牦牛粪样中蓝氏贾第鞭毛虫巢式PCR检测方法的建立

采用建立的巢式PCR方法检测了297份牦牛粪样。结果表明:建立的巢式PCR方法一扩的最佳退火温度为55℃,二扩的最佳退火温度为53℃;对牦牛源贾第鞭毛虫的最低检测量为1个虫体DNA/m L;特异性试验表明,对隐孢子虫、弓形虫、柔嫩艾美尔球虫、阿米巴虫、牛巴贝斯虫等寄生虫DNA的扩增均为阴性;297份牦牛粪样中贾第鞭毛虫的检出率为7.4%。表明建立的方法具有较高的敏感性和特异性,可用于牦牛源贾第鞭毛虫感染的检测。     

隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重实时荧光PCR检测方法的建立

本研究根据隐孢子虫和贾第鞭毛虫相对保守序列,设计2对引物及其相应的Taqman探针,通过对引物和探针浓度、Taq酶以及反应条件等优化筛选后,建立了能同时检测隐孢子虫和贾第鞭毛虫的双重实时荧光PCR方法。所建立的隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重荧光PCR检测方法的灵敏度为10-9,相当于46.1copies/!L,重复性好,特异性佳。本研究建立的双重荧光PCR技术,可以快速、准确地于一管一次反应检测隐孢子虫和贾第鞭毛虫。     

斑点免疫结合试验对蓝氏贾第鞭毛虫感染者粪中特异性抗原的检测

应用蔗糖密度梯度离心技术从蓝氏贾第鞭毛虫感染者的粪便中分离纯化贾第虫包囊，以此包囊免疫家兔，获得免疫血清，经大肠杆茵吸收后建立斑点免疫结合试验，检测粪中贾第虫特异性抗原。以此法检测３９例贾第虫感染者粪便，有３６例出现阳性斑点，阳性检出率为９２．３％。以超声粉碎的贾第虫包囊抗原为标准，３６例阳性标本中，有３５例标本贾第虫特异性抗原蛋白含量分布在３９～６９ｎｇ／ｍＬ范围内，１例为１３８ｎｇ／ｍＬ。     

使君子提取物体外抗蓝氏贾第鞭毛虫效果的研究

为了观察中药使君子提取物体外抗蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)的作用效果,试验分别采用乙醇和去离子水对使君子进行提取,得到使君子醇提物和使君子水提物,设置使君子醇提物组、使君子水提物组、甲硝唑对照组(3组各分别设置0.312 5,0.625,1.25,2.5,5 mg/mL5个药物浓度)及空白对照组(TYI-S-33培养基),分别在37℃厌氧培养滋养体浓度为8.0×10⁵～4.2×10⁶个/mL的贾第虫24 h,收集贴壁虫体,计算半数抑制浓度(IC₅₀);用IC₅₀的使君子醇提物、使君子水提物和甲硝唑分别作用于贾第虫,依次培养0,2,4,6,8,12,24 h,同时设空白对照,计算出药物达IC₅₀的最短作用时间;对作用时间分别为6 h和12 h的使君子醇提物组和空白对照组进行倒置光学显微镜、扫描电镜和透射电镜下观察,分析使君子醇提物对贾第虫滋养体超微形态结构的影响。结果表明：三种药液对贾第虫均有一定的抑制作用。使君子醇提物、使君子水提物和甲硝唑的IC₅₀分别为...     

猫贾第鞭毛虫感染的诊治

贾第鞭毛虫病(Giardiasis)是由贾第鞭毛虫(Giardia,简称贾第虫)引起的一种以腹泻为主要症状的肠道疾患。贾第鞭毛虫是世界各地人类和绝大多数动物的肠道内原虫。起初贾第鞭毛虫仅被视为一种共生性的肠道原虫,自1976年以来,由于世界各地相继发生本病,甚至暴发流行,人们才真正认识其致病性。     

青海省海晏县犬粪样中贾第鞭毛虫的检测

从青海省海晏县采集10只牧羊犬粪样用于贾第鞭毛虫检测.所有样品经饱和盐水浓缩法和蔗糖密度梯度离心等方法处理后采用光学显微镜、免疫荧光试验(IF)和套式PCR方法进行检测.结果显示,其中1个样品为阳性(10％),PCR扩增片段长度为274 bp,命名为QHGC201101株.测序结果与肠贾第鞭毛虫3VR株(HQ616609)核糖体小亚基RNA的同源性为100％,表明分离的虫种为肠贾第鞭毛虫,属于人兽共患型病原.     

丙硫苯咪唑对犬贾第鞭毛虫病的疗效

通过３组实验评定丙硫苯咪唑对犬贾第鞭毛虫病的疗效。实验１给犬一次口服丙硫苯咪唑２５ｍｇ／ｋｇ，７只犬有５只的粪便贾第鞭毛虫孢囊被清除（硫酸锌浓度方法确定）。未治疗的７只犬有３只粪便孢囊被清除。实验２给犬口服丙硫苯咪唑２５ｍｇ／ｋｇ，隔１２小时一次，共４次。５只犬的粪便孢囊全被清除，未治疗的５只对照犬，一只犬的粪便孢囊被清除。实验３给犬口服丙硫苯咪唑２５ｍｇ／ｋｇ，隔１２小时一次，共４次，２０只犬中     

蓝氏贾第虫致病机制的研究进展

蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)是一种重要的人畜共患寄生虫,可引起人和多种哺乳动物的腹泻。近年来人们对其致病机制进行了大量研究,包括贾第虫结构蛋白(贾第素)和排泄分泌物,表面抗原变异以及贾第虫对小肠的影响等,本文对此进行了综述。     

宁夏部分地区奶牛贾第鞭毛虫分子流行病学调查

为了明确宁夏地区奶牛贾第鞭毛虫的优势基因型及其流行特征,试验首先于宁夏地区10个规模化奶牛养殖场采集880份奶牛粪便样品,针对贾第鞭毛虫保守基因——β-贾第素(β-giardin, βg)基因序列设计引物,然后以提取的粪便样品全基因组DNA为模板进行巢式PCR,将PCR产物的测序结果进行BLAST比对分析,鉴定贾第鞭毛虫的基因型,并建立系统进化树,最后对宁夏地区不同城市、不同月龄及腹泻和非腹泻奶牛粪便样品的感染阳性率和基因型进行统计。结果表明：880份粪便样品中,有145份样品扩增到大小为510 bp的条带,贾第鞭毛虫感染阳性率为16.5%(145/880),其中集聚体A的占比为1.4%(2/145),集聚体E的占比为98.6%(143/145);所有集聚体A的βg基因为1种序列(已上传至GenBank,登录号为OQ101261 1NX),所有集聚体E的βg基因为4种序列(已上传至GenBank,登录号分别为OQ101262 2NX、OQ101263 3NX、OQ101264 4NX和OQ101265 5NX);OQ101261 1NX(奶牛)与MK5773339.1(藏牛)、MF49...     

嗜水气单胞菌检测技术研究进展

嗜水气单胞菌是重要的水生动物病原菌,也是重要的人兽共患病原菌。近年来,其检测技术取得了迅速发展。论文对嗜水气单胞菌的检测技术进行了综述,并对其检测新策略进行了展望。     

流感病毒检测方法研究进展

近些年,流感在全球范围的频繁暴发,使科研工作者关注的焦点转移到对流感病毒进行方便、快速、准确的鉴定上.论文介绍了国内外流感病毒的检测方法,重点介绍了免疫学检测方法,尤其是酶联免疫法和胶体金免疫标记法.通过对各方法优缺点的比较,提出了免疫学检测方法在方便、快速检测流感病毒方法中的特有优势,尤其是胶体金免疫标记法和酶联免疫...     

蜡样芽孢杆菌检测方法研究进展

蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的常见食源性细菌,属于革兰氏阳性的条件致病菌,广泛存在于土壤、空气、水及植物源、动物源加工的食品中。近年发现也能感染包括人在内的多种动物,是一种人兽共患性细菌,特别是能够引起人畜肠道疾病,导致腹泻型或呕吐型食物中毒。快速准确检测蜡样芽孢杆菌是控制其污染和感染后治疗的关键环节。作者对蜡样芽孢杆菌的检测方法进行了全面详细的总结,主要包括传统检测方法、普通PCR、多重PCR（mPCR）、实时荧光定量PCR（Real-time PCR）、叠氮溴化丙锭-定量PCR（PMA-qPCR）、微滴数字PCR技术（ddPCR）、环介导等温扩增（LAMP）及酶联免疫吸附测定（ELISA）。从传统方法到新兴技术,涉及传统检测技术、分子生物学检测和免疫学检测技术,作者主要总结了各方法的原理、检测范围,并对各方法的优缺点进行了比较。这些检测方法的灵敏度、精确度、样本要求等有所不同,可根据检测需要和条件限制进行选择。将分子生物学方法和免疫学等方法有效地结合起来,多角度多层次地对样品进行检测,可全面而准确地呈现检测结果。蜡样芽孢杆菌能产生多种毒素,这些毒素决定了其致病性,所以除了检测菌体外,还可以对毒素进行检测,有助于确定病原及其致病力。总的来说,蜡样芽孢杆菌对人畜的健康安全均构成了威胁,快速准确地检测能有效辅助治疗和提前预防,作者将主要检测方法进行了总结,希望能有助于全面准确地评估蜡样芽孢杆菌的风险,为主动监测和预警提供科学依据。     

禽流感病毒检测方法研究进展

禽流感病毒由于亚型众多,且各亚型之间无交叉反应性,这使得禽流感病毒的检测工作较为困难.目前,传统的禽流感病毒检测方法主要是病毒分离和血清学方法.而分子生物学检测方法因其具有更加灵敏、特异、快速等特点,成为了当前禽流感病毒检测方法的主要发展方向.同时,人们也正致力于将一些新兴的检测方法应用到禽流感病毒的检测中来.论文就近年来禽流感分子生物检测方法和这些新兴检测方法的研究进展做一综述.     

真菌性皮肤病检测方法研究进展

真菌性皮肤病是一种传染性极强的接触性人兽共患皮肤病,该病能给宠物和人类健康带来严重危害。迄今为止,宠物皮肤真菌病的检测仍以病原学方法为主。近年来,随着宠物皮肤真菌病免疫学和分子生物学研究的深入,其独特的优势显示了其在未来控制宠物皮肤真菌病中的诱人前景,为该病的诊断和防控带来了希望。该文就宠物皮肤真菌病的流行病学和诊断学等方面的研究进展做了综述,并指出了尚未解决的问题。     

玉米赤霉烯酮检测方法研究现状

玉米赤霉烯酮是一种常见的饲料霉菌毒素,是世界范围内污染农作物最严重的霉菌毒素之一.当畜禽采食了被玉米赤霉烯酮污染的饲料后,会对机体造成生殖毒性、肝肾毒性、细胞毒性、免疫毒性,甚至还可在机体组织中残留,通过动物性食品危及人类的健康,所以,精准的检测出饲料及饲料原料和食品中玉米赤霉烯酮毒素含量,对于保证食品安全具有重要的意...     

产志贺毒素大肠埃希菌检测方法研究进展

产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)是重要的人兽共患病病原菌之一,能产生强烈毒素并引起多种畜禽疾病.目前,包括O157∶H7在内的STEC所引起的感染在多个国家暴发与流行,给畜牧养殖业带来巨大损失.为了系统了解STEC的检测方法,论文就传统检测方法、免疫学方法及分子生物学方法,诸如山梨醇麦康凯琼脂法、MUG试验、酶联免疫吸附法、聚合酶链反应、基因芯片、环介导等温扩增法及其他各种检测技术进行了综述.     

隐孢子虫检测方法研究进展

隐孢子虫是一种能引起人、畜和野生动物共同感染的原虫.由于隐孢子虫卵囊很小,在光镜下观察缺乏明显的特征,检测比较困难,为寻找高效的检测方法,国内外学者在隐孢子虫检测方面进行了大量的研究.文章综述了近年来用于检测隐孢子虫的主要方法,并初步分析了各种方法的 优、缺点.