酵母固态发酵过程中营养物质变化的研究

以秸秆、豆粕、酒糟、淀粉等农副产品为基质,酵母菌为试验菌株,采用固态发酵的技术,对其发酵过程中的酵母菌数和营养物质进行分析测定。结果表明:①酵母固态发酵过程中随着时间的延长,酵母菌数呈现上升趋势,32~48 h趋于稳定,48 h后开始下降;②随着发酵时间的延长,总酸和低分子肽含量逐渐上升,pH值和还原糖含量呈现下降趋势;③经过固态发酵之后,反应物分子量90~66 kD的蛋白质几乎已经全部降解。粗蛋白含量比发酵前提高了27.2%,其他饲料成分也有了不同程度的提高。     

酵母培养物添加剂固态发酵的研究

近些年,酵母培养物已越来越受到国内外饲养业的重视,许多国外产品(如益康XP、Yea Sall等)已进入我国,但价格十分昂贵,约是我国同类产品的10倍.近几年来,我国酵母饲料工业发展也十分迅速.如何提高酵母培养物的作用效果,并降低其生产成本,是目前亟需解决的问题.研究利用酿酒酵母在自行配制的培养基上进行固态发酵,通过对发酵工艺、特殊培养基的配制、营养活性物质含量测定、生产试验等内容的研究,研制作用效果好、价位低的酵母活性物质,从而更好地为生产服务.     

酵母培养物固态发酵条件的研究

试验采用单因素筛选试验对酵母菌固态发酵处理玉米秸秆等农副产品制备酵母培养物的发酵条件进行了研究。结果表明,酵母培养物的适宜固态发酵条件为接种量0.10%、含水量50.0%、培养温度28℃和培养时间48 h。经过固态发酵能够明显改善酵母培养物的营养价值。     

内毒素对山羊红细胞膜Ca2+-ATP酶及红细胞内和血清中Ca2+离子浓度的影响

内毒素血症中自由基生成增多。自由基可攻击酶活性部位，使酶蛋白发生结构重构，形成新的聚合物，使原来酶活性丧失或改变。Ca^2＋-ATP酶是红细胞膜上的蛋白之一。Ca^2＋是细胞内第二信使，在细胞外信号传递以及放大过程中起着重要的作用。     

红酵母固态发酵增色饲料的工艺研究

利用熵值法求权重与响应面分析法对红酵母固态发酵增色饲料的生产工艺进行了优化研究。在单因素试验、Box-Behnken试验设计基础上,以发酵饲料中蛋白含量及其增加率、类胡萝卜素含量的综合评价值为响应值,利用响应面法研究培养基组成、料水比、发酵时间、接种量和发酵温度及其交互作用对红酵母菌株产蛋白和类胡萝卜素的影响,建立预测模型,优选出最好的工艺条件。结果表明:当15%为接种量,28℃为发酵温度,料水比(m:m)(龙虾配合饲料:水)=1:1,3 d为发酵时间,蚕蛹7.5%、花生饼20%、鱼粉20%、米糠22.5%、麦麸30%为培养基组成时,该菌株产蛋白最高量为2.245 mg/g,类胡萝卜素含量为240.63μg/g干基。比优化前饲料的蛋白含量与类胡萝卜素含量0.926 mg/g和174.07μg/g干基,分别提高了142.44%和38.24%,综合提取效果值为87.76。验证试验表明本试验建立响应模型较成功。     

酵母固态发酵仔猪配合饲料的工艺研究

为研究酵母固态发酵仔猪配合饲料(551H与552H)的工艺(简称SF-551H和SF-552H),以蛋白含量及其增加率为主要指标,分别对各工艺参数进行多水平7×2(发酵时间t)、4×2(固态培养基组成R)、5×2(发酵温度T)及5×2(接种量I)试验设计及响应面优化试验。结果表明,工艺参数对产品的蛋白含量及其增加率影响显著(P0.05);确定参数的水平:SF-551H,12≤t≤24 h、1.5≤R≤4、25≤T≤32℃、3%≤I≤15%;SF-552H,12≤t≤40 h、1.5≤R≤4、25≤T≤30℃、3%≤I≤15%.二次响应面回归模型预测最佳工艺参数为:SF-551H,t=24 h,R=2.75,T=32℃,I=3%;SF-552H,t=40 h,R=2.125,T=27.5℃,I=3%,且验证可行(P0.05)。因此,该研究结果将为工业化酵母固态发酵仔猪配合饲料的工艺提供试验与理论支撑。     

不同浓度Ca2+、Mg2+、Fe2+、Zn2+对紫花苜蓿生长的影响

以紫花苜蓿金皇后为材料,采用温室盆栽的方法对其在不同浓度Ca2+、Mg2+、Fe2+、Zn2+下的生长及结瘤情况进行探讨,结果表明:不同浓度不同离子对紫花苜蓿地上生物量及结瘤情况影响各有不同,其中Ca2+浓度为90mg/L时植株结瘤数目最丰,促进植株结瘤的作用最为明显;Mg2+浓度80mg/L时植株根冠比最大,为41.56％;Fe2+对植株结瘤数与蛋白质含量的影响作用最不明显,浓度为15mg/L时植株地上生物量干重为0.41g/株,增产作用优于Ca2+和Mg2+;Zn2+浓度为2.0mg/L时地上生物量干重(0.56g/株)和粗蛋白质含量(18.78％)均最高,对植株产量增加与蛋白质含量累积作用最为显著.     

玻璃化冷冻对哺乳动物卵母细胞Ca2+的影响机制

卵母细胞冷冻保存是胚胎生物技术(如体外受精、胞浆内单精子注射、体细胞克隆)的重要组成部分,对优良种畜和濒危动物种质资源保存,加速家畜品种改良进程都具有重要意义。与常规冷冻法相比,玻璃化冷冻具有操作简单、降温速率快、耗时短、冷冻效率高等优点,被越来越广泛地应用于家畜卵母细胞的冷冻保存。然而,与新鲜卵母细胞相比,玻璃化冷冻卵母细胞的受精率及发育能力仍不理想,这严重影响了玻璃化冷冻卵母细胞的应用潜力。玻璃化冷冻会引起卵母细胞Ca²⁺浓度升高及钙振荡模式异常,导致其透明带硬化、受精信号紊乱等问题。综合前人研究进展,作者分析了玻璃化冷冻对胞内Ca²⁺浓度、钙振荡模式的影响和作用机制,并指出胞外Ca²⁺内流和胞内钙库Ca²⁺释放是导致冷冻卵母细胞胞内Ca²⁺浓度升高的主要原因,1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)Ⅰ型受体分布异常和线粒体损伤可能是导致冷冻卵母细胞钙振荡模式异常的重要原因,以期为正向调控冷冻卵母细胞Ca²⁺浓度及钙振荡模式提供技术参考,从而进一步提高玻璃化冷冻卵母细胞的受精和后续的发育能力。     

酵母菌固态发酵马铃薯渣的研究

试验以马铃薯渣为底物,选用玉米面和麦麸为辅料,以无机氮源为添加剂,采用单一菌种酵母菌对添加不同辅料的马铃薯渣混合料进行固体发酵。结果表明,随发酵时间的延长以玉米面和麦麸为辅料进行发酵水分含量均显著降低(0.05);麦麸组蛋白质含量显著提高,72 h内与时间有着极显著相关性(0.05);酵母菌发酵对混合料纤维素含量没有显著影响(0.05);糖含量均呈先升后降趋势。综合试验结果表明,马铃薯渣添加辅料后降低含水量、利于运输,方便应用;综合营养指标看以麦麸为辅料发酵效果优于玉米面组,操作方法简单,适于大规模推广应用,为开发利用新资源提供新的途径。     

乳酸发酵中添加蛋壳粉为钙源的研究

在乳酸发酵中添加蛋壳粉、CaCO3、CaHPO4、Ca3(PO4)2，并以乙二胺四乙酸二钠容量法检测其中Ca^2 含量。结果表明，各种钙源均要在不同程度上提高发酵液中的Ca^2 含量，其中添加CaCO3后发酵液的Ca^2 含量达到最高，蛋壳粉次之，且蛋壳粉对发酵液中Ca^2 的相对增值最显著。同时发酵液中pH及Ca^2 含量在发酵过程中呈现出动态变化，Ca^2 含量还与发酵温度有关。     

爱普里诺霉素对N2a细胞增殖的影响

阿维菌素类药物是大环内酯类化合物,被广泛用于人和动物的抗寄生虫药物。爱普里诺霉素(eprinomycin,EPR)属于AVMs家族。论文检测了EPR对细胞的增殖、存活和细胞周期的影响。结果发现,EPR都能显著抑制神经细胞鼠成神经瘤细胞N2a的增殖,并呈浓度相关性,EPR可使N2a细胞周期阻滞在G1期和G2期,但未发现明显的细胞凋亡。     

高产蛋白酶酵母菌固态发酵豆粕的工艺优化

本试验研究了高产蛋白酶酵母菌在不同条件下对发酵豆粕品质的影响。以蛋白酶活性为指标,对豆粕发酵的时间、含水量、菌液接种量和葡萄糖添加量进行优化,根据单因素试验结果设计正交试验,探究高产蛋白酶酵母菌发酵对豆粕中蛋白酶、纤维素酶、植酸酶、果胶酶活性和粗蛋白质、小分子多肽、胰蛋白酶抑制剂含量的影响。结果表明,单因素试验条件下,分别在含水量50%、菌液添加量4%、葡萄糖添加量1.5%时发酵豆粕具有最高的蛋白酶活性。以单因素试验结果设计正交试验,与对照组相比,9个试验组蛋白酶活性增长100.56%~380.13%、纤维素酶活性增长2.67%~81.77%、植酸酶活性增长53.89%~252.81%、果胶酶活性增长13.84%~70.83%、小分子多肽增长574.67%~1 981.08%、粗蛋白质含量增长9.24%~16.49%、胰蛋白抑制剂含量降低7.36%~67.39%。高产蛋白酶酵母菌发酵豆粕可以显著提升其营养价值,降低抗营养因子含量。使用高产蛋白酶酵母菌对豆粕进行发酵,若需要发酵豆粕中水解酶活性最高,发酵条件为葡萄糖1%、混合菌液2%,含水量45%,在室温下发酵5 d;需要粗蛋白质、多肽含量以及胰蛋白酶抑制剂降低率最高时,发酵条件为葡萄糖2%、混合菌液4%,含水量55%,在室温下发酵5 d。     

FSH通过cAMP、Ca~(2+)调节仔猪睾丸支持细胞的增殖

本研究旨在阐明FSH调节睾丸支持细胞增殖的机制。试验以2～3周龄的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,采用体外培养模型,通过细胞数量检测、ELISA和Western blot等方法研究FSH对睾丸支持细胞的调节作用。试验结果如下:(1)在0～50ng·mL-1内,随着FSH浓度的增加,睾丸支持细胞数量呈增加的趋势(P0.05);当浓度为50ng·mL-1时,FSH促增殖作用最明显;细胞内cAMP的浓度也随着FSH的浓度而增加(P0.05);(2)FSH作用后5min内就激活了ERK1/2级联反应,在48h内,ERK1/2的激活有一定的周期性;加入ERK1/2的抑制剂PD98059和U0126明显的降低了FSH诱导的睾丸支持细胞的增殖和PCNA的表达(P0.05);(3)加入FSH和Forskolin增强了细胞的增殖和ERK1/2的激活(P0.05);而加入Rp-cAMP则明显降低了FSH诱导的细胞增殖和ERK1/2的激活(P0.05);L-Ca2+通道抑制剂Verapamil抑制了细胞的增殖和ERK1/2的激活;Rp-cAMP与Verapamil共同作用强于单独作用,表现出一定的协同效应(P0.05)。结果表明,FSH通过cAMP、Ca2+激活ERK1/2,并通过ERK1/2调节PCNA的表达进而调节支持细胞的增殖。     

中药复方对H9N2亚型禽流感病毒在MDCK细胞增殖的作用

为了筛选对H9N2亚型禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）有独特防治效果的中药复方,本试验基于禽流感发病临床症状、结合中药复方用药基本原则,组方芩根提取液（Qingen extract,QG）,以奥司他韦（达菲,DF）为阳性对照药,通过研究药液对神经氨酸酶（neuraminidase,NA）的抑制作用,采用CCK-8法测定药液对犬肾上皮细胞（MDCK）毒性作用,并从病毒吸附、增殖和灭活3个方面做了药效评价。结果表明,QG对NA的抑制作用在一定浓度范围内呈浓度依赖性增高,半数抑制浓度（IC₅₀）约为1 130 μg/mL;QG和DF的最大安全浓度分别为2 500和500 μg/mL,H9N2 AIV的TCID₅₀为10^-4.36/100 μL;QG浓度为156.25~2 500 μg/mL范围内,对H9N2 AIV的病毒毒力有一定抑制作用,并在MDCK细胞上呈现出一定的抗吸附、抑制病毒复制作用。表明QG在对抗H9N2 AIV的NA活性、抑制H9N2 AIV吸附靶细胞和在细胞内复制有一定的作用。     

赭曲霉毒素A对IPEC-J2细胞生长和氧化还原平衡的影响

实验以IPEC-J2细胞为材料,研究不同浓度和时间处理下赭曲霉毒素A(OTA)对仔猪空肠上皮细胞增殖存活的影响,并进一步考察不同浓度OTA对细胞的结构功能完整性和抗氧化防御系统的影响。结果表明:OTA暴露时间和浓度对细胞存活率均有影响(P<0.01),且二者存在显著交互效应(P<0.01)。在OTA暴露24 h条件下,细胞钠钾ATP酶(Na+,K+-ATPase)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽S转移酶(GST)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)随OTA浓度增加呈线性或者二次曲线降低(P<0.01),过氧化氢酶(CAT)活性有降低趋势,丙二醛(MDA)含量呈线性增加(P<0.05);胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性随OTA浓度增加呈线性或者二次曲线增加(P<0.01);OTA处理对超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显影响(P>0.05)。结果显示,OTA破坏了IPEC-J2细胞的结构功能完整性,最终导致细胞的增殖或存活率降低,氧化应激可能是毒性效应发生的重要机制。     

低氧对牛体细胞体外增殖的影响

本研究通过比较常氧(20%)和低氧(5%)环境下培养牛体细胞的生长效果,进而探讨低氧对牛体细胞体外增殖的影响。选用牛的3种常用核移植供体细胞(胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞、卵丘颗粒细胞)分别在常氧和低氧2种培养环境下进行连续传代培养和细胞克隆培养,并对其倍增水平和细胞克隆形成效率作比较分析。结果显示,5%的低氧环境对这3种细胞的体外增殖均有促进效果,而且各细胞的增殖水平(50.61±2.47、16.35±0.43、43.38±0.84)均显著高于常氧组(27.42±0.23、12.14±0.83、32.76±1.53,P<0.01)。以500个·皿-1(直径100mm)的细胞浓度接种培养的情况下,低氧培养的胎儿输卵管上皮细胞的克隆形成效率((53.05±4.62)%)显著高于常氧组((36.68±5.68)%)(P<0.01),而低氧组胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞获得的细胞克隆数只是略多于常氧组,差异并不显著(P>0.05)。当以1个.孔-1的细胞浓度接种于96孔板培养时,低氧组各类细胞的单细胞克隆形成效率((21.60±2.37)%、(22.29±5.42)%、(27.92±3.69)%)显著高于常氧组((12.01±1.42)%、(7.92±2.86)%、(10.49±3.07)%)(P<0.01或P<0.05)。将体外培养条件的常氧含量(20%)调减至更接近体内生理状况的低氧含量(5%)可以延长牛体细胞增殖寿命和提高单细胞克隆形成效率,对细胞生长有很好的促进作用。     

高精料条件下酵母培养物对混合瘤胃微生物体外发酵的影响

采用山羊瘤胃液的体外批次培养研究了酵母培养物对混合瘤胃微生物体外发酵的影响。发酵底物精粗比为7：3,酵母培养物添加量为0、0．75g／L、1．5g／L、2．25g／L。结果表明,发酵各时间点,各处理组的pH值较对照组均显著降低（P〈0．05）。与对照组相比,发酵24h、36h、48h时,各处理组氨氮浓度显著降低（P〈0．05）,2．25g／L处理组的TVFA浓度显著升高（P〈0．05）。各时间点,三个处理组的乙酸浓度与对照组相比差异均不显著,而发酵24h、48h时,三个处理组的丙酸浓度均高于对照组（P〈0．05）。发酵24h、48h时,1．50g／L处理组的乙丙比较对照组显著降低（P〈0．05）。在整个发酵期内,1．50g／L、2．25g／L处理组的累积产气量均显著高于对照组（P〈0．05）,各组干物质消失率无显著差异（P〉0．05）。结果显示,酵母培养物能够显著提高瘤胃VFA浓度,降低乙酸／丙酸比例,改变瘤胃发酵类型。     

高精料条件下酵母培养物对混合瘤胃微生物体外发酵的影响

采用山羊瘤胃液的体外批次培养研究了酵母培养物对混合瘤胃微生物体外发酵的影响。发酵底物精粗比为7:3,酵母培养物添加量为0、0.75 g/L1、.5 g/L2、.25 g/L。结果表明,发酵各时间点,各处理组的pH值较对照组均显著降低(P<0.05)。与对照组相比,发酵24 h、36 h4、8 h时,各处理组氨氮浓度显著降低(P<0.05),2.25 g/L处理组的TVFA浓度显著升高(P<0.05)。各时间点,三个处理组的乙酸浓度与对照组相比差异均不显著,而发酵24 h4、8 h时,三个处理组的丙酸浓度均高于对照组(P<0.05)。发酵24 h、48 h时,1.50 g/L处理组的乙丙比较对照组显著降低(P<0.05)。在整个发酵期内,1.50 g/L、2.25 g/L处理组的累积产气量均显著高于对照组(P<0.05),各组干物质消失率无显著差异(P>0.05)。结果显示,酵母培养物能够显著提高瘤胃VFA浓度,降低乙酸/丙酸比例,改变瘤胃发酵类型。