药用植物裸花紫珠的组织培养与快速繁殖研究

以种子为外植体,MS为基本培养基,通过比较不同植物生长调节剂种类和浓度配比、培养条件以及生根苗的移栽基质,建立裸花紫珠组织培养快速繁殖体系。结果表明：外植体表面消毒以75%酒精预处理10 s,再用0.1% HgCl2浸泡10 min,效果最好;种子在MS基本培养基上萌发;丛生芽继代增殖的最适温度为28℃,最适光照强度为1500 lx;培养基MS+ 6-BA 2.00 mg/L+ NAA 0.05 mg/L适宜继代增殖,30天的增殖系数为10.87;培养基MS+ NAA 0.50~0.75 mg/L适宜诱导生根,生根率100%;生根苗移栽于河沙、珍珠岩和表土(1:1:1)的混合基质中,成活率96%,高生长量最大。运用该组培快繁技术,可以实现裸花紫珠的工厂化育苗。     

川麦冬组织培养技术研究

摘 要: 以川麦冬根的嫩基部为外植体,对其无菌苗的诱导、增殖及不定根的诱导进行了初步的研究。结果表明,用75%酒精20s+0.1%HgCl210min消毒效果最好。在以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基中进行的不定芽诱导生长和继代培养,诱导和增殖效果较好,丛生芽的一代诱导率为80%,二代以后丛生芽诱导率为100%。在继代至第四代时丛生芽的平均数目达到6.24个,完全可以满足快速繁殖的需要。麦冬组培苗不定根的最适培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L,生根率达100%,田间移栽2周后成活率可达到100%,且幼苗生长良好。     

生姜组培苗的培育及其生产应用

利用组织培养技术,对生姜进行茎尖培养,筛选出适合丛生芽快速繁殖的培养基配方（MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L）;对生姜组培苗进行炼苗和移栽试验,结果炼苗提高移栽成活率的作用最大,壮苗加炼苗移栽成活率最高,可达100%;组培苗生产的一代姜,姜块小、姜体健康,适宜用作种姜;二代姜姜块大、产量高,商用价值与经济效益好。     

鸡蛋花组织培养与快速繁殖

以鸡蛋花幼嫩带芽茎段为外植体,通过对初代启动培养、增殖及生根培养方案的筛选,建立了鸡蛋花的组织培养和快速繁殖体系。结果表明,最适启动培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L,外植体诱导萌发率达83.33%;培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,培养基MS+6-BA 2.00 mg/L+NAA 0.05 mg/L适宜继代增殖,30 d的增殖系数为8.73;生根最适培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 1.0 mg/L,生根率达98.1%。因此,本研究为鸡蛋花培养育苗与品种改良提供依据。     

葱兰的离体培养及再生体系研究

为了快速获得健康的葱兰幼苗,通过优化离体培养条件,建立葱兰高效的离体再生体系。利用葱兰叶片、鳞叶和顶芽作为外植体进行了愈伤组织和植株再生体系研究。结果表明,顶芽为最适外植体;丛生芽诱导和增殖的最适培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L,其次是MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+ IBA 0.5 mg/L,生根率为100%,为葱兰的工厂化生产提供技术参考。     

红芽芋的丛生芽诱导和再生体系建立

本研究以红芽芋球茎的顶芽或侧芽为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素,进行组织培养试验,采用正交设计对影响红芽芋组织培养的丛生芽诱导进行优化,并建立红芽芋离体再生体系。研究结果表明:初代培养过程中MS+6-BA 1.5~2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L为丛生芽诱导最佳培养基;MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L为理想的继代增殖培养基;1/2MS+IBA 0.1~0.3 mg/L是最佳的生根培养基适于诱导生根获得再生植株。     

金边阔叶麦冬的组培快繁技术研究

旨在研究金边阔叶麦冬的组织培养与快速繁殖技术。分析了植物生长调节剂对金边阔叶麦冬地下茎芽和叶片愈伤组织诱导、芽分化及试管苗生根的影响。结果表明:MS+BA 1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L为地下茎芽诱导愈伤组织最佳的培养基,诱导率达100%;MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L为叶片诱导愈伤组织较为理想的培养基,诱导率为52%。地下茎芽形成的愈伤组织其芽诱导率、芽增殖倍数明显高于叶片,诱导率高者达100%,增殖倍数高者为4.6。金边阔叶麦冬试管苗生根的较为合适的培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L和1/2MS+IAA 0.25 mg/L,生根率达100%,平均生根数量在5根以上。试管苗移栽苗成活率达90%以上。     

附子茎段组培快繁体系的建立

为探讨附子丛生芽的诱导、增殖及不定根诱导条件。本研究以附子带腋芽茎段为外植体,以MS和1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、TDZ、IBA等植物生长调节剂,观察附子丛生芽的诱导、增殖、生根情况。结果发现,附子茎段经75%乙醇处理30 s后,0.1%Hg Cl2灭菌10 min,污染率为27.78%,存活率可达84.61%。附子第三个腋芽,诱导率为53.34%,死亡外植体少。丛生芽在MS+6-BA 2 mg/L+NAA0.3 mg/L条件时诱导率为86.67%,芽长1.947 cm,植株茎干粗壮。增殖培养时添加TDZ 2 mg/L+NAA0.3 mg/L,增殖系数达到4.029,苗粗壮,叶片浓绿。生根培养基条件为1/MS+IBA 0.5 mg/L时,15 d的生根率可达100%,平均根长0.906 cm,平均根数10.5条,叶色翠绿,生长旺盛。研究表明,最佳的取材部位为第三个腋芽,丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L,丛生芽增殖培养基中添加TDZ 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L的增殖效果最好,适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。本研究为附子快繁体系的建立和工厂化育苗提供了理论依据。     

沙漠乔桑的组织培养与工厂化生产

选取沙漠乔桑不同的外植体,通过芽的诱导、试管苗的快速增殖、试管苗生根和驯化移栽筛选出适宜的工厂化育苗工艺流程。3—6月份选取沙漠乔桑待萌发冬芽、萌发侧芽,流水冲洗干净后,70%酒精浸10秒,然后用0.15%氯化汞灭菌5~10min,以不同组合的培养基对外植体进行诱导、快速繁殖、生根。结果表明：以MS+BA1.0mg/l（单位下同）+NAA0.1作诱导培养基,用MS+BA0.5+NAA0.05作增殖培养基进行快速繁殖,以1/2MS+NAA0.2作生根培养基,移栽到草炭:珍珠岩:蛭石=3:1:2的混合基质中。通过试验筛选出了一套快速繁殖体系,建立了适宜于沙漠乔桑工厂化生产的工艺流程。     

珍稀濒危植物沙冬青的组织培养

试验以珍稀濒危植物沙冬青无菌苗的子叶、茎段为外植体材料,研究不同激素配比的培养基对不同外植体愈伤组织培养、丛生芽增殖及生根培养的影响,并筛选适宜各阶段培养的最佳培养基配方。结果表明,子叶是诱导沙冬青愈伤组织的最好外植体,在6-BA 0.5 mg/L、2,4-D 0.5 mg/L时,其愈伤组织诱导率达到最大值81.8%;在6-BA 2.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L时丛生芽增殖率达到最大值90.2%,且丛生芽数量多、茎干健壮、生长旺盛,说明较高浓度的细胞分裂6-BA对丛生芽增殖具有明显的促进作用;在以1/2MS为基本培养基,加入NAA 1.0 mg/L时,生根率达到最大值70.4%,且生根时间最早,主根明显、粗壮且根毛数量多;适当调节培养基中无机盐的浓度提高生根率是将来沙生植物组织培养中研究的重点和难点。     

驱蚊香草快繁体系的建立及工厂化育苗主要影响因素研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片作外植体,在含不同激素的不同培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株。结果表明,丛生芽诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L较好,诱导率为96%;增殖培养基以MS（B5）+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L较好,增殖系数达8倍以上,且增殖芽生长好;壮苗培养基为MS（B5）+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L为好;生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L和MS+IBA0.2 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺。影响工厂化育苗的主要因素有激素浓度、继代次数和移栽管理     

马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖

为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。     

切花非洲菊组织培养及快速繁殖研究

本试验以花托为外植体对适宜在海南省栽培的耐高温切花非洲菊品系进行了组织培养,成功获得再生植株,并建立了快速繁殖体系。试验将外植体材料,经消毒后,在无菌条件下,分别接种到不同成分配比的固体培养基上(包括愈伤组织及芽诱导培养基,丛生芽增殖培养基,生根培养基)进行培养。通过比较、分析等方法,筛选出最适宜的培养基。并通过实际操作获得了炼苗、移栽等相关技术。试验结果表明:非洲菊组织培养的最佳诱导培养基是MS+BA 6.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶7 g/L;最佳增殖培养基是MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶7 g/L;最佳生根培养基是1/2MS+IBA 0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖15 g/L+卡拉胶7 g/L。并且本试验在炼苗、移栽等相关技术方面也得出了一定的结论。为非洲菊优良切花品种在海南省快速推广和新品种研发等提供技术支持。     

勿忘我组织培养繁殖技术的研究

选用勿忘我蓝、紫花色的种子为材料,采用L9(34)正交试验筛选适宜勿忘我丛生芽诱导的培养基,采用两因素随机区组设计筛选适宜勿忘我生根培养基,并对移栽基质也进行了初步试验。试验结果表明:勿忘我蓝紫2个品种适宜的丛生芽诱导培养基为0.2 mg/L ZT+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,丛生芽的增殖倍数为9.2和8.8,4种因素对勿忘我丛生芽的诱导作用的顺序为6-BA>ZT>NAA>KT;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.45 mg/L,生根率达到80%;适宜炼苗的培养基质为草炭∶珍珠岩=1∶1,成活率达88%。     

鞑靼忍冬再生体系的建立

以鞑靼忍冬的成熟种胚作为外植体,建立再生植株体系,结果表明:成熟种胚采用2%的NaClO溶液处理时,最佳消毒处理时间为6 min,存活率为75%。诱导愈伤组织以及诱导不定芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为74.85%;不定芽诱导率为69.35%。增殖的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,增殖率为76.58%。诱导生根最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA,生根率为76.45%,平均根长为4.25 cm。通过组织培养再生植株,对其快速繁殖、种质资源保存和改良及规模化生产利用以及工厂化育苗技术研究提供理论基础。     

驱蚊草组织培养和快速繁殖技术的研究

采用植物组织培养技术,利用驱蚊草顶芽及带腋芽茎段为外植体,开展驱蚊草的诱导分化、芽苗增殖、壮苗培养、生根和移栽等系列研究。结果表明,采用二次消毒方法,有利于无菌系的建立;在无菌系建立后,以带叶柄叶片为材料,在MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L培养基上进行培养,可分化、获得高达60%的正常丛生芽;以1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L为丛生芽增殖继代培养基,不仅能够满足快繁、增殖,同时也能够降低驱蚊草试管苗玻璃比发生频率;生根培养基用1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L外加AC0.5mg/L,炼苗后将瓶苗移栽到泥炭土、沙、蛭石(质量比为2:3:1)的基质中,控温、保温、保湿栽,成活率可达80%左右。     

黑木相思优良无性系(SR17)组培苗茎段再生体系建立

为建立黑木相思(Acacia melanoxylon R.Br.)茎段高频率再生体系,以优良无性系(SR17)组培苗茎段为外植体,研究培养基中添加TDZ及TDZ与IAA组合使用、不同浓度Ag NO3以及茎段部位对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明:当TDZ质量浓度为0.05 mg/L时,愈伤诱导率、不定芽分化率和不定芽数最高,IAA 0.05 mg/L配合TDZ使用可使不定芽分化率高达89.4%。同时发现不同质量浓度Ag NO3对不定芽分化率影响不显著,当Ag NO32.5 mg/L时,诱导的愈伤和不定芽容易产生玻璃化。另外发现组培苗中部茎段最有利于不定芽分化。因此选择组培苗中部茎段为外植体,在WPM+TDZ 0.05 mg/L+IAA 0.05 mg/L的诱导培养基上培养30 d,转入MS+6BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L的分化培养基上培养30 d获得最高的不定芽诱导率,且平均每个外植体形成14.3个不定芽。将经过伸长生长的不定芽转入生根培养基1/2 MS+IAA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L时,生根率高达95.8%。生根培养10 d,炼苗培养20 d后获得可供移植的组培苗。本研究为黑木相思遗传转化和分子育种提供理论参考。     

利用组织培养技术快速繁殖白木香

本研究利用组织培养技术,以白木香(Aquilaria sinensis)种子为材料,建立快速繁殖白木香的方法体系。首先进行种子消毒,播种到MS培养基上,然后将白木香无菌幼苗切成带1 个腋芽的茎段,诱导白木香丛生芽;剪下生长健壮的单个芽苗,诱导生根。白木香腋芽诱导分化的最佳培养基为MS+1 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA+30 g/L 蔗糖+5 g/L 植物凝胶,白木香组培苗生根的最佳培养基为MS+30 g/L 蔗糖+5 g/L 植物凝胶。白木香组织培养快速繁殖技术将应用于白木香特异种质的快速大量扩繁中。另外,由于白木香种子随采随种、不易保存的特性,组培快繁技术也可随时为白木香结香机理研究提供遗传背景相对一致的大量新鲜幼嫩的组织材料。     

白木香的组织培养快速繁殖研究

本研究利用组织培养技术,以白木香(Aquilaria sinensis)种子为材料,建立快速繁殖白木香的方法体系。首先进行种子消毒,播种到MS培养基上,然后将白木香无菌幼苗切成带1个腋芽的茎段,诱导白木香丛生芽;剪下生长健壮的单个芽苗,诱导生根。白木香腋芽诱导分化的最佳培养基为MS+1 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+5 g/L植物凝胶,白木香组培苗生根的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+5 g/L植物凝胶。白木香组织培养快速繁殖技术将应用于白木香特异种质的快速大量扩繁中。另外,由于白木香种子随采随种、不易保存的特性,组培快繁技术也可随时为白木香结香机理研究提供遗传背景相对一致的大量新鲜幼嫩的组织材料。     

草珊瑚的无菌播种和丛生芽诱导研究

以去除果肉的草珊瑚种子为试验材料,采用无菌播种方式培育出种子苗,并以此为组织培养的外植体来源,诱导出丛生芽,为离体再生体系的建立奠定基础.结果表明:种子的最佳消毒方法为先用75％酒精消毒30 s,无菌水冲洗3～4次,再用0.1％升汞消毒3 min,无菌水冲洗3～4次;最佳播种培养基为1/4 MS+NAA 0.05 mg/L,温度25℃,每天光照12 h,种子发芽率可达68.89％;切取种子苗的顶芽接种于MS+6-BA 4.0 mg/L培养基上可诱导出丛生芽,且丛生芽易于增殖和生根.