动物病理组织切片制作方法的改良

为找到一种快捷实用的动物病理切片制作技术,本研究以经典石蜡切片技术为基础,通过对关键技术环节的改良与创新,探索出了一种新的病理切片快捷制作方法.结果表明,用此方法所得的病理切片质量高,HE染色着色良好,镜下观察细胞结构清晰,胞质与胞核对比鲜明.     

一种快捷安全的动物病理组织石蜡切片制作技术

为探索一种快捷、安全、实用的病理切片制作技术,本试验在传统石蜡切片制作技术的基础上,通过技术改良与创新,发现了一种快捷安全的病理切片制作方法。试验结果表明,运用这种方法制作病理切片不仅简单快捷,而且制得的病理切片质量高,H.E.染色细胞着色良好,镜下观察细胞结构清晰,胞质与胞核对比鲜明;本方法兼具冰冻切片和石蜡切片二者的优点。     

快速HE染色切片制作

苏木精和伊红染色方法 (简称HE染色 )是生物学和医学领域中组织学和细胞学等学科中最常见的切片染色方法。染色质量的好坏直接影响到细胞观察的科学性和病理学诊断的准确性。但在一些特殊情况下 ,在保证切片质量的前提下需要进行快速石蜡HE染色切片。经过长时间的石蜡切片HE染色的制作实践 ,对实验室不具备自动脱水机和自动染色机的HE染色切片快速制作方法进行了如下的总结。1　石蜡切片的快速制作常规 (普通 )快速包埋法 :此方法快速而且制片的效果很好 ,整个过程一般在 10～ 15min完成。过程如下 :①取材、固定、脱水 :取材小而薄 ,组…     

家蚕卵石蜡切片中卵壳软化技术探讨

以KOH溶液作为卵壳软化液,设置浓度和软化时间梯度对家蚕蚕卵进行软化,以切片成功率为标准摸索卵壳最佳软化条件.结果表明以10%的KOH和5min的软化时间得到的切片成功率最高.     

脊髓等柔软组织石蜡组织切片制作技术探讨

以家兔脊髓组织为实验材料,探讨制作大批量脊髓组织教学标本简便、可行的方法。结果表明,用常规方法制作优质的脊髓组织切片时,在10%的中性福尔马林固定液中固定7 d,进行H.E染色时,苏木精染色的时间为30 min,伊红染色时间6 min,制作的切片细胞核嗜碱性、呈蓝紫色,细胞质和细胞间质嗜酸性、呈粉红色,胞质内尼氏体为蓝紫色颗粒,两者间颜色对比度好,容易区分,是制作大批量教学标本的可选方法。     

牛眼球石蜡切片制作方法的探索

为探索一种牛眼球的石蜡切片制作方法,本试验比较了常规石蜡切片制作方法和改良的石蜡切片制作方法．结果表明,试验组标本固定后肉眼可见视网膜与脉络膜紧密相连,仅有小部分视网膜出现脱离的现象;切片显示小梁网连续性未被破坏;眼球壁全层组织连续性未破坏,各层未出现分离现象;视网膜无脱离,各层组织细胞无收缩现象。说明试验组大大改进了眼球固定、脱水、透明技术方法,解决了较大眼球无法制作石蜡切片的难题,为眼球基础研究和相应病理研究提供了基础：     

草地早熟禾的石蜡切片制作技术的优化

以草地早熟禾为材料,在传统石蜡切片方法的基础上,结合草地早熟禾组织结构特点,对脱水、透明、染色等重要制片环节进行改良。结果显示:脱水过程中,将乙醇逐级梯度脱水时间增加,有利于后续浸蜡,避免石蜡切片上的植物材料脱落;透明过程中,将纯二甲苯增加更换频率,同时减少每次处理时间,其透明更彻底;有效的番红固绿染色时间组合处理,使草地早熟禾解剖形态更为清晰。一系列针对草地早熟禾石蜡切片的优化,使得解剖图像染色均匀、图像清晰,不易出现植物材料脱落及组织结构不完整的情况,是观察草地早熟禾形态结构的有效方法。     

不同苏木精——伊红染色液在组织石蜡切片中的应用

应用八种苏木精染色液和三种伊红染色液配制法,对组织石蜡切片进行了染色比较试验,试验结果表明,Harris苏木精液、Mayer苏木精液、Gill半氧化苏木精液、碘化钠氧化苏木精液和1%伊红复制液、1%伊红酒精液的染色性能稳定,能长期使用,氧化膜较薄,结晶析出较少,配制方法简便,染色效果良好。     

猪分离卵泡石蜡切片制作的改进

猪完整分离有腔卵泡内的卵泡液含量丰富,采用常规石蜡切片制作方法往往很难制作出结构自然完整的卵泡切片。本试验用Bouin氏固定液固定猪分离卵泡72 h,脱水程序采取二甲苯∶乙醇(1∶1)过渡的方法,并适当加长透蜡时间。通过改进卵泡固定、脱水和透明等程序后,成功制成效果优良的猪分离卵泡组织切片。     

鸽常规石蜡切片制作技术的体会及改良

为了使传统的石蜡切片技术满足病理研究与诊断的需要,针对鸽的石蜡切片制作过程中易出错的环节,探讨制作优良鸽石蜡切片的具体方法,对制作过程中取材、固定、修整、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤进行改良,镜检结果表明获得了高质量的石蜡切片。     

制作石蜡切片验证鸡胚盘显微注射外源DNA的效果

胚盘下腔是禽类胚胎发育到囊胚时出现的特有腔室,通过向禽类胚盘下腔注射外源细胞或基因是常用的制备嵌合体和转基因禽类的方法。本试验通过制备石蜡切片,验证胚盘下腔显微注射效果的方法。以白来航鸡种蛋为模型,向胚盘下腔中微注射少量的标记物,经过琼脂糖包埋脱水后制作石蜡切片,获得完整的鸡胚Ⅹ期胚盘切片。经过HE染色,可以观察到鸡胚Ⅹ期胚盘的上下胚层及胚盘下腔,鉴定标记物是否准确注入胚盘下腔中。结果表明利用本方法可以获取完整胚盘各个切面,准确检验胚盘显微注射效果,为改进显微注射方法和提高转基因禽类制备效率提供新的有利途径。     

石蜡切片TUNEL法检测肉仔鸡法氏囊细胞凋亡的条件优化

从蛋白酶K的浓度、DAB显色时间、苏木素复染时间等对采用石蜡切片TUNEL法检测10日龄健康ROSS308肉仔鸡法氏囊组织内细胞凋亡的条件进行了优化。结果表明,TUNEL法最佳条件蛋白酶K浓度为20μg/mL,DAB显色时间为8 min,苏木素复染时间为10 s。优化后的石蜡切片TUNEL法,即60℃烤片5 h,20μg/mL蛋白酶K 37℃消化30 min,DAB显色8 min,苏木素复染10 s时,能特异地显示凋亡细胞为棕黄色,其他细胞核为蓝色,且对比明显,背景浅,组织结构完整清晰。     

A Novel Equine Hoof Lamellar Tissue Biopsy Technique

This study aims to validate the efficacy of a new device specifically developed for equine lamellar biopsy. Nine adult horses were used. Under sedation and digital nerve perineural anesthesia and after keratinized tissue thinning, a sample from the dorsal lamellar stratum was obtained using an instrument called Falcão-Faleiros' lamellotome. Hoof pain sensitivity was evaluated for 60 days, and horses were monitored for 6 months. Lateromedial radiographic images to analyze the spatial relationship between the distal phalanx and the hoof capsule were obtained before and 30 days after the biopsy. The effect of time on the variables was statistically analyzed (P < .05). On average (±SD), the biopsies produced samples that were 2.32 (±0.64) cm in length, 0.48 (±0.09) in width, and 0.51 (±0.11) cm in depth. A mean of 69 of intact primary epidermal lamellae was obtained per biopsy sample. Lameness and sensitivity to hoof testers were evident during the first 4 days postbiopsy but returned to basal levels after the fifth day. Minimal radiographic changes were observed, and the horses completely returned to their regular activities after 60 days. All biopsied hoofs grew normally during the 6-month period, making the dorsal wall defects reach the ground level. The use of the lamellotome for equine hoof lamellar biopsy produced an adequate quality and quantity of tissue for histology and allowed for full clinical recovery of the horses.     

IBD的RT-PCR快速诊断技术的建立

根据已发表的IBDV各致病型毒株的序列,在VP5和VP2的重叠基因区设计合成了一对寡核苷酸引物,对2株参考毒株和8份疑似IBD的临床病料进行RT-PCR检测均得到了明显的阳性扩增结果;而对作为阴性对照的常见4种鸡病病原:鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒、大肠杆菌均没有扩增到任何片段。利用琼脂扩散试验进行IBDV病原常规鉴定,结果证实5份病料呈现IBD阳性。表明建立的IBD的RT-PCR诊断技术具有快速、特异、敏感的特点。     

快速诊断技术在生猪检疫中的应用探讨

生猪检疫工作是食品安全工作的重要组成部分。本文分析了现阶段生猪检疫工作中存在的问题,介绍了快速诊断技术如何从技术层面和实践层面为生猪检疫提供借鉴,建议在生猪检疫中将快速诊断技术进行制度化,并提出了其在生猪检疫中的应用模式。     

应用噬菌体生物扩增技术检测牛结核分枝杆菌的方法研究

建立噬菌体生物扩增技术检测牛结核分枝杆菌试验方法,探讨最佳检测条件。比较各种检测方法对测定结果的影响。结果:噬菌体工作浓度为1×108PFU/ml、37℃感染2h,杀毒剂浓度在100mmol/L、室温作用10min为最佳检测条件。指示细胞浓度在1×106条/ml时,形成噬菌斑清晰,便于计数。结论:在选择最佳测定条件下,噬菌体生物扩增法检测牛结核分枝杆菌,快速、简便、灵敏。     

猪囊虫病快速免疫诊断技术的研究与应用

用纯化的猪囊尾蚴囊液蛋白作诊断抗原,吸附于硝酸纤维素膜片上,经４０％乙醇固定,以斑点酶联免疫吸附法检测猪囊虫病抗体。结果发现：在一抗,二抗和底液中加入１０ｍＭ ＥＤＴＡ,四甲基联苯胺作显色剂,１ｈ内即可完成诊断,并显著提高免疫诊断的灵敏性和特异性。     

Thoracic Ultrasonography Technique in Newborn Calves and Description of Normal and Pathological Findings

The aim of this study was to establish whether thoracic ultrasonography is a viable screening method for detecting respiratory disorders in newborn calves. Thoracic ultrasonography was performed on 66 newborn calves. There were 10 normal control animals with healthy lungs and 56 newborn calves suffering from respiratory disorders such as lung atelectasis, aspiration of amniotic fluid, pulmonary edema, pneumonia, and lung abscesses. Ultrasonography of the lung enabled rapid classification of the severity, extent and type of pulmonary lesion found, thus supplementing the clinical examination. Processes deep to the pleura were not amenable to thoracic diagnosis by ultrasonography. This is due to the inability of sound waves to penetrate normally ventilated lung. Despite this problem, ultrasonography of the lung is suitable for assessment of clinically unclear respiratory disorders in calves.