大百合与百合属优良品种杂交试验

[目的]通过优良品种杂交试验,旨在获取大百合(Cardiocrinum giganteum)与百合属(Lilium)其他品种杂交种子,从而选育出大小适宜、适应性强、与大百合交配亲和力较强的杂交花卉新植株.[方法]进行花粉培养液对比试验,检测花粉生活力;以野生的大百合为母本,与百合属的多个优良品种杂交,筛选与大百合交配亲和力较强的百合属亲本.[结果]最能促进百合花粉萌发的培养液为5%蔗糖+0.01%硼酸的混合液;切花插水保养和低温环境有利于百合花粉的保存.[结论]大百合与百合属间杂交成功是可行的;‘贵族’(Lilium spp.‘Noblesse’)和‘西伯利亚’(Liliumspp.‘Siberia’)两个百合属品种与大百合交配亲和力较强,均可形成较饱满的杂交种子.     

百合品种间杂交亲和性研究

采用常规授粉方法,进行百合杂种系内和系间杂交以及品种自交研究。结果表明:LA杂种系品种自交不亲和,OO杂种系和AA杂种系的布鲁内罗自交获得了少量有胚种子。不同杂种系百合品种间杂交,仅OO杂种系的西伯利亚×元帅的组合结实率为30%,有胚率为21%,其他未获得杂交种子。LA杂种系的邦索尔×AA杂种系的布鲁内罗组合结实率为10%,有胚率为0.8%,OO杂种系的西伯利亚×AA杂种系的布鲁内罗组合结实率为20%,有胚率为15%,亲和性好。杂种系间其他22个杂交组合未获得有胚种子。     

不同百合品种杂交亲和性试验

以O百合(东方百合)和OT百合(东方百合与喇叭型百合杂交后代)为材料进行杂交试验,分别统计授粉后的子房膨大率与胚培养的萌发率,判断杂交组合的亲和情况。结果表明,O百合内部杂交亲和性好,杂交易得到后代;O百合与OT百合的罗宾娜杂交亲和性较好,子房膨大率为100%,胚培养萌发率为3.3%;O百合难以与OT百合的黄精灵得到杂交后代。     

百合杂交离体授粉研究

以麝香百合系的新铁炮(L型)和亚洲百合系的凤眼(A型)为试验材料,在离体条件下采用切割子房和花柱的方式结合培养液处理子房和花柱切面的方法,以提高杂交的成功率.结果表明,培养液在新铁炮×凤眼和凤眼×新铁炮杂交中表现为促进子房膨大和蒴果形成.且新铁炮×凤眼杂交较凤眼×新铁炮杂交效果好.杂交后获得的种子培养,用甘露醇和山梨醇代替部分蔗糖并加入1.0 mg/mL 6-BA和0.1 mg/mL NAA的培养基,种子成活率较高,为70%~90%.     

切花百合杂交亲和性研究

采用常规授粉方法对亚洲百合系,麝香百合系及OT杂种系共15个栽培品种进行自交、系内及系间杂交,共计26个组合780朵花,针对选定组合的蒴果维系时间、结实率、蒴果的长/宽,有胚数和有胚率5个指标对杂交亲和性进行评价。结果表明:所选15个品种自交均不亲和;亚洲百合系内杂交结实率高但有胚率较低;OT杂种系内各杂交组合的结实率均为0;系间杂交的各组合中,麝香百合系品种‘white heaven’更适合作母本。同一品种为母本的杂交组合蒴果的长/宽与种子的有胚率成反比,因此蒴果的长/宽可作为判断杂交亲和性的外观指标。杂交种子的有胚数和有胚率作为亲和性指标更为可靠,证明其已经克服了远缘杂交的不亲和性,能得到有胚的种子。     

百合品种间杂交亲和性的比较

采用常规授粉方法,进行杂种系内和系间杂交以及品种自交的研究。结果表明,亚洲百合(A)及东方百合(O)同一杂种系内品种间杂交几乎全部亲和;其中亚洲百合品种间杂交中11个组合都获得有胚种子,各组合有胚种子为2.2%～11.5%;东方百合的7个组合中6个获得有胚种子,各组合有胚种子为5.4%～18.8%;而LA×LA的5个组合中,仅有两个组合获得未成熟的果实。在不同杂种系间杂交时,东方百合与亚洲百合间的杂交未获得有胚种子。当以OT及LA杂种系的品种为母本时,分别与东方百合、喇叭百合及亚洲百合杂交,母本亲和性较高;其中OT×O的组合中,大多获得有胚种子,有胚率2.9%～9.3%;OT×岷江百合(喇叭百合)的7个组合可得到有胚种子,有胚种子率4.8%～12.4%;LA×A的组合中,几乎都可以获得有胚种子,有胚率为0.31%～3.76%,而A×LA的10个组合均未得到有胚种子。大部分品种自交不能结实,仅亚洲百合Black out获得少数有胚种子。     

克服百合自交及杂交障碍方法的初步研究

以亚洲百合普瑞头（Lilium asitic hybrids CV．Prato）和麝香百合雪皇后（Lilium longiflorum CV．SnowQueen）为材料，研究了23种授粉方法和4种胚挽救方法对百合自交及杂交障碍的影响。结果表明，蕾期多次授粉和延迟多次授粉对克服百合自交的受精前障碍效果较好；切割花柱授粉（应多次授粉）和离体授粉对克服百合杂交的受精前障碍具有～定效果；胚珠培养和胚培养对克服百合受精后障碍较为有效；外源激素可诱导子房的膨大。     

胚拯救技术及百合的胚培养研究进展

百合育种中由于胚败育致使杂交后代不能正常生长发育,胚培养技术解决了杂交幼胚生长发育的关键问题,在育种实践中发挥了巨大作用.综述了目前在百合胚培养研究中已获得的技术成就,这些技术不但对百合胚培养研究具有指导意义,同时也为今后百合的育种工作产生巨大作用.     

11种野生百合杂交亲和性的初步研究

为使我国野生百合资源用于新品种培育中,对收集的部分野生百合进行了自交、种间杂交及与栽培品种的杂交,较为系统地评价了野生百合资源的亲和性。结果表明:1）野生百合自交亲和性普遍较好,细叶百合、宜昌百合、岷江百合自交子房膨大率分别达到了100％、66.7％和11.1％。2）以卷丹、泸定百合、岷江百合、兰州百合和青岛百合为母本时,各杂交组合的子房平均膨大率分别达到了53.1％、50.0％、50.0％、45.2％和20.0％,表现出了较高的亲和性;以岷江百合、泸定百合和川百合为父本时,杂交组合的子房平均膨大率分别达到了50.0％、35.0％和10.0％,可作为杂交育种的亲本材料。3）百合组的野生种与新铁炮百合和东方百合杂种系的品种有较高的亲和性;卷瓣组的野生种与亚洲百合和新铁炮百合有较高的亲和性。4）子房切片培养和胚珠培养的成功率、杂种苗的获得率及有胚率与前期子房的膨大率及子房膨大维持天数有一定的相关性,说明子房膨大率可作为评价百合杂交亲和性的指标之一。      

百合杂种胚的离体培养

以剥除胚乳的两个百合杂交组合的杂种胚，进行离体培养，５ｄ后即开始萌发，１５ｄ后，萌发率达８８％。在不同激素含量的培养基比较试验中，发现以ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ激素浓度培养基培养效果最好，其中，７５％的种胚长成完整植株，１２．５％的种胚长出幼芽，培养过程中，无根的幼苗生长至３ｃｍ左右，约５张叶片时，转移至ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上，２￣３周后，有８０％的幼苗长出根。     

文心兰杂种胚培养研究

以文心兰‘红狐狸’与‘百万金币’杂种胚为外植体,采用种胚→原球茎→完整植株→移栽的途径,探讨植物生长调节剂、有机添加物等因素对文心兰杂种胚萌发、原球茎分化、生根等各阶段的影响,建立文心兰杂种胚离体培养及植株再生技术。结果表明,适宜萌发的培养基为花宝+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CM 150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),培养90~100d后相对萌发率为155.6%,原球茎基本不增殖,利于叶的分化;适宜分化的培养基为花宝+6-BA 0.1mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1),分化率显著最高,为87.8%,添加马铃薯泥能显著提高分化率,促进芽苗的粗壮;将分化的芽苗在花宝+NAA 0.2mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.5g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1)培养基上培养40d后生根率为100%,且根系发达,植株健壮;生根苗炼苗后以水苔作为基质,移栽成活率达91.7%。     

索蚌百合鳞片的组织培养

以百合品种索蚌(Sorbonne)鳞片为外植体,比较各种消毒时间和接种方法的效果,研究不同激素质量 浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎培养及生根的影响.结果表明,索蚌鳞片最适合的消毒时间是70%酒精30s、0.1%升 汞15 min,成活率可达60.0%,百合鳞片不同部位的分化能力从大到小依次为下部、中部、上部,外层、中...     

OT型百合品种黄天霸花器官组培快繁体系的建立

[目的]研究OT型百合品种黄天霸花器官的离体培养快速繁殖技术,为其种球产业化生产提供技术支持.[方法]以黄天霸花蕾和半开花的不同部位为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同外植体的愈伤组织诱导效果、0～3.0 mg/L6-BA对外植体愈伤组织分化、1.0～3.0 mg/L 6-BA＋0～0.2 mg/L NAA组合对叶片不定芽诱导、30.0～80.0 mg/L蔗糖对鳞茎形成及生根的影响,调查不同基质对组培苗移栽种植的效果.[结果]花蕾和半开花不同部位愈伤组织诱导从易到难表现为：子房＞柱头＞花药＞花托＞花丝、花瓣,子房和柱头的愈伤组织诱导率均超过50.0％.在MS培养基中,随着6-BA用量的增加（0～3.0 mg/L）,外植体愈伤组织分化率先提高后稍有下降,适宜分化培养基为MS＋ 2.5 mg/L 6-BA.在不同6-BA和NAA组合中,以培养基MS＋3.0 mg/L 6-BA的无菌叶片不定芽诱导效果较优.添加60.0 g/L蔗糖的MS培养基利于不定芽结鳞茎生根;带鳞茎组培苗移栽于大田菜园土即可成活.[结论]成功建立的OT型百合品种黄天霸花器官离体快速繁殖体系可用于其种球工厂化生产,扩大规模化种植.     

不同温湿度和基质对东方百合鳞片子球快繁的影响

通过分析不同温湿度和基质对东方百合不同品种不同部位鳞片催芽、不同播种期对不同品种的小球培育的影响,确定了鳞片扦插法快繁子球的方法和技术.通过研究认为,鳞片外层在25℃和RH 80%的条件下,在草质泥炭∶珍珠岩＝2∶1的基质中催芽效果最好,品种间差别不大.3月上旬或9月上旬苗床播种鳞芽,可培育成周径达6～8 cm的小鳞茎,秋季更有利于小球生长,但品种间有差别.     

椰乳和香蕉泥对东方百合杂交幼胚离体培养的影响

探讨椰乳和香蕉泥、胚龄以及杂交组合对百合幼胚离体培养的影响.以东方百合的6个杂交组合、3个胚龄的幼胚为试材进行离体培养试验.试验结果表明:胚龄60～65d的幼胚离体培养成活率最高,其次为80～85d的幼胚,再次为70～75d的幼胚.不同杂交组合的幼胚离体培养的平均成活率从高到低依次为:罗蒂娜×马可波罗,罗蒂娜×法兰西,罗蒂娜×索蚌,提拔×法兰西,提拔×康斯坦萨,提拔×马可波罗.在60～65d胚龄时,在培养基中加入50mg· L-1椰乳使幼胚的成活率提高8％,加入100mg· L-1椰乳可使成活率提高5％,但加入香蕉泥使成活率大幅降低;在70～75d胚龄时,加入香蕉泥效果稍好;在80～85d胚龄时,加入椰乳和香蕉泥的培养基效果都较差.不同胚龄的幼胚离体培养成活率存在极显著差异,刚刚固体化的幼胚成活率最高.杂交组合不同幼胚离体培养成活率不同.培养基中添加适量椰乳能提高刚刚固化的幼胚的成活率,添加适量的香蕉泥能提高固化程度稍高的幼胚的成活率,对发育到胚乳完全硬化程度的百合胚,加入椰乳和香蕉泥均有不利影响.     

油菜与芸芥属间杂种离体子房和胚培养研究

为建立芸薹属与芸芥属间杂种离体子房和胚培养的技术体系,运用4个亲和性较强的组合进行离体子房和胚培养,结果表明：在子房培养中,以授粉后6～8d处理的子房生长量最大,成胚数和成苗数最多．所有不同浓度和组合的激素,包括无激素培养基处理均获得了湘油15号与芸芥的杂种胚,以1．0m/LNAA 0．5mg/L 6-BA组合效果最好,在胚培养中,生长素和细胞分裂素对离体胚的发育有明显的促进作用,而附加成分(干酪素)单独使用时效果不明显,与生长素一起使用效果较好．子房培养和胚培养均能获得一定数量的苗,但通过苗期真假杂种的鉴定,24株真杂种均由子房培养所获得．     

东方型百合切花抑制栽培技术研究

本文研究了东方型百合切花抑制栽培技术、制定出适合北京地区反季节生产东方型百合切花的具体栽培方案 ,同时 ,研究多效唑 (PP333)对控制东方型百合生长的效应 .结果表明 :多效唑对东方型百合生长速度影响显著 ,对茎的粗生长、成花数的影响不显著     

东方百合明星无性快繁体系的建立

【目的】以东方百合品种明星无菌叶为材料建立快繁体系,为其种球产业化生产提供技术支撑。【方法】以花器官培养获得的无菌小鳞片及叶片为材料,以添加不同浓度6-BA、2,4-D的MS培养基诱导不定芽及小鳞茎产生;以不同浓度的蔗糖诱导小鳞茎的膨大及根的产生;以珍珠岩、草炭、蛭石的混合基质作为小鳞茎移栽基质。【结果】用6-BA诱导无菌小鳞片产生不定芽时以1.5 mg/L为宜,诱导率为75.0%;用2,4-D诱导无菌叶片产生小鳞茎时以2.0 mg/L为宜,诱导率为91.7%;添加70.0 g/L蔗糖的MS培养基适宜小鳞茎膨大及根的产生;带小鳞茎及根的组培苗在珍珠岩∶草炭∶蛭石=1∶1∶1的基质中移栽成活率最高,达100.0%。【结论】东方百合品种明星可利用无菌叶片建立无性快繁体系。     

Study on Transformation of Oriental Hybrid Lily by Agrobacterium-mediated

An efficient procedure was described for the transformation of the monocotyledonous oriental hybrid lily, Lilium cv. Siberia. by Agrobacterium-mediated genetic transformation via leaves regeneration, The leaves of leaflets which derived from bulbs were sliced into 1.0 cm long and were co-cultivated with A. tumefaciens strain LBA4404/pB2AE12, which harbored a vector carrying the neomycin phosphotransferase, DREB2A genes in the T-DNA region. The suitable genetic transformation condition was determined as follows： the bacterial concentration reached 0.5-0.6 （OD600）, 15 min infection time, 20 mg.L^-1 acetosyingone, and 10.6 mmol.L^-1 NH4NO3 medium was used for co-cultivation 3 days, delayed 7 days for selecting by 30 mg.L^-1 kanamycin containing regeneration medium. Efficient shoot regeneration was observed on MS medium supplemented with 1.0 mg.L^-1 naphthaleneacetic acid, 0.5 mg.L^-1 benzyladenine and 0.1 mg.L^-1 Kinetin after about 6 weeks culture. The presence ofDREB2A gene in the genomic DNA of regenerated plants was detected by means of PCR analysis.     

百合试管鳞茎诱导及膨大技术的研究

以东方百合"Sorbonne"试管苗为材料,研究了蔗糖浓度、大量元素、培养基状态、多效唑和水杨酸浓度对百合试管鳞茎诱导及膨大的影响。结果表明,蔗糖浓度为60 g.L-1时新增鳞茎数最多,鳞茎形成率达75%,蔗糖浓度120g.L-1处理最有利于鳞茎膨大;高浓度的大量元素有利于鳞茎的膨大,而不利于鳞茎的诱导,3MS时形成的鳞茎最大,但鳞茎形成率则下降到14.6%;液体培养基对鳞茎鲜重影响显著;多效唑浓度10mg.L-1处理能促进鳞茎的诱导和膨大;水杨酸处理则能显著提高试管鳞茎的数量。