高效液相色谱法测定食品中5种非法添加物

本文建立了高效液相色谱法测定食品中罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因等5种非法添加物的检测方法,色谱柱ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm 5-Micron),流动相为0.1%甲酸的10 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈(10:90),流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量10μL,柱温30℃,进行定量分析。结果表明,在浓度为0.01～10.00μg/mL范围内,标准曲线线性关系良好(相关系数R2>0.999 0),罂粟碱、那可丁、吗啡、可待因和蒂巴因的检出限分别是0.05、0.03、0.10、0.10、0.05μg/mL。5种生物碱加标水平在1.2、1.5 mg/kg时,回收率为88%～93%,相对偏差为1.4%～3.2%。该方法方便快捷、成本较低、操作简便、分析快速,可用于食品中5种非法添加物的检测。     

RP-HPLC法测定鸡血浆中头孢拉定浓度

鸡血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,过DikmacC18柱(100mm×4.6mm,5μm),柱温:室温;流动相:甲醇-0.02mol/L乙酸胺缓冲液(28∶72),pH4.9;流速:1.0mL/min;检测波长:254nm;检测器:紫外检测器;进样量:10μL。结果表明,检测线性范围为0.5～32.0μg/mL(r=0.9999);最低检测浓度为0.25μg/mL;回收率分别为92.5%、96.4%、98.9%;日内和日间变异系数均小于5%。该方法操作简便、灵敏、重现性好,适用于头孢拉定的临床药代动力学研究。     

HPLC法检测蝉拟青霉中N6-(2-羟乙基)-腺苷含量

为了建立蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)5704s中N6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA)含量测定方法,以去离子水为溶剂,采用超声辅助水浴法提取HEA,基于HPLC法测定其含量。经优化确定色谱条件为Agilent ZORBAX Extend-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸),梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果显示,HEA浓度为0.25～100.00μg/mL时,峰面积和HEA含量之间线性关系良好,R²=0.999 9,仪器的检出限为0.25μg/mL,平均回收率为97.73%～108.95%,RSD为0.37%～1.29%,测得样品中HEA含量为0.78 mg/g。该方法简便、快捷、准确、稳定,适用于蝉拟青霉5704s菌丝体中HEA的测定。     

高效液相色谱法测定噻虫嗪和功夫菊酯有效成分含量的研究

[目的]建立高效液相色谱法测定农药复配杀虫剂噻虫嗪和功夫菊酯有效成分含量.[方法]测定噻虫嗪采用Agilent ZORBAX Extend-C18色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸(30:70,V/V)为流动相,流速0.8～1.5 mL/min,检测波长230 nm,柱温25℃,进样量为5μL,外标法定量;测定功夫菊酯采用Agilent RX-SIL色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以正己烷-四氢呋喃(990:10,V/V)为流动相,流速0.8～1.5 mL/min,检测波长278 nm,柱温25℃,进样量10μL,外标法定量.[结果]样品精密度良好,48 h内稳定,样品中噻虫嗪质量浓度均大于141 g/L,功夫菊酯质量浓度均大于106 g/L,检测结果与生产车间按配方投料的结果一致.[结论]所建立的方法简便、快速、准确,可用于复配杀虫剂农药噻虫嗪和功夫菊酯有效成分的测定.     

金线草药材薄层鉴别及含量测定

采用薄层色谱法（TLC）,以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸（10∶3∶1.5）为展开剂,展开,晾干,喷3%三氯化铝-乙醇溶液,晾干,置紫外灯（360 nm）下检视。采用高效液相色谱法,以色谱柱Eclipse XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,10μL进样,乙腈-0.1%的磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长360 nm,建立金线草（Antenoron filiforme）药材薄层鉴别方法以及含量测定。结果表明,对金线草药材进行薄层鉴别,斑点清洗,分离度好,能有效鉴别出金线草。同时,在30 min内完成对3种黄酮成分的分析,各成分间均达到基线分离,芦丁、槲皮素、山奈酚的线性范围分别为2.12～100.80μg/mL(r=0.999 4)、25.50～758.86μg/mL(r=0.999 8)、2.62～250.48μg/mL(r=0.999 5),平均加样回收率（n=6）分别为98.42%、101.21%、97.92%。     

反相高效液相色谱法测定小鼠血浆中德氮吡格

采用固相萃取反相高效液相色谱法测定小鼠血浆中的德氮吡格.血浆样品经过C18固相萃取小柱净化后,在Liclnrospher C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)上,以甲醇-0.1%三乙胺水溶液(pH 6.5,体积比90:10)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长260 nm对德氮吡格进行测定.实验结果表明,德氮吡格的血药浓度在1～20μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.995),平均回收率为101.36%,高中低三浓度的日内精密度均小于4%,日间精密度均小于8%,最低检测限为0.4 μg/mL,该方法简便、快速、准确度高、可靠性好.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛肉中3类31种药物残留检测方法的建立

采用超高效液相色谱-串联质谱方法(UPLC-MS/MS)同时测定牛肉中3种四环素类药物、11种喹诺酮类药物和17种磺胺类药物的残留。采用Mcllvaine-Na_2EDTA缓冲液和磷酸盐缓冲液作为提取液,经HLB固相萃取柱净化,氮气吹干,复溶后,供UPLC-MS/MS测定。液相色谱条件为:色谱柱为Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量:2μL。质谱条件为:电喷雾离子源(ESI~+),多反应监测(MRM)方式采集,外标法定量。结果表明:在5~500μg/L的系列浓度范围内,31种药物药物的相关系数r0.990;方法检测限为5μg/kg,定量限为10μg/kg;从10、50、100μg/L 3个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率在60%~110%,批内、批间RSD均小于20%。该方法可作为牛肉中这3类药物残留的确证方法。     

基于牙釉质基因巢式PCR性别鉴定 超微量DNA检测方法的建立

实验根据山羊牙釉质(AMEL)基因序列设计巢式引物,用紫外分光仪检测基因组DNA的浓度,梯度稀释(10 -2μg/μL、10-3 μg/μL,10-4μg/μL,10-5μg/μL),巢式PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测.结果表明,利用巢式PCR方法对10 pg量基因组DNA(约3个细胞)进行扩增,得到明显目的条带.巢式...     

高效液相色谱-串联质谱法同时检测辣椒制品中4种工业染料

为了同时检测辣椒制品中碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O、罗丹明B和对位红,利用超声提取结合液相色谱-串联质谱法,采用XTerra C18柱分离,以甲醇和含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱。在正离子模式下采用多反应监测(MRM)方式进行检测,采用基质曲线外标法进行定量。辣椒制品用乙腈-水超声提取,离心后取上清液进样分析。结果表明,碱性嫩黄O、罗丹明B的线性范围均为0.2~10μg/L,碱性橙Ⅱ、对位红的线性范围均为2~100μg/L,且线性相关系数均大于0.99。4种工业染料的检出限为0.03~0.60μg/kg,回收率为90.1%~116.0%,相对标准偏差为5.6%~14.8%。该方法选择性强,灵敏度高,且样品处理操作简单,适合于食品中4种非法添加工业染料的同时测定及确证分析。     

同时测定饲料中乙酰甲喹、喹乙醇、喹烯酮3种药物方法的研究

建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定饲料中乙酰甲喹、喹乙醇、喹烯酮3种药物含量的方法,饲料中3种药物经磷酸盐缓冲液(pH值3.0)-乙腈-甲醇(55∶25∶20)超声提取,采用Waters公司C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,流速1.0mL/min,进样量20μL,柱温24℃,检测波长260nm。该色谱条件下,3种药物分离良好,在2～100μg/mL之间,线性良好(r>0.999 6),平均添加回收率均高于80%,RSD≤10%,检出限2mg/kg。该方法操作简便易行,准确可靠,能够满足实际样品的分析要求。     

盐酸二氟沙星注射液稳定性研究

本文以紫外—可见分光光度仪测定盐酸二氟沙星注射液中二氟沙星的含量 ,采用经典恒温加速实验和强光照射实验研究该制剂的热稳定性和光稳定性。结果表明 ,该制剂盐酸二氟沙星的热降解反应为一级动力学过程。在40℃ ,5 0℃ ,6 0℃和 70℃时的降解速度常数分别为 :3 92 4× 10 -4 ,8 0 70× 10 -4 ,1 5 91× 10 -3 ,3 0 17× 10 -3 其热降解速度常数R2 98为 :1 2 13× 10 4 贮存有效期t0 9为 2 38年 ,半衰期为 15 6 6年 ,该制剂光稳定性尚属良好。     

复方盐酸土霉素注射液的制备

【目的】制备复方盐酸土霉素注射液,并对其质量浓度进行测定。【方法】通过预试验,确定复方盐酸土霉素注射液的配方组分及其大致用量。以焦亚硫酸钠、MgCl2、乙醇胺和复合有机溶媒为影响因素,以灭菌前后盐酸土霉素和甲硝唑质量浓度变化为考察指标,利用L9(34)正交试验确定复方注射液的最优配方。利用紫外分光光度法对注射液中甲硝唑和盐酸土霉素的质量浓度进行考察,并计算其回收率和精密度。【结果】复方盐酸土霉素注射液的最优配方为:每100mL注射液中含有2.5g甲硝唑、5.0g盐酸土霉素、3g氯化镁、0.2g焦亚硫酸钠、40mL复合有机溶媒(由N,N-二甲基甲酰胺和聚乙二醇400组成,体积比为2∶1)、4mL乙醇胺,其余为注射用水。甲硝唑和盐酸土霉素在1～30μg/mL质量浓度时与吸光度呈现良好的线性关系。制备的复方盐酸土霉素注射液中甲硝唑的平均回收率为(99.22±1.48)%,变异系数为1.49%;盐酸土霉素的平均回收率为(98.22±1.24)%,变异系数为1.26%。注射液中甲硝唑和盐酸土霉素的日内、日间精密度测定结果为:平均质量浓度较高,相对标准偏差较小,且不大于2.00%。【结论】确定的复方盐酸土霉素注射液配方合理,甲硝唑和盐酸土霉素稳定性好,且回收率高。     

盐酸克伦特罗对小鼠大脑皮层ATP、SDH、ADA和LDH活性的影响

通过对大脑皮层ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)、腺苷脱氨酶(ADA)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定,研究盐酸克伦特罗(CLH)对小鼠大脑损伤的影响.选健康小鼠160只,随机分为4组,分别灌胃12.5、25.0、50.0mg/kg的CLH,连续用药30d,对照组灌胃等量生理盐水,在灌胃处理5、10、20、30d时用比色法检测小鼠大脑皮层ATP酶、SDH、ADA和LDH活性的变化.结果表明:与对照组相比,灌胃CLH小鼠大脑皮层ATP酶和LDH活性降低,SDH和ADA活性升高.CLH对小鼠大脑酶活性的影响具有时间-剂量效应.双因素方差分析表明,剂量因素对结果的影响大于时间因素.说明CLH可影响小鼠大脑相关酶活性,对小鼠大脑的损害可能与大脑内ATP酶和LDH活性降低、SDH和ADA活性升高有一定的相关性.     

盐酸米多君联合左旋卡尼丁治疗透析相关性低血压的疗效观察

目的观察盐酸米多君和左旋卡尼丁联用治疗血液透析相关性低血压（IDH）的疗效。方法 162例IDH患者随机分为对照组、米多君组及联合治疗组（米多君＋左旋卡尼丁）,观察各组患者的疗效、血压及生化指标变化。结果联合治疗组的疗效及血压稳定最好,白蛋白、前白蛋白、C反应蛋白含量比对照组和米多君组显著改善（P〈0.01或0.05）。结论联用盐酸米多君和左旋卡尼丁是治疗IDH的安全、有效方法。     

盐酸环丙沙星搽剂的稳定性

采用紫外分光光度法测定兽医透皮吸收新型制剂盐酸环丙沙星搽剂中主要有效抗菌成分盐酸环丙沙星的含量，并用初均速法对该制剂的稳定性进行研究．结果表明，本制剂较稳定，盐酸环丙沙星分解的活化能为９２．９４ｋＪ·ｍｏｌ－１，室温（２５℃）贮存期为２．５ａ．     

甜菜碱盐酸盐对人工瘤胃发酵参数的影响

采用人工瘤胃体外发酵方法对培养液中甜菜碱盐酸盐不同质量浓度(0、16.7和33.4 mg.L-1)下,各时间段(3、6、12、18和24 h)的体外产气量、pH值、干物质降解率、氨态氮(NH3-N)、挥发性脂肪酸(VFA)、乳酸和菌体蛋白含量的测定,探讨甜菜碱盐酸盐对人工瘤胃发酵功能的影响。结果显示:培养液中甜菜碱盐酸盐的质量浓度为33.4 mg.L-1时,瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸、总VFA的浓度显著升高(P<0.01),干物质降解率显著提高(P<0.01),乳酸浓度显著降低(P<0.05);而甜菜碱盐酸盐对瘤胃液pH值、产气量、菌体蛋白含量、NH3-N浓度无显著影响。结论:甜菜碱盐酸盐可改善人工瘤胃发酵性能。     

紫外分光光度法检测肉制品中盐酸克伦特罗残留量

目的建立一种快速检测肉制品中盐酸克伦特罗残留量的方法。方法 -环糊精与盐酸克伦特罗结合后用紫外分光光度法测定吸光度值并建立标准曲线,检测样品中盐酸克伦特罗含量。结果吸光度值强度与盐酸克伦特罗浓度在358 nm波长处呈线性关系。当包合体系p H 7.0、温度30℃、静置30 min时,检出限为0.015 mg/L,线性范围为0.05~0.15 mg/L,线性相关系数r=0.9995,精密度为2.20%~6.04%,回收率为95.0%~106.0%。结论紫外分光光度法是检测肉制品中盐酸克伦特罗残留量的简单、快速、可靠方法。     

盐酸氯苯胍在兔体内的药动学及生物利用度研究

【目的】研究抗球虫药盐酸氯苯胍在家兔体内的药物代谢动力学特征及内服给药的生物利用度。【方法】16只健康新西兰大白兔,公母各半,分为2组,一组以2.00 mg·kg~(-1)单次静脉注射给药,另一组以100.00 mg·kg~(-1)单次内服给药,通过耳部静脉采血,并用HPLC-UV法检测血浆中的盐酸氯苯胍浓度。使用WinnonlinTM药动学软件非房室模型计算相关药动学参数,采用SPSS 16.0软件得到药时曲线图。【结果】兔静脉注射盐酸氯苯胍(2.00mg·kg~(-1))后,药-时曲线下面积为1.72μg·h·m L~(-1),血浆清除率为1.17 L·h~(-1)·kg~(-1),表观分布容积为2.87L·kg~(-1),消除半衰期为1.72 h;内服盐酸氯苯胍(100.00 mg·kg~(-1))后,药-时曲线下面积为6.33μg·h·m L~(-1),消除半衰期为8.94 h。盐酸氯苯胍2种给药方式的药动学参数均存在显著差异(P0.05),内服给药的生物利用度较低,仅为7.36%。【结论】盐酸氯苯胍静脉注射给药的表观分布容积较大,药物在兔组织中分布广泛,并且消除迅速;内服盐酸氯苯胍后,药物经肠道吸收的量较少,体内药物残留较低。     

黄连盐酸小檗碱对照品的制备

采用硅胶柱层析和重结晶等方法对黄连50％乙醇提取物进行分离纯化.通过熔点测定、HPLC、质谱等对自制的盐酸小檗碱对照品进行结构确证,采用TLC和HPLC进行对照品纯度检测.所制备的盐酸小檗碱对照品经TLC检查无杂质斑点,采用HPLC面积归一化法测定其含量达98.97％.表明该方法制备的盐酸小檗碱对照品纯度高,符合中药化学对照品的相关技术要求,可作为黄连药材及其制剂质量控制用的化学对照品.     

不同产地益母草饮片中盐酸水苏碱含量差异分析

目的比较全国不同产地益母草饮片中盐酸水苏碱含量差异,为益母草的质量研究提供参考依据。方法按照2010版《中国药典》规定,采用HPLC-ELSD法测定各样品中盐酸水苏碱的含量。结果不同产地益母草饮片中盐酸水苏碱含量差异很大,在0.102%～2.142%之间。结论为保证益母草饮片的质量和疗效,建议选择规范化人工栽培的益母草。