河南许昌地区规模化肉鸡场滑液囊支原体的分离鉴定及耐药性检测

为了分析河南许昌地区规模化肉鸡场滑液囊支原体流行情况及耐药情况，本试验从许昌地区规模化肉鸡场采集疑似鸡滑液囊支原体感染的病料组织179份，采用细菌分离培养、形态观察及PCR等方法进行滑液囊支原体鉴定，采用K-B药敏纸片法对分离的滑液囊支原体进行耐药性检测。结果显示，分离得到87株鸡滑液囊支原体，其对金霉素、土霉素、吉他霉素、替米考星、多西环素、泰乐菌素和林可霉素耐药率分别为98.8%、94.3%、90.7%、78.2%、61.5%、58.8%和57.7%,对其他抗菌药的耐药率介于10.3%～17.9%;分离菌株呈现多重耐药性，以耐8、7、6种抗菌药分离菌株最多，分别占分离菌株的16.1%、17.2%和19.5%。结果表明许昌地区规模化肉鸡场滑液囊支原体流行严重，对临床中常用药物出现严重耐药性。本试验结果可为该地区的规模化肉鸡场滑液囊支原体防控提供指导。     

鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌，本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定，并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示，从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落，为革兰氏阴性短小杆菌，瑞氏染色呈两极浓染；生化鉴定结果显示，分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇，硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性；16S rRNA基因序列系统进化树分析显示，该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支，同源性 > 99%；细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符；荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段，与荚膜血清A型相符；动物回归试验显示，该分离菌有较强的致病性；药敏试验结果显示，该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药；经耐药基因PCR检测显示，该分离菌携带Sul1、Sul3、tet（X）和Intl1 4种耐药基因，与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌，为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。     

鸡呼吸道致病菌的分离鉴定

本试验旨在为开发防制鸡细菌性呼吸道疾病产品提供依据。本试验将患有呼吸道疾病的鸡病料如喉管、气管、肺脏组织接种到各种选择培养基分离细菌,对分离的17株菌株进行生化鉴定、PCR鉴定和致病力测定。结果显示,在伊红美蓝琼脂(EMB)培养基中分离出黑色金属光泽菌落;革兰氏染色后在光学显微镜下见到革兰氏阴性的短杆状细菌;PCR扩增出1 500 bp大小条带,测序结果与GenBank中细菌16S rDNA序列进行BLAST比对并构建系统进化树,分离菌最终鉴定为一株大肠杆菌。将分离的致病菌滴鼻感染肉鸡能损伤肉鸡呼吸道,使喉管出现血斑,气管红肿、布满血点,心脏、肝脏包裹黄色干酪样物质,气囊浑浊不透明,具有致病性。结果表明,分离的致病菌可作为产品开发的基础。     

一例羊皮下脓肿病原的分离鉴定及药敏试验

为确定某羊场一例羊皮下脓肿病的病原，将病料样本接种于TSA固体培养基进行病原分离，然后对分离菌进行革兰氏染色镜检、生化鉴定、药敏试验和生物信息学分析。结果分离到1株革兰氏阳性球菌和1株革兰氏阴性短杆菌，经生化鉴定以及16S rDNA PCR扩增、测序、同源性分析，鉴定该分离菌株为金黄色葡萄球菌和溶血性曼氏杆菌；2株细菌对头孢曲松、链霉素、四环素、多西环素、左氧氟沙星等多种药物敏感。     

一株藏猪源奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验

本研究从某藏猪场发病仔猪病料中分离细菌，对分离菌进行形态学、染色特性、生化特性鉴定，并分析16S rDNA基因同源性，同时进行了药敏试验。分离鉴定结果得出：分离菌呈多形性，多为革兰氏阴性短杆菌，少数为长杆状，在SS培养基上形成中心黑色、边缘白色的单菌落；生化反应对鸟氨酸脱羧酶、尿素酶、葡萄糖、柠檬酸盐、山梨醇、硫化氢等呈阳性反应；分离株16S rDNA基因的PCR扩增目的条带约为1 410 bp，在GenBank上进行同源性比对，与奇异变形杆菌的相似度为99%。从形态学、生化特性和16S rDNA序列分析结果鉴定出所分离的菌株为奇异变形杆菌。药敏试验结果显示：菌株的耐药性很强，只对头孢他啶、氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考、左氧氟沙星、麦迪霉素等敏感。     

鸡大肠杆菌病病原菌的分禹与鉴定

从山西省的10个地市肉鸡场采集52份疑似大肠杆菌病料进行细菌的分离和生化鉴定，分离到大肠杆菌49株。应用微量平板凝集试验，对分离的49株致病菌进行了血清型鉴定，鉴定出42株共有11种血清型，其中以02、078、01、074、011血清型最多，占能定型分离致病菌株的75．9％。     

红腹锦鸡大肠杆菌病的细菌学诊断

无菌采集病死红腹锦鸡肝脏、脾脏和心血,接种多种培养基分离细菌。以生化试验和小鼠攻毒试验,鉴定分离细菌及其致病性。采用PCR方法扩增分离细菌16S rRNA,测定核苷酸序列,与GenBank中大肠杆菌相应基因序列进行分析比较,绘制系统进化树。结果表明,分离细菌为大肠杆菌,可以致小鼠死亡。其16S rRNA基因序列与GenBank登录的大肠杆菌相应基因同源性超过99%。由此证明,该红腹锦鸡死于大肠杆菌病。     

山东省某规模鸡场传染性支气管炎病毒诊断及细菌分离鉴定与药敏分析

2018年7月,山东省诸城市某规模肉鸡场出现个别鸡瘫痪,稀便,采食量略微偏低,生长速度偏慢。大群无呼吸道症状。20日龄后发病数量居多,约占到大群的千分之五。实验室对送检的8只鸡病料进行了病毒pcr鉴定、细菌分离鉴定及药敏分析。鉴定得出传染性支气管炎病毒阳性,分离到革兰氏阴性杆菌;通过生化鉴定结果为大肠杆菌;根据药敏结果及病毒检测结果对该肉鸡场进行科学用药,降低了滥用药、过度用药对鸡场带来的危害。     

兔金黄色葡萄球菌的分离鉴定和耐药性分析

为了明确洛阳某地区兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的致病菌及其药物敏感性，本试验无菌采取病兔的病灶进行细菌分离纯化、革兰染色镜检、16S rDNA序列鉴定，并采用药物纸片琼脂扩散法进行分离菌的药敏试验。分离鉴定结果显示，从病兔肺脏、肝脏和脾脏中分离的致病菌为金黄色葡萄球菌。药敏试验结果显示，分离的金黄色葡萄球菌对红霉素、麦迪霉素、卡那霉素、复方新诺明、氨苄西林、丁胺卡那、头孢氨苄、头孢呋辛、呋喃唑酮具有耐药性；对羧苄西林、哌拉西林、诺氟沙星、多黏菌素B、多西环素、庆大霉素、新霉素敏感。结果表明该兔场家兔发病原因为金黄色葡萄球菌感染，且分离菌对多种药物耐药，通过药敏试验结果合理用药可减少细菌耐药性的发生。     

内蒙古某肉牛场呼吸道疾病病原的分离鉴定

2017年5月,内蒙古某肉牛场暴发呼吸道疾病,为了确诊该次疾病的病原,无菌采集牛鼻汁接种于鲜血琼脂培养基进行细菌的分离鉴定,同时对牛鼻汁中的病原进行PCR检测,并针对分离菌进行药物敏感性试验。根据细菌分离结果将该分离菌初步鉴定为链球菌;药敏结果显示,该分离菌对阿米卡星、壮观霉素、强力霉素和阿奇霉素高度敏感。PCR检测结果显示,病料中的牛呼吸道合胞体病毒和支原体PCR检测结果为阳性。由以上结果可以得出引起该肉牛场肉牛发病的病原为牛呼吸道合胞体病毒、支原体和链球菌。     

番鸭大肠埃希氏菌的分离及部分生物学特性研究

鸭大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些菌株所致的一类传染病。随着规模养殖业的发展，由于防疫措施滞后，番鸭规模化饲养场的传染病越来越严重，番鸭发生大肠杆菌病已成为影响养鸭业经济效益的重要疫病之一。为有效防制该病，近来，我们在福建省６个大肠杆菌病较为严重的种鸭场分离到９株大肠埃希氏菌，并对分离菌株进行了致病性试验、生化试验、药敏试验、血清型鉴定及某些生物学特性研究，现报告如下。１材料与方法１．１培养基麦康凯培养基，由上海医学化验所试剂厂生产；EMB、营养琼脂、营养肉汤参照文献犤１犦提供的方法配制。１．２…     

一例血清4型I群禽腺病毒感染的诊断

2017年3月,四川省某养鸡场饲养的肉鸡突然出现精神萎靡、心包积液、肝脏肿大和坏死为主要特征的疫病,临床初步诊断为I群禽腺病毒感染,取送检的病料组织进行实验室病毒分离鉴定,并通过分子生物学PCR检测和序列分析,最终确定该养鸡场发生了血清4型I群禽腺病毒感染并分离到致病毒株,养殖场应该引起对该病的重视。     

肉鸡安卡拉病与大肠杆菌病混感的诊治

2023年5月,葫芦岛市建昌县某肉鸡场饲养的25日龄白羽肉鸡10000只突然出现发病死亡现象,通过临床诊断及安卡拉病PCR诊断及细菌的分离、培养鉴定及药敏试验,确诊该病为安卡拉病与大肠杆菌病的混合感染。本文详细介绍了实验室检验流程及治疗和预防方法,总结了治疗过程中的经验和心得体会,供参考。     

鸡波氏杆菌病的诊断

石家庄地区某肉鸡场暴发疫病。经流行病学调查、临床检查、病原分离培养与鉴定、病理学检查等方法诊断为鸡波氏杆菌病。人工复制试验结果表明，细菌分离物对鸡和小白鼠均具有致病性。药敏试验结果显示，磷霉素钠、氟苯尼考等抗生素对分离物抑菌效果最佳。     

云南省某养鸡场鼻气管鸟杆菌核酸检测及其16S rDNA基因序列分析

为确定云南省易门县某养鸡场大量肉鸡出现流鼻涕、打喷嚏、面部肿胀、食欲下降的原因，采集病死肉鸡鼻腔黏液及肺、气管等组织，处理后提取病原核酸，通过RT-PCR/PCR方法分别检测禽流感病毒（AIV）、传染性喉气管炎病毒（ILTV）、鼻气管鸟杆菌（ORT）、鸡副嗜血杆菌（ICV）。结果显示，仅ORT为核酸阳性，其他病原均为阴性。对检出的ORT阳性样品16S rDNA基因进行序列分析发现，阳性样品与伊朗分离株和土耳其/匈牙利分离株的同源性均在99.7%以上，都处于同一分支内，与国内2014年的报道一致，说明云南省流行的ORT变异较少，仅具有相对短的进化史。本研究对于指导该地区鸡群细菌病防控具有参考意义。     

猪链球菌7型的分离鉴定及药敏试验

某猪群暴发类似猪链球菌病,为确诊和防制该病,通过将病料接种到血液营养琼脂培养基和TSA培养基分离细菌,对分离菌株进行生化鉴定和PCR鉴定,并接种小白鼠进行动物试验和药敏试验。结果表明,分离的细菌为猪链球菌7型,对小白鼠具有致病性,且对恩诺沙星和头孢唑啉高度敏感。该结果对临床防制猪链球菌病具有参考意义。     

鸭疫里默菌的分离鉴定与动物回归实验

为了解最近吉林地区某鸭场大量鸭病死的原因,对该鸭场送检的病料进行细菌分离培养并成功分离出一株革兰阴性菌。通过生化试验、16S r RNA鉴定及序列测序分析、玻片凝集试验和动物回归试验等对分离菌进行鉴定,16S r RNA基因测序结果显示,分离菌与鸭疫里默菌同源性达到99%;该菌能够使雏鸭死亡且致病性较强。结果表明,该鸭场鸭群死亡原因是1株血清2型鸭疫里默菌感染。     

奶山羊D型产气荚膜梭菌的分离鉴定

为鉴定2018年夏季昆明市某奶山羊场持续发生羊急性死亡原因,从该场采集病料进行细菌分离鉴定、小鼠毒力试验、毒素基因检测及序列分析、16S rDNA序列分析比较和药敏试验。结果显示:引起羊发病的病原菌鉴定为D型产气荚膜梭菌;对其2个毒素基因α、ε及16S rDNA序列分析结果表明,毒素基因及16S rDNA高度保守,不同毒素型的菌株16S rDNA序列100%同源,经BLAST比对的2个毒素基因与参考序列之间核苷酸完全同源;分离株在接种小鼠后48 h死亡,表明其毒力较强;药敏试验结果表明,分离菌对恩诺沙星、青霉素、氟苯尼考、呋喃唑酮、氯霉素等抗生素均高度敏感,而对卡那霉素、庆大霉素和链霉素等耐药。试验结果可为羊产气荚膜梭菌感染的临床用药提供参考。     

仔猪李斯特杆菌的分离与鉴定

为了对某猪场病死仔猪的死亡病因进行调查,本试验采集病料进行研究,采用鉴别培养基分离、生化特性鉴定、PCR扩增细菌16S rRNA基因及测序分析等方法对样品中存在的细菌进行分离鉴定,结果显示分离菌为李斯特杆菌。采用标准K-B纸片法对分离菌株进行20种抗菌药物的药敏试验,并对其生长曲线进行测定。结果显示,此菌株对青霉素G、磷霉素、阿莫西林等药物高敏,而对呋喃唑酮等药物耐药。37 ℃培养6~14 h后细菌处于增殖期。本研究为中国仔猪李斯特杆菌病细菌学检测及治疗提供了科学依据。     

肉鸡病毒性关节炎病毒与金黄色葡萄球菌混合感染的鉴定及诊断

对宁夏4起同时发生的临床怀疑为肉鸡病毒性关节炎的疫情进行流行病学调查,采用RT-PCR和细菌分离鉴定对病料进行初步鉴定和诊断。结果表明,该病例为肉鸡病毒性关节炎与金黄色葡萄球菌混合感染,这是宁夏首次发现禽病毒性关节炎病例。