基于单核细胞增生李斯特菌actA基因的环介导等温扩增技术快速检测方法的建立

单核细胞增生李斯特菌(Lm)是主要的食源性致病菌之一,也是一种重要的人畜共患病原菌,感染人和动物后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多症等.为建立快速检测Lm的方法,本研究以Lm毒力因子actA作为特异性检测的靶基因,通过条件优化初步建立了快速检测食源性Lm的环介导等温扩增(LAMP)方法.并采用该方法进行了特异性、...     

产单核细胞李斯特菌的污染状况监测

应用PCR快速检测方法对生猪屠宰加工流通环节的产单核细胞李斯特菌（Listeria monocytogenes,Lm）进行分子流行病学监测,结果表明,市场生鲜肉污染率为5%,而宰前猪毛、大肠及入冷库前猪肉样品未被污染。     

定点屠宰猪肉中单核细胞增生李斯特菌分离及药敏试验研究

为了解和掌握定点屠宰猪肉中单核细胞增生李斯特菌(Lm)污染状况及药敏试验情况,应用国标法和PCR技术对合肥市5家定点屠宰场370份猪肉样品进行Lm分离和hly毒力基因检测,并采用标准Kirby-Bauer纸片法对分离菌株进行12种抗生素敏感试验。结果显示,Lm检出率为1.08%(4/370),4株Lm对恩诺沙星、新霉素、强力霉素、青霉素、环丙沙星、氨苄青霉素、庆大霉素、红霉素、诺氟沙星、丁胺卡那霉素、卡那霉素敏感,对依诺沙星耐药。表明合肥市定点屠宰猪肉中存在一定程度Lm的污染,hly毒力基因检测是鉴定Lm的一个重要方法;Lm对多种抗生素敏感,对依诺沙星耐药。     

单核细胞增生李斯特菌检测技术研究进展

单核细胞增生李斯特菌(简称单增李斯特菌)是一种世界范围内的食源性病原菌,食用被该菌污染的食物会引起李斯特菌病,致死率高达20％～30％.单增李斯特菌广泛存在于环境、食品、人和动物宿主中,可以在极端条件下生存并引起食物污染,已成为人们关注的重要公共卫生问题.论文主要综述了近年来国内外几种关于单增李斯特菌的快速检测方法,包...     

乳及乳制品中食源性致病菌快速检测技术的应用研究进展

由于乳制品营养丰富,为金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、克罗诺杆菌等食源性致病菌提供了良好的生长环境,严重威胁乳制品相关的食品安全,因此对乳制品中食源性致病菌进行快速、准确检测是防治和检测食源性致病菌工作中必不可少的环节。近年来,分子生物学、免疫学等检测分析技术快速发展,相较于传统致病菌检测方法的繁琐耗时,这些方法灵敏度高、检测速度快、操作简单,因而备受关注。本文对近年来食源性致病菌检测新技术及应用进行综述,并对乳制品中食源性致病菌快速检测技术可能的发展趋势进行展望,以期为乳制品中食源性致病菌快速检测提供参考。     

生鸡屠宰场屠宰环节单核细胞增生李斯特菌的分子分型研究

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种革兰氏阳性兼性胞内寄生的食源性病原菌,为了解鸡肉产品中Lm污染情况及其血清型等,本研究采集江苏省某生鸡屠宰场屠宰环境样品(40份)、屠宰环节肉鸡擦拭样品(160份),进行Lm的分离鉴定,采用多重PCR和O抗原玻片凝集相结合的方法对分离菌株进行血清分型,并通过PCR检测7个管家基因对分离菌株进行多位点序列分型(MLST)。结果显示,所采集的200份样品共分离到40株Lm,总检出率为20%,其中环境擦拭样品Lm分离率为37.5%(15/40),肉鸡胴体擦拭样品Lm分离率为15.6%(25/160)。分离菌株血清型以1/2c(47.5%, 19/40)为主,其次为1/2a(30.0%, 12/40), 1/2b(22.5%,9/40)。优势ST型为ST9(40.0%),其次为ST87(20.0%)和ST8(10.0%),本研究还发现了一种新的ST型,它与ST9同属于CC9。本研究提示该屠宰场环境存在一定程度的Lm污染,可能随着屠宰过程污染鸡肉,因此需要加强对该屠宰场的监测以降低屠宰过程中Lm对鸡肉制品造成的污染。     

鲜猪肉病原菌污染研究进展

鲜猪肉病原菌污染是引起食源性中毒因素之一,近年来有愈演愈烈趋势。论文从鲜猪肉病原菌污染种类(革兰阳性菌和革兰阴性菌)、污染来源(内源性和外源性)、检测技术(病原学、免疫学、分子生物学和光谱学)和控制措施(源头环节控制、加工环节控制和流通销售环节控制)等四个方面进行了综述,以期为鲜猪肉的卫生安全保障提供参考。     

石河子地区动物性食品中单核细胞增生李斯特菌的检测

目的了解新疆石河子地区动物性食品中单核细胞增生李斯特氏菌(LM)污染状况。方法在石河子地区选取5个具有代表性动物性食品零售点,对最常食用的生鲜猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、冻鸡肉、冻虾和冻带鱼8类动物性食品进行随机采样,采用病原分离培养和PCR法对样品中的单核细胞增生李斯特氏菌进行检测。结果检测8类249份食品样品,细菌分离鉴定阳性样品12份,平均阳性率4.82%;PCR法检测阳性样品36份,平均阳性率为14.46%。结论石河子动物性食品中LM的污染比较普遍,尤以冻鸡肉和冻虾LM污染较重,新鲜猪肉、牛肉和羊肉LM污染程度较轻。     

定点屠宰场（点）猪肉中三种主要食源性致病菌污染情况调查

为了解本地生猪定点屠宰场(点)猪肉中的沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌3种食源性致病菌污染情况,对10个场(点)出场的猪肉进行抽样,采用沙门氏菌测试片、大肠杆菌O157:H7测试片及李斯特菌检测板进行快速检测,再用国标法对快速检测出的阳性样品进行复检鉴定。结果显示:50份样本中,检出沙门氏菌阳性7份,阳性检出率为14%;20份样本中,检出大肠杆菌O157:H7阳性1份,阳性检出率为5%,检出单增李斯特菌阳性5份,阳性检出率为25%。此外,还发现样本中存在细菌的混合污染,其中沙门氏菌和单增李斯特菌双阳性2份,3种菌全阳性1份。调查结果表明:本地屠宰场出场猪肉中,这3种主要食源致病菌污染情况较严重,特别是小型屠宰点,应引起监管部门重视,加快推进屠宰企业转型升级;快速测试片的检测结果准确性偏低,特异性差,需要尽快建立一种快速特异的检测方法,用于屠宰场的致病菌快速检测。     

沙门菌检测方法研究进展

沙门菌不仅是一种重要的畜禽病原菌,而且还是一种主要的食源性致病菌,对畜牧生产和公共卫生都具有巨大的威胁。因此,加强对沙门菌的快速准确检测是保障畜禽生产安全和食品安全的一种必需且有效的手段。目前沙门菌的检测方法包括传统细菌分离和生化鉴定、分子鉴定和免疫学检测等方法,其中,传统细菌分离并做生化鉴定的方法虽被认定为沙门菌检测的金标准,但较为耗时;分子鉴定通过检测特异性目标片段的有无,在遗传物质水平上鉴定致病菌种属;免疫学检测法则对样品中抗原或者抗体进行检测。依据各方法的特点,在不同的实际运用过程中需要选择相应的检测方法,以便实现快速诊断、及时治疗和处置相关疾病与食品安全事件的目标。     

表观健康的猪肉携带猪链球菌的调查

猪链球菌病(SS)是由猪链球菌引起的人兽共患传染性疾病,给养猪业及公共卫生安全构成了严重的威胁.人和猪感染发病的临床症状相似.以往对猪肉进行食品安全检测的项目多集中在致泻大肠杆菌、沙门菌、单增李斯特菌等食源性病原菌,检测过程中,偶尔也能分离到链球菌,但多数是没有致病性的[1-2].在经济高度发达的时代,食品安全越来越成为人们关注的焦点,本次通过对广州大型农贸市场销售的屠宰猪肉的随机抽样,初步了解表观健康的猪肉携带猪链球菌的情况和耐药性情况,为防范食源性猪链球菌病感染人及耐药性的传播提供理论依据.     

环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测单增李斯特菌的研究

为建立一种快速、便捷的单增李斯特菌检测方法,本研究针对单增李斯特菌hlyA基因设计了4条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素标记的探针,采用环介导等温扩增(LAMP)与横向流动试纸条检测技术(LFD)联合应用,建立了一种快速、便捷的单增李斯特菌LAMP-LFD检测方法。通过对其反应条件进行优化,结果显示,优化后的扩增温度和时间为63℃反应50 min,完成检测全过程仅需80 min。该方法仅可以特异性地检出单增李斯特菌,而对其它6种常见食源性致病菌的检测均呈阴性。对纯细菌培养物的检测灵敏度为3.6 cfu/m L,是利用外引物建立的PCR方法的100倍。该方法重复性好。对15份牛奶和15份猪肉的细菌分离鉴定和LAMP-LFD检测表明,二者符合率为100%。研究结果表明,本研究建立的LAMP-LFD方法能够快速、特异地检测单增李斯特菌,适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用,具有较高的推广价值。     

生猪屠宰场中沙门菌的传播特点和防控新技术

由肠道沙门菌引起的沙门菌病是一种全球性的食源性人兽共患疾病.猪肉是人类感染沙门菌的常见来源,屠宰生产线是控制沙门菌在食物链上传播的关键阶段.沙门菌的快速检测是生猪屠宰场防控的关键,其中新型检测方法具有灵敏性高、特异性强、快速简便等优点,应用前景好.利用分子分型技术对屠宰生产线上的沙门菌分离株进行追踪溯源可为防控奠定理论...     

3种食源性细菌免疫磁珠联合ATP发光检测技术研究

沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和金黄色葡萄球菌是食品中常见的致病菌,在国内外常引起食源性疾病。为解决食源性疾病中的微生物检测问题,本研究将免疫磁珠技术和ATP发光技术联合用于食品微生物检测,选择沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌病和金黄色葡萄球菌为检测对象,建立快速检测这3种常见食源性病原菌的富集及检测新方法。该方法在显著缩短预增菌时间的条件下,通过免疫磁珠的富集作用获得与常规增菌时间同样的效果,样品中的微生物浓度增加了10倍,大大提高了样本检出率,缩短了检测周期。结果表明,本研究建立的免疫磁珠富集后联合ATP发光技术具有快速、敏感、特异和低廉的优点,可用于检测食品中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌以及金黄色葡萄球菌,具有较好的推广应用前景。     

食源性单增李斯特菌检测技术研究进展

单增李斯特菌是一种常见的食源性致病菌,会导致严重的人兽共患病。目前单增李斯特菌的检测方法主要包括传统方法、酶联免疫法、免疫胶体金技术、PCR检测技术、等温扩增技术、全自动微生物检测系统、生物芯片技术等。本文对各方法的原理、优缺点、应用情况及发展前景进行了概述。     

单增李斯特菌检测方法的最新研究进展

单增李斯特菌（LM）是人畜致病菌。近年来,因食品污染LM而导致的食物中毒事件日渐增多,因此LM的检测技术就显得越来越重要。LM检测技术主要有传统分离与鉴定方法、显色培养基快速鉴定技术、全自动微生物分析系统、分子生物学方法、免疫学方法。     

免疫层析技术在食源性细菌检测中的应用及优化

目前食品安全问题已经成为国家和社会关注的一项重点问题,食源性致病菌是引发食源性疾病的最主要因素。在全球各地均曾报道食源性致病菌如沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌等引起的食源性疾病事件。建立快速、准确检测食源性致病菌的方法是预防和控制相关疾病的前提。免疫层析技术在各个领域中发展迅速,应用广泛。文章主要综述了免疫层析技术在食源性细菌检测中的应用及该技术的优化方法,以期为今后开发快速检测技术提供理论支持。     

单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立

为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。     

应用PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌

单核细胞增生性李斯特氏菌（Listeria Monocytogenes，LM0）简称单增李氏菌，是一种重要的人畜共患病和食源性病原菌之一，可引起人和多种动物的脑膜炎、败血症及流产等症状，死亡率达30％～40％，对畜牧业生产和人类健康构成严重威胁。传统的分离鉴定方法检测周期长、操作繁琐，不能满足食品快速检测和疾病暴发时诊断的需要。而PCR方法具有检测速度快、操作简便和特异性强等优点。本试验通过扩增hly基因部分片段，建立单增李氏菌PCR检测方法。     

三明市四种销售畜禽肉品中李斯特氏菌污染情况调查

为了解三明市畜禽肉类中李斯特氏菌的污染情况。2000年6月至2001年5月,采集市区菜市场销售的畜禽肉类,按GB4789-94进行李斯特氏菌分离、鉴定。结果从4种畜禽肉类中检出了李斯特氏菌,检出率为12.2%(49/403),其中猪肉检出率最高为18.2%,鸡肉次之,鸭肉最低为3.8%,(p<0.01)。一年四季均有李斯特氏菌检出,秋季较高,(p>0.05)。本次仅从猪肉中检出1株单核细胞增生李斯特氏菌,占2.0%,其余44株为格氏李斯特氏菌,占89.9%,默氏李斯特氏菌4株占8.2%。