美澳型核果褐腐病菌的检疫鉴定方法

本文根据美澳型核果褐腐病菌的形态学、生物学培养性状和分子生物学等方面的特征,确立了检疫鉴定美澳型核果褐腐病菌的各项技术要求.     

进口智利李子上核果褐腐病菌鉴定

从进口智利李子上分离到一种引起李子果实腐烂的病原真菌,接种李子能引起果实变褐和腐烂。该真菌菌丝在PDA培养基上的生长最适温度为25℃,产孢少,菌落初始为浅灰色,边缘浅裂状,多次传代后逐渐变为浅白色,边缘整齐。分生孢子无色,单孢,柠檬形或卵圆形,大小11．5（9．5～14．7）μm×7．4（5．3～9．2）μm。ITS序列分析结果表明该分离物ITS区序列与GenBank中登录的16株舱laxa序列相似性分别为99．8％～100％,碱基的差异为0～1bp;与21株旭frueticola序列相似性为99．0％～99．2％,碱基的差异为4～5bp;与10株M.fructigena的序列相似性为97．5％～97．7％,碱基的差异为13～14bp。基于ITS序列的系统发育关系分析表明分离物sh675和GenBank中登录的16个M.laxa菌株属于同一个聚类群,相关的Mfructieola和M.fructigena属于另一个聚类群。M.laxa特异性引物ITS1Mix／ITS4Mlx能扩增分离物sh675的菌丝DNA,得到预期的356bp扩增产物。根据该真菌的菌落形态特征、分生孢子形态特征、ITS序列和PCR检测结果,将其鉴定为核果褐腐病菌（Monilinia laxa）。     

桃褐腐病菌抗药性分子机理研究进展

桃褐腐病是严重危害桃生产的重要病害之一。在实际生产中,该病害的控制主要以化学防治为主。由于杀菌剂的大量使用,桃褐腐病菌已对几类常用的杀菌剂产生了不同程度的抗药性。本文就桃褐腐病菌(Moniliniaspp.)对生产上使用的几大类杀菌剂的抗药性情况及抗药性分子机制研究进展进行简单概述和分析,以供国内同行借鉴与参考。     

欧李褐腐病病原菌鉴定

欧李[ Cerasus humilis( Bge.) Sok.]为蔷薇科樱桃属果树,别名钙果,原产中国,分布于我国的黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、山东、山西等省区.多生长在向阳山坡或沙丘边缘,资源相当丰富.欧李株高0.3～1.5m,多为0.5～0.7m左右,是目前世界上最矮小的木本果树.果实可鲜食或加工,含糖、蛋白质、维生素C,特别是矿质元素铁和钙的含量很高,每100果肉干分别含有58和360 mg种仁可作药用,中药称之为"郁李仁"可消毒化肿.     

大白菜对褐腐病抗性的快速鉴定方法研究

为了建立一套大白菜对褐腐病抗性的快速鉴定方法,本研究对菌丝、菌核作为接种物进行了比较,并分析了菌丝浓度、接种苗龄、接种温度以及接种后空气湿度对褐腐病发病的影响。结果表明：菌饼回接土壤表面为最佳接种方法,菌丝浓度对致病力无影响;最佳接种苗龄为1~2叶期,最佳接种温度25?℃,最佳接种湿度90%~100%;病情指数调查均在接种后第7天。     

MALDI-TOF-MS鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌的方法研究

利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对3株水稻细菌性叶鞘褐腐病菌（Pseudomonas fuscovaginae）标准菌株进行蛋白质指纹图谱分析,将不同培养基、不同培养时间和不同样品处理方法等条件下所收集到的质谱峰进行比较,筛选出最佳实验方法,收集20张参考图谱与水稻常见病原细菌质谱峰进行比较,建立该病菌的蛋白质指纹图谱。结果显示用金氏 B 培养基分离纯化后经提取处理法进行 MALDI-TOF-MS 分析为最佳的实验方法。该方法对检测与鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌具有较高的灵敏度和重复性,且分析过程简单快速,有一定的应用价值。     

从进境美国樱桃中首次截获美澳型核果褐腐病菌

Monilinia fructicola是我国禁止进境的检疫性真菌有害生物。广州白云机场口岸从美国输华樱桃中截获可疑病果,病果表面有微小的圆形褐色病斑。保湿培养4d后,病斑迅速扩展至全果,并簇生绒状灰白至灰黄色菌落,导致果实腐烂。经对分离物进行形态学观察和ITS序列分析,将病菌鉴定为美澳型核果褐腐病菌(Monilinia fructicola(Winter)Honey),从进境美国樱桃大宗货物中截获该病菌在我国尚属首次。     

鸡冠花褐腐病病原鉴定

昆明‘99世界园艺博览会荷兰园，凤尾鸡冠花Celosia critata L.叶片，出现褐腐病。经鉴定，病原为柯氏柱枝双孢霉原湾种Cylindrocladium colhounii Peerally colhounii，为国内新记录病害。本文对病害症状、病原形态进行描述，附形态图。标本收藏于云南农业大学真菌标本室（MHYAU）。     

小麦细菌性叶鞘褐腐病及其病原鉴定

为搞清杭州小麦上一新发生病害的病原，从病区获得6份小麦病株样本的症状，经初步的植物细菌学特性分析，鉴定为细菌病害。6个分离细菌经32项生理生化反应、茵落形态、致病性、Biolog、脂肪酸分析及与6个标准菌株比较，证实了这种小麦叶鞘褐腐病是由Pseudomonasfuscovaginae．,Miyajima，Tanii＆Akita引起，与水稻细菌性叶鞘褐腐病为同一病原。     

进境新西兰猕猴桃中猕猴桃果腐病菌的检测与鉴定

对来自新西兰的猕猴桃进行了病原菌的分离培养,结果在果实中分离到2株疑似猕猴桃果腐病菌的菌株Na-3419和Na-4756。对其进行了病原菌形态学观察、致病性测定并结合分子生物学方法检测,实验结果表明,菌株Na-3419和Na-4756在PDA培养基上生长良好,能产生大量的分生孢子;经真菌通用引物(ITS4/ITS5)扩增和测序,菌株Na-3419与Gen Bank中登录号EU482221.1和EU482220.1的菌株序列同源性达到100%,菌株Na-4756与Gen Bank中登录号AY359230.1、AY359226.1和KR859079.1的菌株序列同源性达到100%;病菌接种猕猴桃3 d后开始发病。根据上述试验结果,将分离获得的菌株Na-3419和Na-4756鉴定为猕猴桃果腐病菌(Neofabraea actinidiae)。这是上海口岸首次在进境的猕猴桃果实上截获该有害生物。     

新疆设施蔬菜根结线虫病发生调查及病原鉴定

对新疆蔬菜根结线虫病的发生情况进行了调查,发现蔬菜根结线虫在和田、阿克苏、库尔勒、吐鲁番、伊犁等南北疆设施蔬菜上均有分布和发生危害,露地蔬菜尚未见发生。从各发生地温室中采集14份蔬菜根结线虫样本,寄主主要是番茄,另外还有豇豆、黄瓜、生菜、香芹、苦瓜。采用形态学以及根结线虫特异性引物PCR相结合的方法进行鉴定,结果表明新疆设施蔬菜上有南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和北方根结线虫(M.hapla)两种,优势种群为南方根结线虫。     

美澳型核果褐腐病菌对甲基硫菌灵和啶酰菌胺的敏感性

采用传统检测方法测定了我国北方地区美澳型核果褐腐病菌对常用杀菌剂甲基硫菌灵和新药剂啶酰菌胺的敏感性,并采用12条ISSR引物对不同抗性水平的菌株进行了分析.结果显示:74株菌株中检测出5株对甲基硫菌灵表现高抗、2株表现低抗的菌株;我国抗性菌株的突变位点与美国加州抗性菌株的突变位点相同;啶酰菌胺对来自我国和美国、新西兰、法国的45株美澳型核果褐腐病菌的EC50分布频率呈单峰曲线,EC50在0.059～0.320 μg/mL之间,平均值为0.174±0.064μg/mL;基于ISSR分析得到的UPGMA聚类组与菌株的来源地及对甲基硫菌灵的抗性无相关性.     

Characterization of the cytochrome b (cyt b) gene from Monilinia species causing brown rot of stone and pome fruit and its significance in the development of QoI resistance

BACKGROUND: Quinone outside inhibitor (QoI) resistance as a consequence of point mutations in the cytochrome b (cyt b) gene has been reported in numerous plant pathogenic fungi. To examine the potential for QoI resistance development in those Monilinia species causing brown rot of stone and pome fruits [Monilinia fructicola (G Winter) Honey, M. laxa (Aderhold & Ruhland) Honey and M. fructigena (Aderhold & Ruhland) Honey], an examination was made of the sequence and exon/intron structure of their cyt b genes for the presence of any point mutations and/or introns commonly associated with resistance to QoIs in fungal plant pathogens. RESULTS: None of the point mutations typically linked to QoI resistance was present in any of the Monilinia isolates examined. Furthermore, the cyt b genes from M. fructicola and M. laxa, but not M. fructigena, possessed a group‐I‐like intron directly after codon 143. Based on the results obtained, a simple PCR assay using a single primer pair was developed, allowing discrimination between the three Monilinia species without the need for culturing. CONCLUSIONS: Results suggest that resistance to QoI fungicides based on the G143A mutation is not likely to occur in M. fructicola or M. laxa. Conversely, M. fructigena may be at higher risk for developing QoI resistance owing to the absence of a G143‐associated intron. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry     

玉米茎腐病病原菌检测方法研究

为提高玉米茎腐病病原菌检测结果的准确性和可信度,以组织分离法做对比,采用分子检测法,对采自田间的189个玉米茎腐病病株进行真菌种类的鉴定和数量的统计。结果表明,分子检测法对腐霉Pythiumspp.的检出频率为29.24%,对镰孢菌Fusariumspp.的检出频率为73.68%,组织分离法对腐霉的检出频率仅为0.58%,对镰孢菌的检出频率为60.82%,两方法的符合率最高仅为35.92%,最低为0。因此,采用组织分离和分子检测相结合的方法可提高玉米茎腐病病原菌鉴定结果的准确性。     

三种赤眼蜂对灰白蚕蛾的卵龄选择

灰白蚕蛾Ocinara varia.是近年来华南地区为害较严重的园林害虫,为筛选有效防治灰白蚕蛾的赤眼蜂种,在室内条件下比较了短管赤眼蜂Trichogramma pretiosum、松毛虫赤眼蜂T.dendroli-mi和暗黑赤眼蜂T.euproctidis对不同卵龄灰白蚕蛾卵的寄生能力和适应能力.结果显示,随寄主卵龄的增加松毛虫赤眼蜂和暗黑赤眼蜂寄生卵数均呈下降趋势,且都在灰白蚕蛾卵龄为6h的卵上寄生卵数最多,分别为15.90粒/雌和12.20粒/雌;而短管赤眼蜂的寄生卵数随寄主卵龄的增加呈先上升后下降趋势,在卵龄为24 h时达最高,为8.25粒/雌;在各卵龄段,松毛虫赤眼蜂的寄生卵数均比其它2种蜂多;当寄主卵龄超过72 h时,3种赤眼蜂的寄生卵数均显著下降.3种赤眼蜂在寄生卵龄为6h的寄生卵上羽化率最高,当卵龄超过72 h时,其羽化率均显著下降.松毛虫赤眼蜂和暗黑赤眼蜂对6h卵龄的灰白蚕蛾卵致死能力最强,而短管赤眼蜂对24 h卵龄的灰白蚕蛾卵致死能力最强.综合分析表明,松毛虫赤眼蜂在灰白蚕蛾卵上的寄生能力和适应能力最好,是灰白蚕蛾的有效天敌.     

广东省番石榴褐斑病的病原分离及鉴定

番石榴(Psidium guajava Linn.)起源于墨西哥,是热带和南亚热带地区普遍种植的水果[1].番石榴也是我国华南地区畅销的水果之一,2018年广东省的番石榴种植面积达1.25万hm2.2018年7月,在广州水果世界岭南鲜果基地调查发现,部分番石榴枝条出现不连续的褐色斑块,叶片和花器的花瓣呈现从边缘向中间扩...     

油菜菌核病抗性鉴定方法的比较及抗源的筛选

采用已报道的七种油菜菌核病抗性鉴定方法,在同一条件下对两个感病和两个抗病品种进行鉴定比较。结果表明:草酸浸根(叶)法用于白菜型油菜鉴定效果不好;不同生育期的油菜对菌核病抗性有差异,应该以花期鉴定为主,苗期鉴定为辅;在花期以麦粒叶腋接种、琼脂块叶腋接种和牙签茎杆接种,接种后发病程度依次为牙签>麦粒>琼脂块;三种花期接种方法与大田接种鉴定的结果呈显著正相关(r>0.8000),这三种方法均能有效反映抗、感品种的差异,其中花期牙签茎杆接种法与大田接种鉴定法相关性达极显著水平(r=0.9140)。根据抗性鉴定方法比较的结果,选用花期牙签茎杆接种法,以中油821为对照,对四川农业大学油菜研究中心G1自交系的44份油菜育种材料进行鉴定、筛选,得到12份高抗材料,其中有5份材料的抗性极显著高于对照。     

湖南省蔬菜根结线虫发生及种类鉴定

对湖南省蔬菜主产区的根结线虫病发生与危害程度进行了系统调查,结果显示蔬菜根结线虫病发生普遍,大棚蔬菜发病率高达80%,露地蔬菜发病率也在10%左右。对采自湖南省内10种蔬菜作物上的23个根结线虫种群进行了种类鉴定。采用2龄幼虫测量值、会阴花纹形态特征、PCR法及序列测定相结合的方法进行了鉴定,结果表明南方根结线虫是湖南省蔬菜根结线虫病的优势病原种群,占87%。     

植物线虫分子鉴定研究进展

植物线虫可危害农作物和林木,对它们的准确鉴定是防治植物线虫病害的基础。由于植物线虫很小,而且在形态上种间常有覆盖,而种内有较大的变异,仅依据形态特征很难鉴定。分子鉴定技术给植物线虫的检测和鉴定提供了快速、精确、可靠的方法。文章综述了植物线虫分子的DNA提取、分子鉴定靶标序列的选择及分子鉴定方法等方面的研究进展及现状,以促进对植物线虫分子鉴定更深入的研究。     

检疫性实蝇快速鉴定方法研究进展

为适应口岸检疫的需要,检疫性实蝇的快速鉴定方法不断发展。本文全面综述了检疫性实蝇电泳、限制性片段长度多态性、随机扩增多态性DNA和核酸序列分析等鉴定方法的进展,并对各种鉴定方法进行了对比,强调了准确选择分子标记的重要性,旨在为建立有效的检疫性实蝇快速鉴定方法提供基本思路。