生长激素作用的分子机制

生长激素(Growth hormone简称GH)是垂体前叶合成和分泌的一种多肽激素,由垂体前叶合成和分泌的一种多肽激素.它是由垂体嗜酸性细胞产生的. 制备GH一般用牛、羊、猪等动物的垂体,通过硫酸铵沉淀,二乙氨乙基——纤维素层析纯化获得GH,一般得量较少.这种精制的GH均为一种不含糖的单链多肽,由190～191个氨基酸组成.有两个二硫键形成稳定的分子结构,分子量为2100～2200道尔顿.它的生物学功能是促进动物生长发育,促进蛋白质、核酸的合成,增加体重,增加毛量,抵制葡萄的氧化,动用脂肪组织释放出脂化的脂肪酸到血液中去,即脂肪的分解,增高血糖,促进碳水化合物的代谢,有调控代谢的作用.由于社会的发展,人们生活不断提高,对原先从动物垂体中提抽纯化GH已不能满足人们的需求,必须改变生产方式,动用现代基因工程技术,合成基因,扩大生产,满足人们日益增长的需要.     

牛生长激素(BGH)基因的研究进展

对牛生长激素的基本特征、基因的结构、同源性与产奶性能的关系及其多态性作了一系列的阐述,并对今后的研究方向作了展望.     

Ghrelin--一种新发现的生长激素释放肽

Ghrelin是一种新发现的含有28个氨基酸的生长激素释放肽,为生长激素促分泌素受体(Growthhor-monesecretagoguereceptor,GHS-R)的内源性配体。当Ghrelin与其特异性受体(GHS-R)结合后会产生一系列生物学效应。Ghrelin具有刺激垂体前叶释放生长激素、增加食欲、调节能量代谢平衡以及促进胃酸分泌等生物学功能,其作用机理目前尚不清楚。     

香猪生长激素基因不同基因型对生长性能的影响

利用PCR-RFLPs技术,检测香猪生长激素基因ApaI酶切位点多态性,并分析不同基因型对个体初生重、2月龄体重、4月龄体重、平均日增重、4月龄体长和4月龄胸围等生长性能的影响。结果表明,香猪生长激素基因ApaI酶切后产生3种基因型和2种等位基因,AB基因型和AA基因型香猪的4月龄体重、0￣4月龄平均日增重均极显著地低于BB基因型香猪(P<0.01),4月龄体长也显著低于BB基因型香猪(P<0.05),提示AB和AA基因型可能是香猪矮小性的有利基因型。     

鸡生长激素cDNA及其5'端调控区的克隆分析

从肉用品种鸡构建的垂体文库中克隆分离了鸡生长激素ｃＤＮＡ,并作了核苷酸序列测定。克隆的鸡生长激素ｃＤＮＡ序列全长为７８９个碱基对,其中５＇非转译区为４０个碱基对,３’非转译区为１０１个碱基对,编码区为６４８个碱基对。通过序列比较分析,克隆的鸡生长激素ｃＤＮＡ序列与已报道的蛋用品种鸡生长激素ｃＤＮＡ序列的同源性为９６％,与鸭生长激素序列的同源性为８７％,但与火鸡生长激素序列的同源性只有５２％。通过ＰＣＲ技术,本研究还扩增了６个鸡品种的生长激素基因５’端调控区。尽管这些鸡品种的生产性能差异显著,但序列分析表明鸡生长激素基因５’端调控区十分保守。因而,鸡生长激素基因表达的差异可能受到内含子或３’端侧翼序列的影响。另外,鸡生长激素对多人数量性状的影响也在本文中进行了讨论。     

生长素和细胞分裂素在马铃薯愈伤组织分化中的作用

以晋薯7号马铃薯茎尖、茎段、叶圆片为外植体,通过愈伤组织的诱导和根、不定芽的分化,研究生长素和细胞分裂素不同配比在马铃薯愈伤组织分化中的作用。试验结果表明:6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂有利于茎段愈伤组织的生长,MS+6-BA 2.0 mg/L+ZT 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L+GA35.0 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂有利于茎尖不定芽的分化,MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5mg/L+GA35.0 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂对叶片根的分化效果较好。     

长江刀鲚 GHRH基因遗传多态性及其与生长性状的关联分析

生长激素释放激素（GHRH）是鱼类生长激素合成和分泌的重要调控因子,对细胞的生长、增殖和分化极为重要。基于长江刀鲚转录组测序数据,利用基因克隆和PCR扩增技术,获得其 GHRH基因的cDNA全长和基因组DNA序列,并开展基因遗传多态性与生长性状的关联性研究,为其分子标记辅助育种提供技术支持。结果显示：长江刀鲚 GHRH基因cDNA全长1 329 bp,由5′-UTR（300 bp）、ORF（465 bp）和3′-UTR（564 bp）组成,推导的蛋白序列由154个氨基酸组成,具有一个信号肽和GLUCA结构域;该基因的DNA序列长2 983 bp,由4个内含子和5个外显子组成,经筛选,在第1、2内含子和第3外显子上分别筛选到9、2和1个SNP位点;12个突变位点共36种基因型,分别与100尾长江刀鲚的体质量、体长和体高性状进行关联分析,获得2个与其生长性状显著相关的位点（g.1636C>T和g.1882A>C）（P<0.05）,CC基因型均是优势基因型;利用12个SNP位点分析刀鲚养殖群体的遗传多样性,获得的观测杂合度（HO）、期望杂合度（HE）和多态信息含量（PIC）分别为0.270~0.620、0.338~0.490和0.281~0.370;哈迪-温伯格平衡（HWE）检测结果显示,12个SNP位点中有4个位点显著偏离哈迪-温伯格平衡（P<0.05）。结果表明,长江刀鲚 GHRH基因上位点g.1636C>T和g.1882A>C可以作为优选长江刀鲚繁育亲本的重要候选分子标记。     

不同激素配比对辣木组培苗生长的影响

以辣木嫩梢茎段为外植体,在25种不同激素配比的培养基上进行培养,探讨不同激素配比对辣木组培苗生长的影响,并在6种不同生根培养基上进行生根试验。研究结果表明:在MS+6-BA0.02～0.5mg.L-1+NAA0.02mg.L-1+蔗糖3%的培养基上辣木组培苗生长良好,增殖倍数达5.6～8.1。在1/2MS+NAA0.2mg.L-1+蔗糖2%的培养基上生根率最高达79%。用形态学上端朝上与朝下两种方式接种到生根培养基上均能在形态学下端生根。     

禽类生长激素受体基因研究进展

生长激素受体(GHR)是促乳素、生长激素、细胞因子、促红细胞生成素受体超家族成员之一,它与生长激素(GH)结合可对禽类生长发育起到调节作用.目前有关禽类GHR的研究多集中在正常鸡和矮小禽类之间GHR的变异上.本文就鸡GHR基因结构与表达、多态性与生产性能的相关等研究进行了综述和讨论.     

生长激素释放肽的研究进展

生长素释放肽（GHRPs）依据蛋氨酸-亮氨酸脑啡肽（met-enkephalin）的结构于20世纪70年代末首次合成以来,人们又陆续合成了数种类型的GHRPs,虽然其结构已远不同于met-enkephalin的结构,但均可强烈刺激生长素（GH）分泌。GHRPs在动物体内具有促进GH 释放、刺激动物食欲、促进动物生长、提高动物生产性能和免疫水平等多方面的功能。     

猪GH基因全序列PCR-RFLPs研究

实验利用PCR-RFLPs技术分析了大约克猪和长白猪GH基因的BstⅪ和HhaⅠ两种内切酶酶切位点多态性。结果表明,在所检约克夏猪和长白猪两个品种中,pGH基因全序列内仅有1个BstⅪ酶切位点,未发现BstⅪ酶切位点多态性;pGH基因全序列中存在丰富的HhaⅠ酶切位点多态性,约克夏猪中有10种带型,长白猪中检出了8种带型,其中B带型频率最高,长白猪中为41 67%,约克夏猪中占31 11%,二者差异极显著(P<0 01)。其他各带型频率分布在两品种间差异不显著。     

宁强矮马生长激素基因（GH）的遗传变异分析

 【目的】通过分析不同动物和中国几个地方马种生长激素基因序列,为宁强矮马起源和矮化形成机制的研究提供分子水平的试验依据。【方法】通过PCR扩增宁强矮马生长激素基因并进行测序,用DNAMAN软件对不同动物的生长激素基因序列进行比对分析。【结果】马品种间29个位点发生遗传变异,编码区11个位点发现遗传多态现象。以蒙古马生长激素氨基酸序列为标准,宁强矮马仅在1 765位点的变异导致氨基酸发生改变。以生长激素的mRNA序列为基本数据进行聚类分析,宁强矮马和德保马67的同源性为100%,与百色马的同源性为99.8%,与蒙古马的同源性为99.7%。【结论】马属动物生长基因序列与猪和狗的同源性较高,宁强矮马1 765位的G→A可能影响到宁强矮马的生长发育。     

驴生长激素基因序列初步分析

通过对驴(Equus asinus)GH基因序列进行生物信息学分析,结果表明,驴GH基因共包含5个外显子和4个内含子。5个外显子连接形成651 nt的CDS区序列,整个CDS区翻译出216个氨基酸构成的多肽。驴GH基因编码的216个氨基酸中,大多数氨基酸为亲水性氨基酸。原始肽链的前20多个氨基酸序列出现一个典型的疏水峰,为该原始肽链的信号肽片段。驴的GH基因中的氨基酸以亮氨酸所占的比例最高(13.89%,共出现30次),其次为丙氨酸(10.19%,共出现22次),最低的为色氨酸(0.93%,共出现2次)。驴生长激素的编码存在明显的密码子使用偏好。     

生长激素基因多态性与滩羊生长性状关联性研究

[目的]探讨生长激素基因多态性与滩羊生长性状关联性,以提高滩羊整体生长速度和经济效益。[方法]选取69只宁夏滩羊为研究对象,运用PCR-RFLP技术,对已证实控制绵羊生长速度的主效基因生长激素（GH）基因进行检测,统计各基因型与滩羊初生重、二毛重、3月龄及6月龄体重之间的关联性。[结果]共检测到2种GH基因型,即AB和BB型,基因型频率分别为0.3481和0.6519,A等位基因频率为0.1811,而B等位基因频率为0.8189。通过关联性统计分析,AB基因型与滩羊生长性状的关联性达到极显著水平（P〈0.01）。[结论]AB基因型是影响滩羊生长速度的优势基因型。     

水貂生长激素cDNA的克隆与序列分析

从水貂脑垂体中分离提取总RNA，经过RT—PCR分别扩增出水貂生长激素前体肽和成熟肽cDNA。PCR产物经凝胶回收纯化，克隆到栽体pGEM—T，然后转化感受态细胞DH5α。在含X—gal、IPTG的LB(Amp^ )平板上筛选阳性克隆，提取质粒作限制性酶切鉴定后，对目的片段进行测序。结果表明，RT—PCR扩增出的2个cDNA片段碱基数分别为713bp和780bp，用DNAsis2．5软件进行分析表明，此扩增序列与GenBank中发表的水貂生长激素cDNA100％相同。前体肽编码区由651bp组成，编码216个氨基酸，包括长度为29个氨基酸的信号肽；成熟肽的开放阅读框全长564bp，编码187个氨基酸，分子量约为21kDa。通过Blast比对，分析了与人、马、牛、猪、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠和小鼠生长激素核苷酸序列的同源性。     

植物激素对百合鳞片愈伤组织生长的影响

在植物细胞全能性学说的基础上 ,采用单因子实验 ,分析比较了细胞分裂素 6- BA,生长素 2 ,4 - D,生长素 NAA等 3种植物激素对路易圣特百合鳞茎愈伤组织生长的影响。实验结果表明 ,诱导愈伤的最佳培养基为 MS+6- BA( 0 .0 5mg.L-1) +2 ,4 - D( 1.0 mg.L-1) +NAA( 0 .1mg.L-1) ,6- BA的质量浓度为 1.0 mg.L-1时有利于芽的形成 ,NAA质量浓度为 0 .0 5mg.L-1时有利于形成小鳞茎     

加工番茄亲代与子代生长期内源激素含量与植株生长相关性分析

[目的]研究加工番茄亲代与子代在不同生长时期叶片内源激素含量与植株生长指标的相关性,分析内源激素对植株生长发育的影响,为杂交育种中亲本的选择和选配、杂交后代的选育提供理论参考.[方法]以亲本T59、JW9、HZ38为参照,经系统选育获得的高代自交系Dg46-1和Dg149-1为试材,测定加工番茄不同生育时期植株叶片生长...     

水貂生长激素基因重组腺病毒的构建

本研究利用AdEasyTMXL腺病毒载体系统构建了水貂生长激素基因重组腺病毒。利用PCR、酶切、凝胶回收等方法,从质粒pCMVmGH中获得水貂生长激素基因(mGH),构建穿梭质粒pShuttle-CMV-mGH。pShuttle-CMV-mGH经PmeⅠ酶切线性化后转化至BJ5183感受态大肠杆菌内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,构建重组腺病毒质粒pAd-CMV-mGH。重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD-293细胞。PacⅠ酶切结果表明质粒重组成功。转染第10天,细胞出现圆缩、死亡、漂浮等典型病变,透射电镜检测到重组病毒。TCID50测得第2代重组病毒的滴度达到10-7.89/0.1ml。RT-PCR结果证实,重组病毒能够正确转录目的基因。结果表明本试验成功构建了水貂生长激素基因重组腺病毒,为水貂促生长的研究提供了新的科学手段。     

5个鸭品种生长激素基因座位遗传多态性检测

应用PCR-SSCP技术首次分析5个品种鸭生长激素基因座位5'端调控区、外显子与部分内含子和3'端调控区中的多态位点,对具有多态性的位点进行测序,以探讨鸭生长激素基因遗传变异情况,比较不同品种该基因座位遗传多样性差异.结果在5个品种鸭中共检测到5个多态位点,多态位点频率在5个不同品种鸭中存在明显差异.序列比较分析结果表明:鸭生长激素基因座位5'端与3'端调控区和外显子序列具有极高的保守性,在5个鸭品种间不存在任何差异,所测出的序列与已知鸭GH序列相应部分完全一致.检测出的6处突变点(包括4个替换、1个插入和1个缺失)均位于内含子区域.推测鸭生长激素基因表达差异可能受内含子序列影响.     

驴生长激素基因的克隆与分析

 【目的】克隆驴生长激素基因DNA和cDNA的全序列,分析其序列和cDNA编码的蛋白序列特征及其在不同物种中的遗传差异。【方法】根据不同物种同一基因序列的同源性比对结果设计引物,应用RT-PCR和PCR 技术克隆基因,用生物信息学方法对获得的DNA和cDNA及推定的氨基酸序列进行分析。【结果】从驴肝组织和血液中分别得到驴GH基因全序列1 928 bp和包括完整的编码区的cDNA序列706 bp,两者序列比对后证明驴GH基因DNA序列由5个外显子和4个内含子组成,编码216个氨基酸的GH前体蛋白,其中包括26个氨基酸的信号肽和190个氨基酸的成熟肽。序列比较结果表明,驴GH基因的序列与马同源性最高,启动子不是哺乳动物的典型TATA盒,而是CATA盒,该基因在进化过程中是保守的。【结论】从驴肝组织和血液中克隆了GH基因DNA和cDNA,DNA序列在1 267位的C→G可能影响到驴和马生长发育的差异,为下一步驴GH基因的表达调控、进化和多态性分析奠定了基础。