某牛场犊牛大肠杆菌病的实验室诊断与药敏试验

2018年3月份,黑龙江省齐齐哈尔市某规模化奶牛场发生犊牛腹泻,为了确诊其病因,无菌采取10头腹泻犊牛粪便进行细菌分离鉴定、生化试验、PCR鉴定和药敏试验等。生化结果表明:符合大肠杆菌生化特性;PCR结果表明:引物能有效扩增大肠杆菌OmpA、K99、Sta、irp2、FyuA基因;药敏结果表明:大肠杆菌对恩诺沙星、左氟沙星、头孢曲松高度敏感;10头犊牛均为大肠杆菌感染,本研究为该牛场犊牛腹泻的病因分析和防治提供了指导。     

一起“阿什旦”育成牦公牛腹泻的病原学诊断及药敏实验

2020年8月份,青海省大通种牛场1.5岁"阿什旦"育成牦种公牛发生腹泻,为了确诊其病因,无菌采取18头腹泻犊牛粪便进行细菌分离鉴定、生化试验、PCR鉴定、致病性实验、虫卵检测和药敏试验等。实验结果(病料编号为10#)的样品:生化结果表明:符合大肠杆菌生化特性;PCR结果表明:引物能有效扩增大肠杆菌16SrRNA基因;致病性实验表明:将纯化后的细菌在营养肉汤培养24 h,将其腹腔注射昆明系小白鼠,每只0.2 mL,注射两只,白鼠24 h死亡,且小鼠腹腔呈现肠道炎症状样,该菌具有致病性,为致病性大肠杆菌。病毒性腹泻(BVDV)RT-PCR阴性,沙门氏菌PCR阴性。虫卵检测14/18线虫阳性。药敏结果表明:分离纯化的大肠杆菌对恩诺沙星、氨苄青霉素、呋喃妥因、阿米卡星、先锋霉素、庆大霉素、畜痢灵高度敏感;采自(编号为10#)1头犊牛为大肠杆菌感染,本研究为该牛场犊牛腹泻的病因分析和防治提供了指导。     

一例貉大肠杆菌与血虫混合感染的诊断鉴定

为诊断吉林养殖场一例病死貉的病原,本试验运用细菌培养、染色镜检、生化鉴定、分子生物学鉴定和血液涂片镜检等方法对采集的病死貂的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠道及血液进行病原分离鉴定,并对分离到的病原菌进行致病性和药敏试验测定。结果显示,共分离出1株优势菌株,该分离菌株在光学显微镜下呈现为两端钝圆的杆状革兰氏阴性菌;生化试验结果显示,其能分解葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖和蔗糖产酸产气,对于M-R试验、吲哚试验、淀粉水解试验结果为阳性;其16S rRNA序列与NCBI数据库中登录的已知大肠杆菌序列同源性达99%;动物致死性试验结果表明,该菌株对小鼠具有致病性;药敏试验结果显示,分离菌对喹诺酮类药物诺氟沙星和环丙沙星最敏感,对其他药物具有不同程度的耐药性;对病貉抗凝血进行涂片镜检证明有血虫感染,且红细胞感染率达98%以上。综上所述,该病貉感染的病原菌株为大肠杆菌且该大肠杆菌具有致病性,同时病貉患有血虫病,并导致了其生长发育迟缓。     

貉巴氏杆菌病的诊断与中西医结合治疗

为了确定某养殖场的使貉发病的主要病原菌并筛选出治疗药物,对青岛市某养殖场送检的病死貉进行病理剖检,并分离到1株细菌,随后进行分离菌形态观察、生化试验、细菌16S rRNA基因测序及药敏试验。结果表明:该株菌为多杀性巴氏杆菌,药敏试验显示该株菌对庆大霉素、妥布霉素、诺氟沙星、左氧氟沙星、多黏菌素B高度敏感;中西医结合治疗可有效控制病情。     

一例貉大肠杆菌与血虫混合感染的诊断鉴定

为诊断吉林养殖场一例病死貉的病原,本试验运用细菌培养、染色镜检、生化鉴定、分子生物学鉴定和血液涂片镜检等方法对采集的病死貂的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠道及血液进行病原分离鉴定,并对分离到的病原菌进行致病性和药敏试验测定。结果显示,共分离出1株优势菌株,该分离菌株在光学显微镜下呈现为两端钝圆的杆状革兰氏阴性菌;生化试验结果显示,其能分解葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖和蔗糖产酸产气,对于M-R试验、吲哚试验、淀粉水解试验结果为阳性;其16S rRNA序列与NCBI数据库中登录的已知大肠杆菌序列同源性达99%;动物致死性试验结果表明,该菌株对小鼠具有致病性;药敏试验结果显示,分离菌对喹诺酮类药物诺氟沙星和环丙沙星最敏感,对其他药物具有不同程度的耐药性;对病貉抗凝血进行涂片镜检证明有血虫感染,且红细胞感染率达98%以上。综上所述,该病貉感染的病原菌株为大肠杆菌且该大肠杆菌具有致病性,同时病貉患有血虫病,并导致了其生长发育迟缓。     

某牛场犊牛呼吸道疾病的诊断与药敏试验

2017年3月份,黑龙江省五常市某规模化奶牛场发生犊牛急性肺炎,为了确诊其病因,无菌采取7份呼吸道症状犊牛鼻拭子进行细菌分离鉴定,同时进行生化试验、PCR鉴定和药敏试验。结果表明:共分离得到3株细菌,符合大肠杆菌、巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌生化特性;PCR引物能有效扩增巴氏杆菌OmpH基因、溶血性曼氏杆菌lkt A基因和大肠杆菌Sta基因;分离的大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、阿米卡星中敏,巴氏杆菌对恩诺沙星、阿莫西林、青霉素高敏,溶血性曼氏杆菌对阿米卡星、头孢唑林、青霉素高敏;经检查7份鼻拭子中大肠杆菌感染1份,溶血性曼氏杆菌感染1份,巴氏杆菌感染5份。说明该牛场细菌污染严重,应引起重视。     

鹌鹑致病性大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离鉴定与药敏试验

目的:分离鉴定发病鹌鹑的病原菌,并进行药敏试验。方法:从发病鹌鹑的肝脏和心脏等组织,分离细菌,进行纯化培养、生化试验、小鼠致病性试验和药敏试验。结果:经过实验室诊断确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染;用13种常用抗菌药物对分离菌株进行了药敏试验。结果表明,大肠杆菌对庆大霉素、复达欣、新霉素等药物高度敏感;沙门氏菌对复达欣、新霉素、氟哌酸等药物高度敏感。结论:药敏试验结果为规模化鹌鹑养殖场临床合理用药提供了科学依据。     

肉鸽铜绿假单胞菌分离与鉴定

从南京某肉鸽养殖场死亡病鸽肝脏中分离到1株细菌,经分离培养、形态染色镜检、生化试验、药敏试验、实验动物致病性试验和16S rDNA基因片段PCR检测及基因测序试验,结果表明,该菌可以在普通营养琼脂和SS琼脂平板上生长,革兰染色镜检为革兰阴性菌,生化试验检测结果鉴定值为1 655,符合铜绿假单胞菌生化特性;药敏试验表明,该菌对磷霉素、环丙沙星和阿米卡星高度敏感,接种小鼠能导致其死亡并分离出同一细菌,16S rDNA基因片段测序后与GenBank中登录的铜绿假单胞菌同源性为99%。综合以上结果鉴定该分离菌为铜绿假单胞菌。     

腹泻犊牛大肠埃希菌的分离鉴定与药敏试验

试验选择2020年3月25日某养殖场内发病犊牛尸体组织为病原来源,开展流行病学调查、病料采集镜检、大肠埃希菌分离以及培养、细菌纯化、生化鉴定、药敏试验、动物试验以及溶血试验。试验结果显示:该养殖场内犊牛死亡原因为大肠杆菌感染所致,大肠杆菌菌株对于各类药物敏感性存在较大差异。其对庆大霉素以及硫酸链霉素敏感性强,对四环素以及新霉素耐药。大肠杆菌为导致犊牛腹泻的常见致病菌,其表现出了对部分抗生素耐药的现象。有必要定期轮换用药,最好是先实施药敏试验择取敏感药物开展有效治疗,同时做好疾病预防工作。     

兔源致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

从富阳某发病兔场分离到一株疑似大肠杆菌的菌株,对其进行了分离培养、生化试验、PCR鉴定、血清型鉴定、免疫原性试验及药敏试验。药敏试验结果表明:该菌对复方新诺明、羧苄青霉素、左氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星等药物高度敏感;为兔大肠杆菌病的诊断和防治提供了科学的依据。     

昌黎县貉貂大肠杆菌分离鉴定与耐药性检测

为确定致昌黎县5个貉、貂养殖场因腹泻死亡的貉、貂的病原及其耐药性,试验采集死亡貉、貂的病料进行病原分离、染色镜检和生化试验,并对分离菌进行药敏试验。结果表明:分离出的5株菌均为大肠杆菌,3株貉源大肠杆菌的耐药率分别为66.67%(14/21)、57.14%(12/21)和57.14%(12/21);2株貂源大肠杆菌的耐药率均为61.90%(13/21)。5株大肠杆菌对林可霉素、氨苄西林、阿莫西林、四环素、多西环素、多黏菌素B的耐药性高达100%;对头孢噻肟、头孢噻吩、磺胺甲氧异口恶唑、红霉素的耐药性为80%;对头孢曲松、氟苯尼考的耐药性为60%;对丁胺卡那均高敏;除貉场3分离的大肠杆菌对磷霉素耐药外,其他4株菌均对磷霉素高度敏感。     

一株致水貂流产的大肠杆菌的分离鉴定及耐药性检测

为检测唐山某水貂养殖场引起母貂流产的病原菌及其耐药情况,试验采用病原检测、细菌分离与形态观察、生化试验、16S rRNA PCR检测、致病性试验等方法对水貂致病原进行鉴定,并采用药敏试验测定其耐药情况。结果表明:水貂阿留申病毒、犬瘟热病毒、细小病毒、加德纳杆菌和布鲁氏杆菌等病原检测为阴性;从无菌采集的阴道分泌物及胎儿等病料组织中分离到1株病原菌,将其命名为HB-E2株,该株病原菌为两端钝圆、短小杆状的革兰氏阴性菌,通过PCR检测鉴定为大肠杆菌; HB-E2株大肠杆菌对小白鼠具有很强的致病性,对头孢曲松、头孢克肟、环丙沙星等5种药物高度敏感,对氟苯尼考、头孢拉定、阿米卡星等5种药物中度敏感,对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等6种药物耐药。     

死亡仔猪脏器中致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

从送检的死亡猪组织病料中分离到1株病原菌,经病原菌的分离、生化试验、动物致死试验、药物敏感性试验和PCR扩增及测序,对该菌株进行了鉴定。结果表明:该病原菌为致病性大肠杆菌;药敏试验表明在检测的17种抗生素中该菌株仅对阿奇霉素和克林霉素药物敏感;对强力霉素、多粘菌素B药物中敏;对杆菌肽、氯霉素和多粘附素E等耐药。说明该猪死亡前感染了耐药性较强的致病性大肠杆菌。     

感染棘腹蛙的腐败希瓦菌的分离与鉴定

为了弄清重庆地区部分养殖场流行的致棘腹蛙食欲废绝而死亡的病因,研究采用细菌分离纯化、形态观察、致病性试验、生理生化特性鉴定、16S r DNA测序鉴定和药敏试验等方法对其进行了研究。结果表明:在患病棘腹蛙舌部、食道、胃和肠道都分离得到形态弯曲的革兰阴性短杆菌;该候选菌株CQWU201405为腐败希瓦菌(Shewanella putrefaciens),是导致棘腹蛙发病的病原;在供试的18种药物中,该菌仅对磷霉素表现出明显的耐药现象。     

貉源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及药敏试验

为确定河北昌黎地区某养殖场貉呼吸道疾病引起死亡的病因,本研究从送检的貉病料肺脏中分离到1株革兰氏阴性短杆菌,并对分离株进行形态学观察、16S rRNA序列测序及全自动细菌生化鉴定仪鉴定,在此基础上完成了分离株的分型、人工感染小鼠试验及药敏试验等。结果显示,该分离株为非K1/K2型肺炎克雷伯菌,并将其命名为CLKp18;该分离株的16S rRNA基因序列与GenBank中登录的多株肺炎克雷伯菌参考株同源性均高达99%。Vitek全自动细菌鉴定仪结果表明,该菌株与肺炎克雷伯菌鉴定标准相似度为99%。人工感染小鼠试验结果显示,试验组小鼠在攻毒后6 h开始出现临床症状。无菌取出死亡小鼠的肺脏、肝脏、脾脏及肾脏,划线涂板,均可分离到该菌,表明该分离株感染小鼠后,能侵入到小鼠体内多个组织器官,引起不同程度的病变,尤以肝脏和肺脏病变较为明显,对小鼠的半数致死量(LD₅₀)为2.17×10~7 CFU。药敏试验结果表明,该菌对单环内酰胺类、氯霉素类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类及大部分头孢类耐药,但对阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶和亚胺培南敏感。本研究结果确定了引起本次貉呼吸道症状疾病的致病菌为非K1/K2型肺炎克雷伯菌,且该分离株有较强的致病性和多重耐药性。本研究为临床治疗由该菌引起的貉肺炎提供了参考依据。     

肉鸽致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

对吉林省某珍禽养殖场患病肉鸽进行了临诊检查、病理剖检,并结合病原分离、生化培养、动物试验等方法,确诊为大肠杆菌病．最后对分离细菌进行了药敏试验。结果表明,该致病性大肠杆菌对卡那霉素、阿米卡星和氟苯尼考敏感。     

仔猪水肿病大肠杆菌O8型的分离与鉴定

对山东东营某猪场送检的病死猪进行病原菌分离,对分离细菌进行形态学观察、生化试验、PCR鉴定、药敏试验和动物致病性试验。染色镜检、生化试验结果及PCR试验证实成功分离到一株O8型大肠杆菌,药敏试验结果证实该菌株具有多重耐药性,致病性试验中该菌株对昆明系小白鼠、仔猪均具有一定的致病性。     

貉源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及药敏试验

为确定河北昌黎地区某养殖场貉呼吸道疾病引起死亡的病因,本研究从送检的貉病料肺脏中分离到1株革兰氏阴性短杆菌,并对分离株进行形态学观察、16S rRNA序列测序及全自动细菌生化鉴定仪鉴定,在此基础上完成了分离株的分型、人工感染小鼠试验及药敏试验等。结果显示,该分离株为非K1/K2型肺炎克雷伯菌,并将其命名为CLKp18;该分离株的16S rRNA基因序列与GenBank中登录的多株肺炎克雷伯菌参考株同源性均高达99%。Vitek全自动细菌鉴定仪结果表明,该菌株与肺炎克雷伯菌鉴定标准相似度为99%。人工感染小鼠试验结果显示,试验组小鼠在攻毒后6 h开始出现临床症状。无菌取出死亡小鼠的肺脏、肝脏、脾脏及肾脏,划线涂板,均可分离到该菌,表明该分离株感染小鼠后,能侵入到小鼠体内多个组织器官,引起不同程度的病变,尤以肝脏和肺脏病变较为明显,对小鼠的半数致死量(LD_(50))为2.17×10~7 CFU。药敏试验结果表明,该菌对单环内酰胺类、氯霉素类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类及大部分头孢类耐药,但对阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶和亚胺培南敏感。本研究结果确定了引起本次貉呼吸道症状疾病的致病菌为非K1/K2型肺炎克雷伯菌,且该分离株有较强的致病性和多重耐药性。本研究为临床治疗由该菌引起的貉肺炎提供了参考依据。     

一例鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定与治疗

为确诊田东县某鸡场20日龄雏鸡发病死亡的原因,无菌采集病死鸡脾脏、肝脏组织进行细菌分离培养鉴定,并进行药敏试验和致病性试验.结果:分离菌为革兰氏阴性杆菌,在麦康凯培养基、伊红美蓝培养基上均出现与大肠杆菌一致的生长特征,生化试验鉴定均符合大肠杆菌的生化特性,致病性试验表现为较高的致病性,药敏试验显示该菌对安普霉素、丁胺卡...     

一株兔源致病性大肠杆菌的分离与鉴定

对山东滨州某兔场送检的病死兔,进行病原菌的分离,对分离细菌进行形态学观察、生化试验、PCR鉴定、药敏试验和动物致病性试验。染色镜检、生化试验结果及PCR试验证实成功分离到一株O128型大肠杆菌,药敏试验结果证实,该菌株具有多重耐药性,致病性试验中,该菌株对昆明系小白鼠、仔兔均具有一定的致病性,该菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。