中国鹅5个品种遗传多样性的随机扩增多态DNA分析

用４０个１０－寡核苷酸随机引物对中国鹅的５个品种－狮头鹅,皖西白鹅,太湖鹅,浙东白鹅和四川白鹅进行了随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析。结果表明,用筛选出的１４个引物共扩增出１７４个ＤＮＡ片段,其中的４８个（占２８．２％）在５个品种间表现为多态性。根据扩增ＤＮＡ片段的异同,计算了各品种和个体间的遗传多样性指数和遗传距离指数。同时,用分子进化遗传分析软件（ＭＥＧＡ）以ＵＰＧＭＡ法和ＮＪ法对遗传距离指     

猪品种随机扩增多态DNA指纹分析

从 2 0个 10碱基随机引物中筛选出 12个引物对长白猪、哈白猪、大白猪、民猪、香猪、香哈杂交猪及长哈杂交猪共 4 1个个体的核 DNA遗传差异进行了 RAPD分析 ,共获得了 97个RAPD标记。品种内遗传相似度总体看来呈引入猪种→培育猪种→地方猪种递减的趋势 ,品种间遗传距离和聚类分析的结果是 :香哈杂交猪与香猪聚为一类 ,长哈杂交猪与长白、哈白、大白聚为一类 ,民猪单独聚为一类。本实验得出的结果与品种的形成历史及采样的实际情况是相吻合的     

小白菜品种的随机扩增多态DNA分析

用随机扩增多态DNA(RAPD)标记方法对目前生产上广泛采用的12个小白菜品种进行了分析,利用RAPDistance软件的4种方法计算距离矩阵,并利用邻接法进行聚类分析.结果表明:4种统计方法估算的12个小白菜品种间遗传距离均显示12个小白菜品种间的遗传相似度较高,品种2与品种3的遗传相似度最高,而品种10与其它品种间的遗传距离较大,相似度较低.不同的统计方法均显示12个小白菜品种基于RAPD数据可被分成3个独立的小组,其中A、B小组与地理种源密切相关,而C组跨地区范围较大.     

鸡品种随机引物扩增多态DNA的研究

用12个随机引物对6个鸡品种60个个体核DNA进行了RAPD扩增,共检出223条扩增片断,多态性片断188条,占843%。反映了品种内和品种间的遗传变异。12个引物对60个个体分别扩增出16,21,22,17,17,20,22,12,18,23,18,16条带。品种内和品种间遗传相似度变异范围为07981～08685和05993～07813。肉鸡AA品种内变异程度最大,且与伊莎褐遗传距离最大为04007。海兰白和海赛克斯褐首先聚类。肉鸡AA在UPGMA法中与海兰褐聚类后再与其它4种蛋鸡聚类。在NJ法中与海兰褐和其它4种蛋鸡的聚合同时聚类。说明了肉鸡AA与5种蛋鸡品种的距离较远。12个引物在6个鸡品种共检测到7条品种特异带和3条与性别相关带。     

家猪随机扩增多态DNA最佳反应体系的探讨

在研究江西方猪种的遗传多样性及其系统分类时,对模板浓度和纯度,引物种类和浓度、ｄＮＴＰ浓度,镁离子浓度,温度转换时间及双引物扩增等影响ＲＡＰＤ分析的因素进行了系统的探讨,在此基础上建立了适宜于本实验室研究的最佳ＲＡＰＤ技术体系：２０μＬ反应体系中,含１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ,ｐＨ８．３,５０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ,２．５ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２,０．２ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ,０．４５μｍｏｌ／Ｌ随     

云南鹅群体遗传结构的随机扩增多态DNA分析

 采用随机扩增多态性DNA标记技术对云南鹅主产区6个不同地点的45个个体进行了群体遗传学分析，从85个随机引物中筛选出的23个引物对所有个体的总基因组DNA进行了PCR扩增，共检测出178条DNA片段，其中150条属多态性片段（多态率84.27%），计算了各座位在群体中的基因频率、杂合度和群体Shannon多样性指数等参数。结果表明：云南鹅的群体遗传变异较丰富。     

甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟的随机扩增多态DNA分析

利用筛选出的14个10 bp随机引物,对甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟3个养殖群体进行了随机扩增DNA分析.结果显示:甘肃金鳟、日本金鳟和道氏虹鳟3个群体的多态座位比例(P)分别为75%、43.08%和52.9%,群体内遗传相似系数(S)分别为0.734 30、.887 5和0.857 0;Shannon表型多样性指数(H0)分别为0.8977,0.165 4和0.499 4,Shannon多样性值(H)分别为0.110 9、0.673 0和0.135 0.分析表明:甘肃金鳟养殖群体的遗传多样性比较丰富,而日本金鳟和道氏虹鳟养殖群体的遗传多样性较为贫乏.     

澳洲鸵鸟的随机扩增多态DNA研究

采用随机扩增多态性DNA标记技术对澳洲鸵鸟20个个体进行了遗传变异分析,从60个随机引物中筛选出17个多态性丰富的引物,并对其所有个体的总基因组DNA进行了PCR扩增,结果17条引物共产生103种扩增片段,其中共有片段13条,多态片段90条,平均每条引物的扩增带数为6．06,各引物多态性片段范围在2—9,多态频率在40％-100％。表明澳洲鸵鸟的遗传多样性较丰富。     

随机扩增多态DNA技术在野生动物研究中的应用

随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）是十分有效的遗传标，具有简单、快速、经济的优点。在野生动物研究 中．主要用于物种鉴定、遗传多样性分析、系统进化和分类研究、亲权鉴定、性别鉴定、基因渗入的检测及基因定位 和分子连锁图谱构建等领域。ＲＡＰＤ技术在野生动物领域的广泛应用．必将促进野生动物保护事业的发展。     

番鸭随机扩增多态性DNA及遗传多样性研究

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术分析番鸭的遗传多样性,20个引物共扩增出164条带,分子量约在200 ～2 000 bp之间,番鸭20个个体间遗传距离为0．4572～0．0177,群体内个体间遗传相似度(F)为0．9823～0．5428,遗传多样性指效(Ho)平均为0．1639．结果表明番鸭DNA的同源性高,品种的纯度保持较好．     

青花菜RAPD扩增条件的优化

以青花菜(Brassica oleracea var italica)基因组DNA为材料,对RAPD(随机扩增多态技术)扩增反应的各种影响因子进行了优化和筛选,建立了适宜的RAPD扩增条件.即10μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris·HCl,pH值9.0,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100),1.5 mmol/L MgCl2,1U Taq酶,16 ng模板DNA,16 pmol引物,dNTP 0.15 mmol/L,3 mg/mL BSA.青花菜RAPD反应体系的建立为青花菜种质资源鉴定和利用提供了可靠的技术支持.     

青花菜品种的ISSR分析

利用ISSR分子标记技术对7个已知特性的青花菜栽培品种进行分析,结果显示青花菜具有中等偏低的遗传多样性。根据遗传距离进行聚类分析,结果显示7个青花菜品种可被分为三大类:第一类为早中熟品种,第二类为中晚熟品种,而耐热性的早熟品种绿冠则单独成一类。青花菜的聚类分析结果主要与其抗性和生育特性密切相关。在此基础上,对11种未知特性的青花菜品种进行了ISSR分析,可将其分为6类。     

青花菜BoBURP1基因的克隆与表达分析

BURP是一类存在于植物中的特有蛋白,在生长发育和逆境响应等方面起重要作用。试验从青花菜中克隆到一个BURP基因,命名为BoBURP1,在生物信息学分析的基础上,用RT-PCR研究了它在不同器官中的表达模式。研究结果表明,BoBURP1的基因组DNA全长2 030 bp,具2个内含子;编码区全长为1 872 bp,编码623个氨基酸;推导的蛋白质分子量为70.795 6 ku,等电点为8.65。系统发育分析结果表明,BoBURP1与12种不同植物的同源蛋白可分为3组,BoBURP1与十字花科植物同源序列的相似性最高,在进化树上聚为一组。RT-PCR结果表明,BoBURP1在根、茎、叶、花蕾、花和角果中均有表达,叶、花蕾和花的表达量最高,而根和茎中的表达量最低。     

绿花椰菜多倍体育种研究

用改良L.D.Cua法进行多倍体诱变,研究了绿花椰菜(Brassica oleracea L.var.italica Plench)多倍体育种.结果显示,在不同处理时间条件下,幼苗对秋水仙素的敏感程度不同.用0.2%秋水仙素处理绿花椰菜幼苗72 h,死亡率低,变异率高,诱导效果好.多倍体绿花椰菜在形态、生理学特征以及染色体数目上有明显的改变.     

青花菜SKIP基因的克隆与表达分析

SKIP(SKI-interacting protein)在植物的生长、发育和逆境响应中起着重要作用。以青花菜为材料,在克隆SKIP基因的基础上,利用生物信息学方法进行序列分析,并通过实时荧光定量PCR研究其在生物(寄生霜霉菌、野油菜黄单胞菌)、非生物(NaCl、PEG6000)胁迫下的表达模式。结果表明,青花菜SKIP基因全长为1 836 bp,没有内含子;BoiSKIP编码611个氨基酸,具1个SNW/SKI结构域,位于推导蛋白质序列的188-347处;该蛋白质的分子量为69.22 ku,理论等电点为9.15,平均亲水性指数为-1.12,为亲水性蛋白质。系统发育分析结果表明,芸薹属植物的SKIP聚为一组,支持率达100%,BoiSKIP与甘蓝SKIP的关系最近,它们处于同一分支。基因表达分析结果表明,BoiSKIP的表达受NaCl和PEG6000的诱导,表达量分别在诱导24、12 h达到最大;BoiSKIP受寄生霜霉菌和野油菜黄单胞菌的诱导,分别在处理24 h和72 h达到最大值。青花菜SKIP基因的克隆与表达分析,为后续开展该基因在抗逆反应中的功能研究奠定了基础。     

羽衣甘蓝RAPD反应体系优化及在亲缘关系分析中的应用

采用改良CTAB法得到可用于RAPD分析的羽衣甘蓝基因组;摸索了适合羽衣甘蓝基因组的RAPD反应体系;运用优化的反应体系对羽衣甘蓝新品种的亲缘关系进行了聚类分析.结果表明:叶形是决定亲缘关系的首要因素,羽叶与圆叶品种间亲缘关系较近,与皱叶品种间亲缘关系较远,而皱叶品种内部遗传距离也较远.     

青花菜BoBURP2基因的克隆与表达分析

BURP是植物特有蛋白,在生长发育和抗逆反应中起着重要作用。本研究以青花菜为材料,利用PCR克隆到1个BURP基因,命名为BoBURP2。测序结果表明,BoBURP2的基因组DNA全长为1 218bp,具1个内含子,编码区全长为840bp,编码279个氨基酸;序列比对结果表明,该基因与BURP家族成员RD22具有较高的同源性。系统发育分析结果表明,BoBURP2与甘蓝、芜菁和甘蓝型油菜的同源序列相似性最高,在发育树上聚为一组,与醉蝶花的相似性最低,亲缘关系最远。RT-PCR结果表明,BoBURP2的表达受NaCl和干旱胁迫的诱导,表达量分别在24h和48h时达到最大值,暗示该基因与这2种逆境响应相关。青花菜BoBURP2的克隆与表达分析,为后续基因功能的鉴定和抗逆分子育种奠定了基础。     

结球甘蓝体细胞无性系变异的RAPD分析

以结球甘蓝强力50原生质体再生植株和无菌苗下胚轴再生植株为材料,利用RAPD分子标记技术对结球甘蓝再生过程中产生的体细胞无性系变异进行了分析检测。结果表明：从50条随机引物中筛选出条带清晰、多态性丰富、表现稳定的引物14条,在此基础上共扩增出DNA片段253条,其中具多态性的73条,表现为新增加带和缺失带,多态率为28.85%,每对引物平均扩增的多态位点为5.21个。各植株间遗传相似系数的计算使用聚类分析软件NTSYS210e完成,采用非加权类平均法（UPMGA）对统计数据进行聚类分析,结果表明：各再生植株与母本间平均遗传相似系数为0.9304,植株之间存在遗传变异。     

花椰菜与青花菜DNA标记研究进展

近年来花椰菜与青花菜在中国的种植面积越来越大,其分子生物学和遗传育种研究也越来越受到关注和重视。国内外利用各种分子标记技术对其基因组进行了深入的研究,取得了长足的进展。文章从构建遗传图谱、基因定位、种质资源遗传多样性评价、DNA指纹图谱以及标记辅助选择等方面综述了DNA标记在花椰菜和青花菜中的研究进展,并对其前景进行了展望。     

影响青花菜游离小孢子培养的因素

以10份不同类型的F1代青花菜为试材,研究了基因型、小孢子发育时期的细胞学观察、培养基类型及pH值等对青花菜游离小孢子培养因素的影响.结果表明:基因型是影响青花菜小孢子胚状体产量的主要因素,不同品种间胚胎诱导频率差异显著;花蕾大小与小孢子发育时期有一定的关系,不同基因型之间最适花蕾的长度也有一定的差异;1/2 NLN+130 g蔗糖是青花菜小孢子培养的最佳培养基;培养基最佳pH值为6.2;子叶胚在液体培养基中停留25d为最佳时间;MS培养基中琼脂含量为7.0 g·L-1时胚状体苗的成活率最高.