盐酸克仑特罗单抗检测试剂盒的研制

在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上，首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒，本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选，并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0．1ng／m1，检测范围在0．1～10ng／ml，通过对24份阳性样品检测并与德国r—b1opharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验，阳性符合率95．8%。     

盐酸克仑特罗单克隆抗体的研制

本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株。而以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体特异性强,与其它克仑特罗类药物无交叉反应。     

盐酸克仑特罗单抗检测试剂盒的研制

在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒,本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选,并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0.1ng/ml,检测范围在0.1～10ng/ml,通过对24份阳性样品检测并与德国r-biopharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验,阳性符合率95.8%。     

二种盐酸克仑特罗检测试剂盒的检测对比试验

盐酸克仑特罗 (Clenbuterol Hydrochlo-ride)又名克喘素 ,是人工合成的β2 -肾上腺素受体激动剂。曾经作为瘦肉促长剂应用于养猪生产。但这种药物在畜体内的残留会使食用者出现口干、头昏 ,心跳加快 ,抽搐等中毒症状。近年来 ,浙江、广东、江苏等地多次发生此类药物中毒事件。为此 ,有关部门已严禁使用盐酸克仑特罗作为饲料添加剂使用。确定酶联免疫法检测猪尿中盐酸克仑特罗的方法为主要监控手段之一。但该法所用试剂盒需国外进口 ,费用昂贵 ,难以在生产中推广应用。而对国产试剂盒的稳定性、敏感性缺少临床应用数据。为考察国产试剂盒替…     

盐酸克仓特罗单克隆抗体的研制

本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株.而以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体特异性强,与其它克仑特罗类药物无交叉反应.     

供港澳活猪盐酸克仑特罗残留的调查

盐酸克它特罗为β─兴奋剂之一．β─兴奋剂是一类人工合成药物,主要用于防治人、畜的支气管哮喘和支气管痉挛．在药学上被称β─肝肾上腺素能兴奋剂,治疗量较低,临床上常会引起心悸、头晕、手颤等副作用老动物饲料中剂量加大至治疗量的5－6倍,延长使用期,则有降低家畜脂肪,提高瘦肉率,促进家畜生长的效果一由于β─兴奋剂对人体的严重副作用,将其添加到家畜的饲料中起生长促进作用在一些国家属违法行为．早在80年代,欧盟已颁布法规禁止将卜兴奋剂作生长促进剂使用;在美国、加拿大也未批准使用;在香港,卜兴奋剂未在《药剂业和毒…     

饲料中盐酸克仑特罗的检测试验

在饲料中添加使用盐酸克仑特罗(瘦肉精)在我国属违法行为.为考察新疆的饲料安全情况,我们抽取区内生产和经营的近300份饲料进行盐酸克仑特罗的检测试验,现报告如下.     

盐酸克仑特罗及其残留毒性

盐酸克仑特罗（俗称：瘦肉精）属β2受体兴奋剂，我国国家药典有收载，供人医临床使用，但畜牧生产上的非法使用造成在动物性食品中的残留超标，对消费者具有直接毒性作用，危及人类健康。本文对盐酸克仑特罗的药理作用及其非法使用造成的残留毒性进行了综述，供广大畜牧工作者参考。     

苯巴比妥残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定

苯巴比妥（Phenobarbital,PB）具有镇静、催眠等作用,在肉用畜禽生产中常被用作饲料添加剂,但PB存在神经、骨髓、致畸、致癌等毒性作用,其残留严重危害人们的身体健康,我国和世界上多数国家都严禁PB用作饲料添加剂.目前,国外已开发出PB残留检测的ELISA试剂盒,如德国DadeBehring公司等,国内尚未见报道.本研究应用杂交瘤技术在制备出PB单克隆抗体（mAb）基础上,成功研制出PB残留检测阻断EILSA试剂盒（PB-Kit）,并对其性能进行了测定,现报告如下.     

磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的研制

本研究将磺胺二甲嘧啶与人血清白蛋白、卵清白蛋白联接 ,分别作为免疫原、包被原 ,建立 EL ISA筛选方法 ,并利用杂交瘤技术 ,制备了分泌抗磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的细胞株。经鉴定的单克隆抗体的蛋白亚型为 Ig G1 ;染色体数为 88～94条 ;分子量为 170 .2 KDa;亲和常数为 2 .5× 10 1 0 M- 1 ;与其他 6种磺胺药 (SDM、SDEP、SMM、SMZ、SD、SQ)无交叉反应     

应用ELISA检测肉猪尿液中盐酸克仑特罗方法的研究

应用酶联免疫吸附法(ELISA)，检测肉猪尿液中盐酸克仑特罗残留，实现了肉猪活体盐酸克仑特罗快速测定。实验结果表明，盐酸克仑特罗的线性范围为200—2000ng/kg，最小检出限为100ng/L,样品不用前处理可直接检测，1个样品的2个平行样测定时间为45min。     

盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定

为进一步建立克伦特罗(CL)残留检测方法,给制备CL残留检测试剂盒打下基础,进行了CL单克隆抗体(McAb)的制备研究。以重氮反应,将CL与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和检测原,并通过杂交瘤技术,获得了5株能稳定分泌特异结合CL小分子的单克隆抗体杂交瘤细胞株(1E9A9、2A9C1、3F2E9、6G2E9、6E10D9)。这5株细胞株经过体外传代培养和冻存复苏后均能稳定分泌抗体。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的这5株细胞上清液抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:2.56×10~5;选用3F2E9、6E10D9细胞株,制备CL单克隆抗体腹水并纯化,其纯化后的腹水抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:2.56×10~5,BCA(2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠)方法检测的浓度分别为1.60 mg/mL、1.54 mg/mL;最终通过斑点ELISA(Dot-ELISA)方法测定CL抗原与这2株抗体有较强的结合力。在上述方法的制备及验证下,成功获得了特异性较高的CL单克隆抗体,为进一步研制CL残留检测试剂盒奠定了基础。     

盐酸克仑特罗检测方法及干扰因素初探

盐酸克仑特罗是一类人工合成药物,又名克喘素,可改善人及动物的瘦肉与脂肪的比例。早于１９９８年该药被发现非法使用于畜牧业,以提高瘦肉率,被有些部门奉为“瘦肉精”。该药残余药物及代谢产物会停留并积聚于动物内部组织及毛发,人食用后会引起肌肉颤动、心动过速、肌疼、恶心、头晕目眩等中毒症状,对高血压和心脏病人尤其危险。因此盐酸克仑特罗是一项重要的卫生指标。１９９８年５月份,香港媒体报道了活猪内脏中含有盐酸克仑特罗。据了解,北京、上海、广东等地都发生过此类中毒事件或在市售的猪肉内脏中查出过此药。今年４月,农…     

用竞争性酶联免疫技术检测活猪盐酸克仑特罗残留

本文应用竞争性ＥＬＩＳＡ检测饲喂某厂生产浓缩料的健康猪,证实该逍缩料中添加了盐酸克仑特罗。     

ELISA检测盐酸克仑特罗的经验与体会

酶联免疫吸附法(ELISA)是一种敏感性高、特异性强、重复性好的测定新技术,具有操作简便、样品容量大、成本低等优点,也是目前盐酸克仑特罗的主要检测方法.     

抗氯霉素单克隆抗体的制备与鉴定

本文用人工合成的氯霉素 -牛血清白蛋白 (CAP- BSA)免疫 BAL B/ C小鼠 ,通过杂交瘤技术建立了 2株分泌抗氯霉素的单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 1D1 0 和 5 E6 。经间接酶联免疫吸附试验 (ci EL ISA)检测细胞培养上清效价为 1∶ 5 12 ,诱生腹水的效价可达 1× 10 8。两株单克隆抗体的亚型为 Ig G1 ,杂交瘤染色体数目为 84～ 96条。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。ci EL ISA检测显示其与常见抗生素及结构类似物的交叉反应小 ,其灵敏度为 0 .1ng/ ml,IC50 为 2 .38ng/ m l,这表明该单抗具有较大的应用价值     

动物组织中磺胺二甲嘧啶残留检测ELISA试剂盒的研制

在建立竞争ELISA方法的基础上，首次研制出检测磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体快速检测试剂盒，并对其检测限、精密度、检测范围以及鸡肌肉组织中的添加回收实验做了详细研究。本试剂盒的检测限为1．0ng／m1，检测范围为1．0-81．0ng／m1，批内变异系数＜8．9％，批间变异系数＜9．5％，在10、60和200ng／m1水平鸡肌肉组织中添加，回收率为64．5％-85．5％，变异系数为6．0％-18．6％。与同类相关德国产试剂盒相比较，阳性符合率为100％。     

克仑特罗CLEIA试剂盒与ELISA试剂盒的检测效果比较

经克仑特罗CLEIA试剂盒与ELISA试剂盒检测效果比较。结果表明,CLEIA试剂盒检测时间为33 min,而ELISA试剂盒则需要50 min,采用CLEIA试剂盒方法检测比ELISA试剂盒方法更加节省时间;CLEIA试剂盒IC50为40 ng/L,对猪尿和猪肉的最低检测限分别为20.1 ng/L和90.7 ng/kg,而ELISA试剂盒IC50则为125.2 ng/L,对猪尿和猪肉的最低检测限分别为23.5 ng/L和99.3 ng/kg,CLEIA试剂盒方法检测灵敏度高于ELISA试剂盒方法。     

“瘦肉精”（克仑特罗）的危害及其检控

克仑特罗(Clenbuterol,以下简称CL)常用于防治哮喘性慢性支气管炎、肺气肿等呼吸系统疾病.当使用5～10倍治疗量时,可重新分配脂肪与肌肉的比例,从而促进动物生长而提高畜牧生产效益.但由于该药在动物体内有残留,人在食用动物组织后发生多次中毒事件,故欧美各国均禁止CL作为生长促进剂使用.美国规定CL只能用于科研.