过山蕨组培快繁技术研究

利用组织培养技术研究过山蕨种苗快繁技术体系,包括孢子囊的消毒方法、孢子萌发培养基、配子体增殖培养基以及幼孢子体诱导基质,结果表明:较好的孢子囊消毒方法是70%酒精+5%次氯酸钠组合,适合过山蕨孢子萌发和配子体生长发育的培养基是MS+2%蔗糖+0.7%琼脂,pH值6.0;适合配子体增殖的培养基为MS+2%蔗糖+0.7%琼脂+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,pH值6.0;适合幼孢子体诱导的基质配比是草炭+细河沙(1∶1)。     

蜈蚣草孢子组织培养与快速繁殖研究

[目的]寻找蜈蚣草孢子组织培养的适宜培养基,提高蜈蚣草的繁殖效率。[方法]以蜈蚣草孢子为外植体进行组织培养,找出合适的萌发培养基、诱导培养基、分化培养基、生根培养基。[结果]蜈蚣草孢子在1/8 MS1、/8 MS+0.2 mg/L 6-BAk、nop 3种萌发培养基中均可长出原叶体,之后接种到1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+20.0 g/L蔗糖诱导培养基中,30 d后形成球状体(GGB),将GGB接种到1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基上进行增殖,将GGB接种到1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖分化培养基上,20~30 d后分化出孢子体,再转入1/2 MS+0.2 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖生根培养基,30 d左右长出细根,缓苗后移栽成活率在90%以上。[结论]该研究为蜈蚣草生理生化特性、遗传和基因转化的研究奠定了基础。     

蝴蝶兰的组织培养技术

探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验证明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好,最适培养基为:MS+6-BA10mg/L+NAA1mg/L水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适增殖培养基为:MA+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适生根长苗培养基:1/2MS+IBA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+0.3%活性炭+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4)。     

蝴蝶兰再生体系优化的研究

探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。试验表明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好,最适培养基为:MS+6-BA10mg/L+NAA1mg/L+CW20%+蔗糖20g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适增殖培养基为:MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+CW20%+蔗糖20g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适生根长苗培养基为:1/2MS+NAA1mg/L+苹果酸30g/L+香蕉泥100g/L+活性炭1g/L+蔗糖15g/L+琼脂7g/L(pH值5.4)。     

柠条组织培养体系的建立

为了建立柠条的组织培养体系,用KF/MS加激素培养法,选择不同的消毒剂,对柠条茎段愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。结果表明,次氯酸钠的消毒效果最好,最适浓度为2%,且浸泡外植体的最佳时间为8 min;诱导芽分化的基本培养基以KF+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L为宜,继代增殖最适培养基配方为KF+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L,适合生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+活性炭0.5 g/L。     

鱼尾星蕨组织培养与快速繁殖的研究

利用鱼尾星蕨的孢子为外植体,研究了不同培养基、不同激素以及浓度对其孢子萌发、原叶体增殖、孢子体诱导和增殖的影响。结果表明,鱼尾星蕨的成熟孢子在1/2MS培养基上萌发速度最快,萌发率最高;鱼尾星蕨的原叶体在1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上增殖速度较快,但增殖过程中不能形成孢子体;在1/2MS+AgNO31.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基上成功诱导出孢子体;孢子体可再进行分株扩增,从而获得大量的孢子无菌苗。     

长寿花组织培养与人工种子的研究

笔者初步研究了长寿花人工种子的制备,包括胚性愈伤组织及胚状体的诱导、人工种子的包埋和萌发。胚性愈伤组织诱导的最适培养基为:MS+2,4 D2mg/L+BA0 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L;胚状体诱导的最适培养基为:MS+BA2mg/L+NAA0 2mg/L+活性炭4g/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L;用无激素MS培养基配制的4%海藻酸钠溶液包埋胚状体,并用2%的CaCl2·2H2O溶液作聚胶化因子,制成人工种子;将人工种子在无激素的MS固体培养基上萌发,萌发率达96%。利用石蜡切片法对胚状体的发生发育过程进行了观察。     

辣木组织培养和快繁技术研究

采用正交实验设计L9(34),以MS培养基,分别加入不同质量浓度的6-BA、NAA、ZT和蔗糖进行辣木丛生芽增殖诱导;采用正交实验设计L9(34),以不同基本培养基,不同质量浓度的IBA、NAA进行辣木组培苗不定根诱导。结果表明,MS+蔗糖30 g/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂7 g/L为辣木诱导丛生芽较佳的启动培养基,丛生芽诱导率可达100%;MS+蔗糖30g/L+ZT 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+琼脂7 g/L,为辣木丛生芽增殖较佳的培养基,增殖系数为6.17;1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L,为辣木丛生芽生根较佳的培养基,不定根诱导率可达100%。     

南高丛蓝莓良种薄雾组培快繁技术研究

以蓝莓良种薄雾的一年生半木质化茎段作外植体,进行组织培养技术研究。结果表明:外植体在1/2 MS+ZT 2.0 mg/L+IAA0.3 mg/L添加蔗糖30 g/L、琼脂7 g/L、pH值4.8的培养基上诱导率达90%;最佳继代培养基为1/2 MS+ZT 0.8 mg/L+NAA 0.05 mg/L添加蔗糖30 g/L、琼脂7 g/L、pH值4.8,芽苗生长健壮;最适生根培养基为1/4 MS+IBA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L添加蔗糖30 g/L,琼脂7 g/L、活性炭3 g/L、pH值4.8。     

国兰“绿蕙红舌”的组织培养技术

采用不同培养基对国兰"绿蕙红舌"的种子进行组织培养试验研究,综合分析不同培养基配方在国兰"绿蕙红舌"组织培养过程中对种子萌发与原球茎诱导、原球茎继代增值、原球茎分化及生根壮苗的影响。结果表明,种子萌发与原球茎诱导最适宜培养基为MS+BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+水解酪蛋白100 mg·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;原球茎继代增值最适培养基为KC+BA0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+活性碳2g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;原球茎分化最适培养基为KC+BA1.0 mg·L-1L+NAA 0.2mg·L-1+活性碳2 g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;生根壮苗最适培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg·L-1+活性碳2 g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1。以上培养基pH均为5.1～5.4。     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。     

文心兰组培快繁技术研究

以文心兰具有休眠芽的花梗节段为外植体进行组培快繁试验,结果表明:选取发育初期的花芽较容易诱导出丛芽,其最佳诱导培养基为MS+6-BA4.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7 g/L(pH5.8);适合的丛芽增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+Ad 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L(pH5.8);较适宜的生根壮苗培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L+IBA0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L+0.2%活性炭(pH5.8)。     

黄瓜离体培养植株再生技术及影响因素分析

以3个不同的黄瓜(Cucumbis sativus L.)品种作为试验材料,研究了不同苗龄外植体和激素组合对黄瓜离体再生的影响.结果表明,黄瓜离体再生最适外植体苗龄为5～6 d,苗龄太小或太大都不利于不定芽的诱导发生;激素在调控诱导不定芽方面起着决定性的作用,诱导不定芽分化的最适培养基为MS+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA,不定芽伸长后在MS+30 g/L,蔗糖+7 g/L琼脂+0.2 mg/L IAA+0.1 mg/L NAA的生根培养基上诱导不定根效果最佳.本试验条件下黄瓜植株再生率为76%.     

白桃成熟胚试管苗培养研究

以白桃成熟胚为试验材料,无菌萌发获取试管苗,并筛选出试管苗培养最合适的增殖及生根培养基。研究结果表明,白桃试管苗培养最适合的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,增殖系数为3.45。生根率最佳诱导培养基为1/4 MS+IBA 0.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根率为82.22%。生根数最佳诱导培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根数为5.96。     

绶草组织培养及再生体系建立的研究

以野生绶草为试验材料,选取其花序轴、幼叶、肉质根为外植体,建立组培及再生体系。研究结果表明:花序轴为绶草组培最佳外植体材料,诱导率达到85%。最适诱导培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+椰汁100 g/L;最适生根培养基为1/2 MS+2.0%蔗糖+0.5%琼脂+IBA 0.4 mg/L+NAA 0.4mg/L+活性炭0.5 g/L。     

虾脊兰原球茎诱导及植株高效再生体系研究

以野生虾脊兰(Calanthe discolor)未成熟蒴果为材料,MS为基本培养基,探讨不同光照度、热激和不同培养基配方对虾脊兰种子萌发、原球茎发生及植株再生的影响。结果表明,未完全成熟的种子在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯+1.0 g/L活性炭培养基中萌芽率最佳;在1 500 lx光照度条件下培养时种子萌发速率较快。通过黑暗条件下35℃热激5 d有利于已萌动种子脱分化形成原球茎。使用MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基诱导原球茎形成胚性愈伤组织效果最好。MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯培养基分化形成植株分化率最高,1/2MS+0.2 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.1 g/L活性炭培养基则为最佳生根培养基,生根率100%,植株根系发达,长势健壮。该研究建立了虾脊兰无菌快繁体系,为保护野生虾脊兰资源和种苗人工繁育提供了有效技术途径,也为其遗传转化研究奠定基础。     

不同激素水平对金线莲组织培养的影响

以金线莲的茎片、带节茎段和不定芽为外植体,研究不同植物生长激素组合和浓度配比对福建金线莲原球茎诱导、丛生芽诱导及幼苗生根壮苗的影响.结果表明:适合原球茎诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+ZT 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L,诱导率达81％;适合丛生芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L,丛生芽诱导增殖效果最佳,90 d时增殖倍数达23倍;适合不定芽生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 4.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L+AC 3 g/L+香蕉汁100g/L.     

金边虎尾兰组织培养的研究

以金边虎尾兰(Sansevieria trifasciata var.laurenttii)肉质叶片作为外植体材料,进行组织培养研究。结果发现,金边虎尾兰叶龄与叶片部位对愈伤组织的诱导有影响,其中采用一年生叶片中部的组织诱导率最高;诱导叶片愈伤组织最适培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导芽分化最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导试管苗生根最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖。     

蒙药苘麻的愈伤组织诱导技术研究

苘麻(Abutilon theophrasti Medic.)是锦葵科一年生草本植物,在医药业和农业方面均有较高的应用价值。实验通过组织培养技术,以苘麻小苗的茎段和叶片为外植体诱导产生愈伤组织,为苘麻的细胞培养和快繁奠定基础。实验结果表明:苘麻种子的最适消毒处理为0.1%升汞8 min;种子萌发培养基为蔗糖30 g/L+琼脂5.7 g/L;由茎段和叶片诱导愈伤组织阶段的最佳培养基为MS培养基+琼脂7g/L+蔗糖30 g/L+NAA 0.8 mg/L+6-BA 3.0 mg/L。     

名贵畲药盘龙参种子快繁技术研究

以盘龙参蒴果为外植体,进行组织培养快繁试验,采用对比试验研究不同基本培养基、激素浓度的配比、天然添加物对盘龙参种子萌发、原球茎增殖、分化的影响,从中筛选出离体条件下适宜种子萌发、种苗快繁的培养基配方。结果表明,外植体最佳消毒方案是采用75%乙醇浸泡30 s结合0.1%Hg Cl2浸泡20 min。最适合的种子萌发诱导培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%;原球茎在1/2MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%的增殖效果最好,增殖率为380%;最适合盘龙参原球茎分化的培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁20%。