东方百合Siberia多倍体诱导及其细胞学鉴定

本文以东方百合Siberia的试管苗为试验材料,研究了预培养时间、秋水仙素处理方法及浓度等因素对诱导试管苗多倍体的影响.研究结果表明:秋水仙素溶液直接浸泡较共培养法好,且以0.05%的浓度和浸泡48 h为最佳组合,最终获得了18株四倍体试管苗.通过根尖染色体计数确定其为稳定的同源四倍体.显微观测气孔特征后发现:二倍体与四倍体植株的叶下表皮气孔密度及气孔保卫细胞长、宽差异均达到了极显著水平.     

剪秋罗种子催芽及秋水仙碱诱导多倍体研究

为了解决剪秋罗种子发芽率不高的问题,以剪秋罗种子为试验材料,比较种子新旧、播种基质以及不同浓度赤霉素(GA3)对剪秋罗种子发芽势和发芽率的影响,并在此基础上利用不同浓度秋水仙碱和不同时间处理剪秋罗萌动种子诱导多倍体。通过形态鉴定、气孔鉴定以及细胞学鉴定变异植株。结果表明：存放1年的剪秋罗种子发芽指标均优于当年新种子,当年种子可能具有初生休眠特性。以150 mg/L的GA3预处理存放1年的剪秋罗种子24 h并播种于培养皿中能获得最高的发芽势(76.33%)和最高的发芽率(85.33%)。经过秋水仙碱处理的种子普遍存活率低,但每个处理浓度下都获得了变异植株,秋水仙碱浓度0.1%为筛选出的最适诱导浓度。变异植株表现出了与对照植株在形态上、气孔分析上和细胞学检测上的差异。经鉴定,初选出1株多倍体。研究为培育剪秋罗多倍体新品种探索出了一条新的育种途径。     

植物激素对石刁柏花药培养中染色体倍性变异的影响

在石刁柏花药培养过程中,2,4-D在引起愈伤组织细胞染色体倍性变异方面起主导作用,高浓度的2,4-D虽然能提高愈伤组织中单倍体细胞的频率,但同时又加剧其多倍化。不同激素配比的分化培养基在诱使再生植株染色体倍性变异方面存在着明显差异。在附加1.0ppmBA和0.2ppmIBA的培养基上,再生植株茎尖单倍体细胞频率最高,达31.17％。比较愈伤组织和再生植株的染色体倍性变异幅度,发现后者明显地大于前者。     

NAA或潮霉素对小麦成熟胚愈伤组织分化的影响

以5个栽培小麦品种诱导而来的成熟胚愈伤组织为外植体,研究了在分化培养基中加入NAA对小麦成熟胚愈伤组织分化的效果以及潮霉素浓度对不同阶段成熟胚愈伤组织分化的影响。研究结果表明,在对照的分化培养基中(含5mg/L激动素)加入0.1mg/L萘乙酸(NAA,1-naphthlcetic acid)形成的分化培养基,可显著提高4个供试小麦基因型的成熟胚愈伤组织的分化率,提高幅度达到12%～32%。不同的潮霉素浓度在"花培1号"愈伤组织的诱导阶段进行抗性筛选的结果表明,即使是在潮霉素浓度达到250mg/L时,仍有24%左右的愈伤组织存活率,这些存活的愈伤组织仍可能分化形成绿点甚至分化成苗,说明在"花培1号"愈伤组织的诱导阶段进行潮霉素抗性筛选是不适合的。5个不同小麦品种分化阶段进行潮霉素筛选具有明显的效果,但不同品种之间存在一定差异,其中:宁麦13的适宜潮霉素浓度为20mg/L,花培1号和扬麦158的适宜潮霉素浓度约为30mg/L,宁麦9和宁麦16的适宜潮霉素浓度在30～40mg/L左右。因此,我们认为,在分化阶段进行潮霉素抗性筛选是理想的筛选时期,在分化培养基中添加20～40mg/L浓度的潮霉素即可完全抑制小麦成熟胚愈伤组织的分化。本研究结果将有助于改进和完善普通小麦成熟胚遗传转化体系。     

紫苏细胞悬浮培养生产迷迭香酸的条件优化

[目的]本研究以紫苏愈伤组织为原材料,对液体悬浮培养生产迷迭香酸的培养条件进行了研究。[方法]通过单因素试验,分别考察培养时间、初始接种量、激素浓度及苯丙氨酸浓度对迷迭香酸含量的影响,并在单因素试验基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面法对最佳培养条件进行优化,建立了二次多项式回归方程的预测模型。[结果][结论]研究结果表明,紫苏细胞液体悬浮培养生产迷迭香酸的最佳培养条件为：6-BA浓度2.34 mg/L、NAA浓度0.96 mg/L、2,4-D浓度0.60 mg/L、苯丙氨酸浓度0.1 g/L,迷迭香酸含量可达23.61 mg/g。     

Polyploidization and early screening of Rhododendron hybrids

Polyploid induction represents a useful tool for breeders of floral crops as larger flowers, longer flowering period and deeper colors can be achieved through chromosome doubling. This study aimed at testing the efficiency of colchicine and oryzalin in inducing polyploidy in three Rhododendroncultivars grown in vitro. The chemicals were used in two concentrations with 24 h and 48 h treatment durations. The survival of the plants was better in colchicine than in oryzalin solutions. The higher concentration of both chemical skilled more plantlets. The treatment duration in oryzalin did not affect the survival, but 48 h in colchicine was more destructive than 24 h. The low survival rate may not be a disadvantage, if the treatment induces desired ploidy. The ploidy levels were screened with flow cytometry. Oryzalin was more efficient than cochicine in inducing polyploidy, the treatment duration and the concentration did not have significant effects as main factors. The biggest proportion of solid tetraploids (18.2% of the survived plants) was obtained from the 24 h treatment in 0.005% oryzalin. Immediately after the treatment the polyploids grew very slowly, whereas most of the unaffected diploids were vigorous from the very beginning. More mixoploids than solid tetraploids were obtained in all treatments. Most of the mixoploids retained their chimerism, one third shifted todiploidy and one single plant to tetraploidy. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

三个大果型番茄花药愈伤组织诱导分析

本研究以3个大果型番茄杂交种F1代('1401','1403','卡莱')的花药为试验材料,对其花药愈伤组织诱导的影响因素进行初步研究.结果表明:大果型番茄花药小孢子发育时期与花蕾长度以及花药长度呈正相关.较适番茄花蕾消毒方法为用70％酒精对番茄花蕾进行表面消毒30 s,然后再用加了0.1％吐温20的15％NaC1O消...     

雪莲组培过程对潮霉素敏感性的研究

以雪莲叶片为外植体,研究了不同浓度的潮霉素对雪莲愈伤组织诱导、生长及分化的影响,结果表明:8.0 mg/L浓度的潮霉素为雪莲叶盘转化筛选的最佳质量浓度,不同浓度(5 ～50 mg/L)潮霉素对MS+ NAA 2.00 mg/L+ 6-BA 1.00mg/L培养基下雪莲愈伤组织的诱导与生长均有明显的抑制作用,随着潮霉素浓度的升高,毒害程度加深,当潮霉素浓度为20 mg/L时表现为生长的愈伤组织块较小、褐化、甚至死亡.同时,低浓度(0.5 ～2.0 mg/L)的潮霉素可以提高雪莲愈伤组织的分化率,其中0.5 mg/L潮霉素的质量浓度的诱导培养基内,雪莲愈伤组织的出芽率平均可达98.33％.     

白魔芋多倍体诱导研究初报

采用种子浸泡法和根状茎顶芽滴液法进行白魔芋多倍体诱导，比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对出苗率和变异率的影响。结果表明，滴液法对材料的毒害性更小，经同一浓度秋水仙素溶液处理后出苗率和植株形态变异率均高于种子浸泡法，但诱变加倍的效果不如浸泡法。实验中获得一株纯合四倍体植株，由0.20%秋水仙素溶液处理种子48h诱变得到。     

Production of Doubled Haploids by Anther Culture and Wheat X Maize Method in a Wheat Breeding Programme

Utilization of the doubled haploid method of breeding usually shortens the time to cultivar release, and methods of haploid production need evaluation in a breeding programme. Thirty-eight different three-way crosses were tested for anther culture response. On average 5.8 percent of the anthers cultured produced calli. Three crosses were found recalcitrant for callus induction. Overall, the anther culture method produced 0.6 plantlet per 100 anthers cultured. Five crosses with an average of 5.8 and 2.8 percent of anthers producing calli and plantlets, respectively, were compared using anther culture and wheat × maize crosses. Non-responsive genotypes for callus induction and plantlet formation in the anther culture method proved to be good parental material in wheat × maize crosses. The average percentages of embryo formation and plantlet production in wheat × maize crosses were 10.3 and 4.7, respectively. Anther-derived plants were cytologically unstable, whereas all the plants regenerated from wheat × maize crosses were haploids (n = 21 chromosomes). The chromosome numbers of the polyhaploids were doubled with a colchicine treatment. Improvement of the two haploid production methods to facilitate their efficient use in a breeding programme is discussed.     

植物激素配比对大蒜茎盘愈伤组织再生体系的影响

植物激素对大蒜茎盘愈伤组织再生的各个环节都发挥着重要的作用。试验结果表明：2,4．D对茎盘愈伤组织的诱导具有主要作用，高浓度的2，4-D有利于大蒜愈伤组织的诱导，但并不利于其增殖分化。MS＋NAA 2mg／L＋BA 1mg／L培养基适宜于愈伤组织的继代增殖，MS＋NAA 1mg／L＋BA 5mg／L培养基适宜不定芽的分化，只添加NAA或无激素的MS培养基有利于不定芽生根。     

秋水仙碱诱导侧柏多倍体的研究初报

为探求诱导侧柏多倍体的最优化条件,此试验以侧柏种子为材料,选取秋水仙碱浓度、温度、处理方式以及光照情况四个影响因素,采用正交试验设计,进行多倍体诱导。试验结果表明,采用直接浸泡法,在秋水仙碱浓度为0.3%、温度为25℃、无光的条件下,经过72h后多倍体的诱导率可达92.7%。此研究结果可为尚未展开的侧柏多倍体育种研究提供良好的技术基础和借鉴     

‘新海16’愈伤组织诱导及白霜的优化

为获得高品质、活力旺盛且具有分化能力的愈伤组织,本研究在已建立的海岛棉(Gossypium barbadense)‘新海16’再生体系基础上,以MSB附加0.1 mg/L 2,4-D及0.1 mg/L KT为基本培养基,采用单因素随机试验研究外植体不同部位、光照及培养基成分等对‘新海16’愈伤组织诱导的影响。结果表明:‘新海16’愈伤诱导的外植体选用下胚轴中上部绿色茎段诱导效果较优;除此之外,愈伤诱导效果最佳的处理为2 000 lx光照强度、90%MSB无机盐成分、3 g/L PVP及1.2~1.4 g/L Gelrite或Phytagel,均能够降低愈伤组织出现白霜现象,对愈伤组织疏松生长有促进作用。本研究通过优化愈伤组织的诱导方法,提高胚性愈伤组织发生率,为‘新海16’高频再生体系提供科学依据。     

大麦原生质体培养再生胚性愈伤组织和白化苗

从来自春大麦品种“如车”成熟胚的愈伤组织中,挑选出适于悬浮培养的松脆型胚性愈伤组织,在短期内建立胚性细胞悬浮系。此系酶解后分离出的原生质体在修改的MS培养基上能够持续分裂形成愈伤组织。将其直接转至分化培养基上获得结构紧密的胚性愈伤组织并再生白化苗.     

不同品系橡胶树花药愈伤诱导和体胚发生研究

为建立橡胶树不同品系的体胚发生和植株再生体系,为不同品系橡胶树良种生产奠定基础。以橡胶树优良品系‘热研106’、‘热试59’、‘热试62’的花药为材料,采用正交设计,对不同品系、不同植物生长调节剂配比培养基的花药愈伤和体胚诱导效果进行了研究。[结果]结果表明：3个品系的愈伤诱导率和体胚诱导效率差异明显,同一品系不同培养基的愈伤诱导率和体胚诱导效率差异明显;愈伤诱导培养基中的植物生长调节剂对下一阶段的体胚诱导有明显影响。根据本研究,‘热研106’的花药愈伤诱导最佳浓度组合为2,4-D 1 mg/L+NAA 2 mg/L+KT 1 mg/L,‘热试59’的花药愈伤组织诱导最佳浓度组合为2,4-D 0.5mg/L+NAA 1 mg/L+KT 1 mg/L,‘热试62’的花药愈伤组织诱导最佳浓度组合为2,4-D 1 mg/L+NAA 1 mg/L+KT 1 mg/L。‘热试62’的体胚发生最佳浓度组合为KT 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。[结论]本研究获得了不同品系的愈伤诱导和体胚发生最佳培养基组合,为多品系橡胶树花药植株再生体系的建立奠定了基础。     

小麦成熟胚的组织培养

【研究目的】为了筛选出小麦(Triticum aestivum L.)成熟胚(MEs)培养和遗传转化受体材料的优良基因型,【方法】以27份优良普通小麦冬性主栽品种或高代育种品系为试材,采用整粒切胚诱愈方法(endosperm-supported method),对小麦成熟胚进行组织培养研究。【结果】结果表明,在成熟胚培养过程中光照、温度、培养基2,4-D浓度、基因型等因素对小麦成熟胚组织培养影响较大;同时小麦成熟胚组织培养存在着较强的基因型依赖性,不同基因型愈伤组织诱导率、分化率、成苗率的差异具有统计学意义（P<0.01）。通过研究从27个小麦基因型中筛选出了3个适合于成熟胚整粒切胚诱愈的基因型,即山农2618、泰山021、河北341,他们的成苗率分别达到了15.38%、25.27%、21.33%。【结论】小麦成熟胚组织培养优良基因型的筛选,为以后小麦的遗传转化和应用基因工程技术进行遗传改良奠定了基础。     

棉花遗传转化和植株再生的研究

利用农杆菌（ＧＵＳ基因（β－葡萄糖苷酸酶基因）为标记基因，ＮＰＴⅡ为选择基因）用共培法对棉花下胚轴切段直接转化，在０．１ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．１ｍｇ／ＬＫＴ的ＭＳ的培养基上共培４８ｈ，转移到加头孢霉素５００ｍｇ／Ｌ和５０～１００ｍｇ／Ｌ卡那霉素的上述培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织，７０～８０天计算愈伤组织的诱导频率，并有组织化学定位法检测ＧＵＳ基因的表达，统计转化频率，结果表明：平均出愈率为４０     

Influence of genotype and culture medium on callus formation and plant regeneration from immature embryos of Triticum turgidum Desf. cultivars

Twelve durum wheat cultivars were evaluated for their response to in vitro tissue culture. Zygotic immature embryos were used to induce callus formation using four different Murashige and Skoog‐based media. Each contained 9.05 μM 2,4‐dichlorophenoxy acetic acid but differed in their carbon source (sucrose or maltose) and the presence of NaCl (0 mM or 40 mM). The influence of both genotype and medium on the type and percentage of callus produced was observed. Calli were either compact and frequently embryogenic, or soft and watery. Percentages ranged from 54 to 100%, depending upon genotype and induction medium. All calli were then plated on a regeneration medium containing 20 g/l sucrose, 2.68 μM 1‐naphthaleneacetic acid and 2.22 μ 6‐benzylaminopurine. The regeneration of plantlets was higher from compact than from soft calli, with a strong dependence on genotype and type of induction medium used. MSm induction medium (30 g/l maltose) and MS40s (30 g/l sucrose plus 40 mM NaCl) were best for inducing compact calli, and gave the highest proportion of regenerated plants. The in vitro response (number of total shoots from a compact callus/number of embryos plated) was higher for immature embryos of ‘Baztan’, ‘Bradano’ and ‘Don Pedro’. These cultivars are a good starting material for experiments involving transformation of calli from zygotic immature embryos.     

几个温敏不育水稻品种组织培养特性的研究

以我国特有的温敏不育系籼稻品种安农S-1,及其转育的不育系安湘S和香125S为实验材料,对愈伤组织的诱导、继代和再生体系的建立进行了研究.结果表明:不同水稻品种和不同的外植体种类愈伤组织的诱导存在比较明显的差别:对成熟种子来说,安农S-1的愈伤组织诱导率最高;而对幼胚而言,香125S的诱导率最高.不同的水稻品种所适用的培养基不同,形成的愈伤组织的状态也存在差别,香125S所适用的培养基种类比较广泛,形成的胚性愈伤组织状态最好,也最容易形成.在愈伤组织的分化阶段,添加3 mg/L 6-BA 1 mg/L NAA分化成苗率最高;随继代时间的延长,愈伤组织的再生率下降,形成的幼苗的状态也存在明显的差别.     

直接诱导不定芽的矮牵牛再生体系的建立

以矮牵牛的叶片作为外植体,研究了不同浓度的激素配比对叶片直接诱导不定芽、诱导愈伤组织分化不定芽及生根的影响。得到了最适的直接诱导不定芽培养基的激素配6-BA1.5mg/L+IBA0.5mg/L、诱导愈伤组织分化不定芽的培养基的激素配比6-BA1.5 mg/L+NAA0.3~0.5 mg/L及生根培养基IBA0.03~0.05 mg/L。并在时间上,从芽的长势、芽的生根情况进行比较,结果表明：直接诱导的不定芽比诱导愈伤组织分化的不定芽所需的时间短、长势好、生根快。