雏鸡烟曲霉感染NOD1信号通路关键分子mRNA水平的变化

为明确烟曲霉菌感染雏鸡后肺组织内NOD1信号通路中关键分子m RNA水平的变化情况,取10日龄雏鸡40只,随机分为2组。Af组雏鸡滴鼻烟曲霉菌孢子悬液,50μL/只;对照组雏鸡滴鼻等量生理盐水。分别于接种前(0h)和感染后12、24和48h处死雏鸡。无菌操作取肺组织,菌落计数法测定肺组织中烟曲霉菌的负荷;实时定量PCR方法检测肺组织中NOD1、Rip2和NF-k Bp65 m RNA的表达情况。结果表明Af组0h未见烟曲霉菌生长,其他各时间点均有霉菌生长,且霉菌负荷量逐渐增加。对照组未见烟曲霉菌生长。在烟曲霉菌感染后24、48h肺组织中NOD1、Rip2和NF-k Bp65 m RNA的表达水平均显著高于感染前0h(P0.05)。由此说明NOD1信号通路在烟曲霉菌感染后被激活,其在抗烟曲霉菌感染免疫中可能起到重要作用,详细机制有待进一步研究。     

雏鸡烟曲霉菌中毒的诊治

曲霉菌中毒是鸡的一种常见中毒病 ,但烟曲霉菌中毒比较少见。但克东县近几年先后发生 3起烟曲霉菌中毒 ,现报告如下。1　病例1.1　 2 0 0 2年 4月 2 8日 ,宝泉镇养鸡专业户刘××养 130 0只迪卡雏鸡 ,在 32日龄开始发病 ,先后用青霉素、土霉素和庆大霉素治疗均无效 ,到 4 4日龄时死亡雏鸡 317只 ,最后经确诊 ,病情得到有效控制。1.2　 2 0 0 1年 6月 3日克东镇庆祥街养鸡专业户孙××饲养罗曼雏鸡 70 0只 ,于 2 1日龄发病 ,到 30日龄死亡 82只 ,他自己先后用青霉素、氯霉素、红霉素和磺胺嘧啶钠等药物治疗无效后 ,经确诊、用药 ,得到有效控…     

NOD1/NOD2介导的信号通路在小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎中的作用

为研究NOD1/NOD2介导的信号通路在金黄色葡萄球菌(S.aureus)引发小鼠乳腺炎中的作用,本实验通过人工接种不同剂量的S.aureus复制小鼠乳腺炎模型,利用组织切片法观察小鼠乳腺病理变化,采用荧光定量PCR方法检测乳腺组织中NOD1、NOD2、下游的受体作用蛋白2(RIP2)、核转录因子κB(NF-κB)以及炎性细胞因子TNF-α、IL-6的m RNA转录水平。结果显示,接种S.aureus的小鼠乳腺组织中炎性细胞增多,NOD1、NOD2、RIP2、NF-κB、IL-6、TNF-α的m RNA转录水平比未接种对照组均显著升高(p0.05),TNF-α、IL-6的m RNA转录水平变化与NOD1/NOD2相一致。以上结果表明NOD1/NOD2受体及其介导的炎性信号通路参与了S.aureus感染小鼠乳腺的免疫反应。     

脂多糖对仔猪下丘脑-垂体-肾上腺轴内应激基因和NOD信号通路关键基因表达的影响

本试验旨在研究免疫应激对仔猪下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴应激基因和核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)信号通路关键基因表达的影响。选取12头杜×长×大仔猪,分成2个处理,每个处理6个重复。试验组注射100μg/kg体重的脂多糖(LPS)建立免疫应激模型,对照组注射等量的生理盐水。于注射LPS或生理盐水4 h后屠宰,取下丘脑、垂体和肾上腺。应用实时荧光定量PCR技术测定HPA轴应激基因和NOD信号通路关键基因在HPA轴中的mRNA 表达水平。结果表明:LPS导致下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素、垂体黑素皮质激素肽和肾上腺类固醇合成急性调节蛋白mRNA 表达量显著升高(P0.05);LPS导致HPA轴中NOD信号通路关键基因NOD1、NOD2、受体互作蛋白2和肿瘤坏死因子-α mRNA 表达量显著升高(P0.05)。综上所述,LPS促进了HPA轴应激基因和NOD信号通路关键基因的表达。     

小鼠感染旋毛虫后部分组织器官中NOD1、RIP2、NF-κB mRNA表达的监测

应用荧光定量PCR方法,对感染旋毛虫小鼠的小肠、肺脏、心脏和肌肉中NOD1受体及其信号传导通路中接头分子RIP2和下游分子NF-κB mRNA表达水平进行监测。结果在小肠和心脏中,旋毛虫感染不同时期各目的基因表达量都有升高,分别于感染后4 d和14 d达到峰值,与对照组比均有极显著差异(P<0.01)。在肺脏中,NOD1 mRNA表达量仅在感染后7 d略升高,而RIP2的mRNA表达量在不同感染期均升高,于感染后4 d达到峰值,与对照组比有极显著差异(P<0.01)。在肌肉中,各目的基因在感染初期表达量变化不明显,而于感染后21 d mRNA表达量明显升高,28 d达到高峰,与对照组比有极显著差异(P<0.01)。表明旋毛虫感染对小鼠的小肠、心脏、肺脏和肌肉中NOD1、RIP2和NF-κB的表达水平均有不同程度的影响,这与旋毛虫在宿主体内移行途径和不同寄生阶段及其产生的各类抗原密切相关。     

丹参多糖对氟苯尼考处理的雏鸡肝脏中PPAR信号通路的调节作用

将120只雏鸡随机平均分为空白对照组、氟苯尼考(florfenicol, FFC)组和FFC+丹参多糖(Salvia miltiorrhiza polysaccharides, SMPs)组。从1日龄起,连续给药5 d。于第6天采取肝脏样品,进行转录组和蛋白组测序;采集和制备血清样品,保存剩余肝组织,用于检测其他相关的试验指标。采用qPCR和PRM的方法验证测序结果。测序和验证结果显示,暴露于FFC之后,雏鸡肝脏中1 989个基因和917个蛋白质发生了显著变化。这些显著改变了的基因和蛋白与对刺激的反应、异生物质的代谢与氧化解毒等生物功能有关。FFC显著改变了PPAR信号通路中的13个基因和18个蛋白,SMPs的干预则调整了其中的7个显著差异基因和8个显著差异蛋白的表达水平。此外,FFC还显著地提高了雏鸡血清中AST和ALT的含量,降低了肝脏中TG、TC和ANDP的含量。SMPs则有效逆转了以上因子的变化趋势。结果表明,FFC改变了PPAR信号通路关键因子的表达水平,进而造成了雏鸡肝脏的脂质代谢紊乱。SMPs则通过进一步调控该通路,在一定程度上改善了雏鸡肝脏的脂质代谢紊乱,进而维护了肝脏...     

奶牛围产期脂肪因子变化对胰岛素信号通路的影响

奶牛围产期出现能量负平衡,动员体脂供能并释放游离性脂肪酸(free fat acid, FFA)是酮病的始发因素,且由于泌乳期外周胰岛素抵抗和产后胰岛素水平降低,胰岛素作为抑制FFA释放的关键激素并不能很好地发挥其生理作用。文章旨在阐述奶牛围产期与脂代谢和糖代谢相关的主要胰岛素信号通路,包括磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)通路等,以及脂肪因子通过这些通路对胰岛素敏感性的影响,为进一步研究酮病的发病机制及防控靶点提供理论基础。     

IFN-γ诱导感染牛分枝杆菌的THP-1细胞凋亡及AIF信号通路

将质量浓度为15 μg/L的IFN-γ作用于不同荆量M.bovis(MOI 10:1,20:1)北京株感染的THP-1细胞,在感染后12,24,36,48、72 h,使用流式细胞仪测定其细胞凋亡百分比.结果表明:IFN-γ诱导了牛分枝杆菌北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相关性.在相同时间,感染剂量为MOI 10:1和MOI 20:1的THP-1细胞经IFN-γ诱导后,细胞凋亡数无显著差异(P>0.05).将IFN-γ(15 μg/L)和牛分枝杆菌北京株(MOI 10:1)处理的THP-1细胞孵育36 h后,使用免疫细胞化学的方法检测细胞核内凋亡诱导相关因子(AIF)的变化,结果发现,细胞核内牛分枝杆菌单独感染和IFN-γ刺激的牛分枝杆菌感染的巨噬细胞的AIF的百分比分别为(11.38±1.00)%和(23.26±1.85)%,两者相比差异显著(P<0.05).表明在IFN-γ诱导的牛分枝杆菌感染的THP-1细胞凋亡过程中,AIF介导的凋亡信号通路被激活.本研究首次报道了在IFN-γ诱导的牛分枝杆菌北京株感染的THP-1细胞凋亡过程中AIF相关信号通路,对阐明IFN-γ在牛分枝杆菌感染中的作用机制具有重要意义.     

vMDV感染雏鸡Mφ活性及IL-1体外诱生活性的变化

本研究以AA肉用雏鸡为试验动物,采用MTT法研究了马立克氏病(vMDV)感染雏鸡后巨噬细胞(Mφ)活性和白细胞介素1(IL-1)体外诱生活性的变化。结果表明:1日龄雏鸡vMDV强毒感染后,巨噬细胞活性和白细胞介素1体外诱生活性显著降低(P<0.05),提示雏鸡受vMDV攻击后,Mφ功能受损,IL-1生成减少,与马立克氏病(MD)及马立克氏病肿瘤的发生和发展有关。     

雏鹅感染烟曲霉鉴定与病理组织学观察

为确定荣昌3个养鹅场雏鹅感染的真菌种类,本研究采集病死雏鹅肺脏病变组织样本进行病原分离,对分离的真菌进行了形态学鉴定和ITS2序列PCR扩增及测序分析。结果显示:分离的真菌菌落颜色、菌丝结构、孢子无性繁殖方式均符合烟曲霉的特征,ITS2序列与GenBank的烟曲霉AF454113、AF454114、AY660923菌株同源性均为100%。分离菌株雏鹅回归试验显示,感染雏鹅气囊有真菌结节,肺泡壁增厚,毛细血管淤血,支气管管腔有脓性纤维蛋白或粘液,肝细胞变性坏死,淋巴细胞浸润等病变。肺脏主要表现为非典型肺炎,肝脏主要表现为实质性肝炎。本研究为临床诊断曲霉病提供了实验依据。     

Inductive expression of the NOD1 signalling pathway in chickens infected with Salmonella pullorum

1. The aim of this study was to describe the role of Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 1 (NOD1) receptor signalling in chicken.

2. Tissue-specific expression analysis of NOD1, receptor-interacting serine-threonine kinase 2 (RIPK2), nuclear factor kappa B (NF-κB) and mitogen-activated protein kinase 11 (MAPK11 or p38) by quantitative real-time PCR (qRT-PCR) revealed their wide distribution in various organs and tissues.

3. Salmonella pullorum infection activated NOD1 receptor signalling in vivo and in vitro, resulting in significant induction of downstream signalling molecules RIPK2, NF-κB/p65, MAPK11/p38 and the effector molecules IL-1b and IL-8.

4. Activation of NOD1 by its agonist bacterial γ-D-glutamyl-meso-diaminopimelic acid (iE-DAP) in HD11 cells induced the adapter molecular RIPK2 and activated the NF-κB/p65 and MAPK11/p38 pathways, resulting in an increase in IL-8 but not IL-1β. Additionally, inhibition of NOD1 using NOD1-shRNA resulted in downregulation of RIPK2, MAPK11 and IL-8, while NF-κB/p65 and IL-1β were unaltered.

5. These results highlight the important role of NOD1 receptors in eliciting the innate immune response following pathogenic invasion in chicken.     

烟曲霉感染对肉鸡部分免疫指标的影响

为了研究烟曲霉感染对肉鸡血清免疫球蛋白(Ig)、γ干扰素(IFN-γ)浓度及传染性法氏囊病(IBD)抗体效价的影响,选用96只15日龄罗斯308肉鸡,随机分成试验组和对照组,每组4个重复,每个重复12只鸡。试验组连续滴注霉菌孢子5 d,对照组滴注生理盐水。试验后的第3、4和5天,分别从试验组和对照组每个重复随机抽出2只鸡进行剖检诊断和实验室检测;试验后的第7 (21日龄)和14天(28日龄),分别检测肉鸡血清中Ig A、Ig G、Ig M、IFN-γ和IBD抗体水平。结果:试验后的第3～5天,试验组鸡血液中均分离到烟曲霉;试验组鸡血清中Ig A、Ig G和Ig M浓度均极显著低于对照组(P<0. 01),血清中IFN-γ的浓度极显著高于对照组(P<0. 01),血清中IBD抗体效价极显著低于对照组(P<0. 01)。研究表明烟曲霉菌感染能显著降低肉鸡的免疫功能。     

Changes in ghrelin levels of plasma and proventriculus and ghrelin mRNA of proventriculus in fasted and refed layer chicks

This is a test-report of ghrelin levels in plasma and proventriculus, the glandular portion of the avian stomach, by using a specific radioimmunoassay for acylated ghrelin, as well as the expression of the ghrelin gene in the proventriculus after a 12-h fasting period followed by a 6-h feeding period with 6-day-old layer chicks. After fasting, the plasma ghrelin levels increased from 21.3 ± 4.5 to 32.9 ± 5.0 fmol/ml, but once refed it returned to the control value. After fasting, the ghrelin mRNA and the peptide levels in the proventriculus increased, and ghrelin mRNA levels remained high but once refed the ghrelin content returned to the control level. Furthermore, in order to examine the effect of increased circulating ghrelin on food intake, a bolus intravenous injection of 500 pmol of chicken ghrelin was given to 8-day-old chicks. The ghrelin injection did not cause any significant changes in food intake. These results indicate that the levels of ghrelin and its mRNA with layer chicks are altered according to the feeding state and this in a similar manner as has been observed in mammals. Unlike in mammals, an increase in circulating ghrelin does not cause the promotion of food intake in chicks.     

成纤维细胞生长因子信号通路在小鼠牙齿发育中的表达及其作用

小鼠牙齿发育是一个外胚层来源的上皮和神经嵴来源的间充质相互作用的过程.在这个相互作用过程中,成纤维细胞生长因子(FGFs)信号通路在牙齿发生位置的确定,牙齿发育的起始、细胞的增殖分化和牙齿的形态建成等方面都发挥着重要作用.该家族由23个配体(Fgf1-23)组成,通过4种特异性受体(FGFR1-4)来发挥作用.本文综述FGFs信号通路的配体和受体在小鼠牙齿发育中具体的表达模式及其作用.     

Spermine protects intestinal barrier integrity through ras-related C3 botulinum toxin substrate 1/phospholipase C-γ1 signaling pathway in piglets

Weaning stress can cause tight junctions damage and intestinal permeability enhancement, which leads to intestinal imbalance and growth retardation, thereby causing damage to piglet growth and development. Spermine can reduce stress. However, the mechanism of spermine modulating the intestinal integrity in pigs remains largely unknown. This study aims to examine whether spermine protects the intestinal barrier integrity of piglets through ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 (Rac1)/phospholipase C-γ1 (PLC-γ1) signaling pathway. In vivo, 80 piglets were categorised into 4 control groups and 4 spermine groups (10 piglets per group). The piglets were fed with normal saline or spermine at 0.4 mmol/kg BW for 7 h and 3, 6 and 9 d. In vitro, we investigated whether spermine protects the intestinal barrier after a tumor necrosis factor α (TNF-α) challenge through Rac1/PLC-γ1 signaling pathway. The in vivo study found that spermine supplementation increased tight junction protein mRNA levels and Rac1/PLC-γ1 signaling pathway gene expression in the jejunum of piglets. The serum D-lactate content was significantly decreased after spermine supplementation (P < 0.05). The in vitro study found that 0.1 μmol/L spermine increased the levels of tight junction protein expression, Rac1/PLC-γ1 signaling pathway and transepithelial electrical resistance, and decreased paracellular permeability (P < 0.05). Further experiments demonstrated that spermine supplementation enhanced the levels of tight junction protein expression, Rac1/PLC-γ1 signaling pathway and transepithelial electrical resistance, and decreased paracellular permeability compared with the NSC-23766 and U73122 treatment with spermine after TNF-α challenge (P < 0.05). Collectively, spermine protects intestinal barrier integrity through Rac1/PLC-γ1 signaling pathway in piglets.     

接种尖镰孢菌对枸杞苯丙烷代谢关键酶及产物的影响

为了阐明抗感枸杞与根腐病病原菌互作过程中苯丙烷代谢途径中关键酶和代谢产物的变化差异与抗病性的关系,以枸杞栽培品种宁杞一号(NingqiⅠ)、宁杞二号(NingqiⅡ),国内野生种中国枸杞、宁夏枸杞,美洲引进野生种L.brevipes、L.exsertum等6种材料为参试材料,采用切根法接种强致病菌尖镰孢菌后统计死亡率,以此筛选出抗病和感病材料,并测定二者0~20 d内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸羟化酶(C4H)、4-香豆酰-辅酶A连接酶(4CL)等苯丙烷代谢途径关键酶以及总酚和类黄酮等代谢产物的动态变化。结果表明,6种参试材料接种枸杞根腐病强致病菌尖镰孢菌后,野生材料较栽培材料抗病性强,宁杞一号为感病材料,L.exsertum抗根腐病能力最强;抗病材料L.exsertum苯丙烷代谢关键酶苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶、4-香豆酰-辅酶A连接酶活性显著高于宁杞一号,初步确定苯丙烷代谢中的苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶、4-香豆酰-辅酶A连接酶的活性和类黄酮的含量与枸杞材料抗根腐病呈正相关。因此,苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶、4-香豆酰-辅酶A连接酶活性和类黄酮含量,初步可以作为筛选抗枸杞尖镰孢菌根腐病的生化指标。