(PrkC/PrpC)系统在细菌和支原体中高度保守,不仅参与糖酵解酶类的磷酸化/去磷酸化,也与毒力、生物被膜等生命活动相关。克隆并突变获得编码鸡毒支原体磷酸酶PrpC的ptc1基因,经原核表达纯化后,利用底物PNPP体外检测其酶活性,并对影响该酶活性的pH、金属离子、温度等影响因子进行分析。结果表明,Ptc1蛋白具有磷酸酶活性,Mn2+为该酶辅因子,最适离子浓度为2mol/L,最适pH为8.5,最适温度为37℃。相同浓度的Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Ba2+、Al 3+、Hg2+等金属离子均对表达产物具有不同程度的抑制活性。初步建立了PrpC功能检测体系,为进一步深入研究PrkC/PrpC调节系统奠定基础。     

替米考星(Tilmicosin)对鸡败血霉形体感染的药效学

以试管二倍稀释法测定替米考星 (Tilmicosin)及对照药物强力霉素、红霉素、泰乐菌素对鸡败血霉形体的最小抑菌浓度分别为 0 .0 0 6 2 5、0 .0 2 5、0 .0 2 5、0 .1m g/ L ,进行了替米考星对鸡败血霉形体的体内药效学研究。结果 ,替米考星以 5 0、75、10 0 mg/ L 饮水给药 5 d,对实验性感染鸡败血霉形体有显著疗效 ,用药组增重均显著高于对照组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,并能明显减少抗体阳性反应率 ,极显著地减少气囊损伤记分 (P<0 .0 1)