家蚕食道下腺组织学及超微形态的观察

<正> 食道下腺普遍存在于鳞翅目、精翅目和直翅目等许多昆虫中,很早就有学者做过研究,家蚕食道下腺起源于中胚层,关于食道下腺的生理功能,池用、蒲生、石谷户和三浦等曾进行过研究,赤井还通过电镜观察,发现食道下腺在幼虫期形成和分泌一种颗粒。但至今对食道下腺的生理功能仍不甚清楚,故有必要对它作进一步的探索,本试验通过组织学和超微形态的观察,系统地研究了食道下腺的形态结构,并且结合化性和蜕皮,探索食道下腺与滞育和蜕皮的关系。     

绵羊肉孢子虫可溶性蛋白抗原的特异性初探

应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分析绵羊肉孢子虫囊壁和不同种肉孢子虫滋养体蛋白带,结果表明:肌肉中消化分离出的羊犬肉孢子虫滋养体和从食道壁上挑出的巨肉孢子虫滋养体均出现三条电泳蛋白带;巨肉孢子虫全虫体可溶性蛋白出现五条蛋白带;巨肉孢子虫囊壁可溶性蛋白出现两条电泳蛋白带;微小住肉孢子虫滋养体可溶性蛋白出现一条电泳蛋白带。用不同种的滋养体可溶性蛋白抗原和巨肉孢子虫囊壁抗原做IHA试验表明:用羊犬肉孢子虫和巨肉孢子虫滋养体可溶性蛋     

牛皮蝇HA基因克隆及分泌型真核表达载体的构建

为了构建牛皮蝇的皮蝇素A(hypodermin A,HA)基因的分泌型真核表达载体pEF1α-HAAcGFP,并在Cos7细胞中表达与鉴定,试验从牛皮蝇中提取RNA,反转录成cDNA,扩增出HA基因,并在HA基因序列的上游加1段信号肽序列;通过双酶切将带有信号肽的HA基因序列克隆到真核表达载体pEF1α-IRES-AcGFP中,得到分泌型真核表达载体pEF1α-HA-AcGFP;再利用脂质体法转染Cos7细胞,并以RT-PCR和Western-blot技术在RNA和蛋白水平上检测HA基因是否在Cos7细胞中表达。结果表明:经双酶切及测序鉴定,分泌型真核表达载体pEF1α-HA-AcGFP构建成功;转染Cos7细胞后,在RNA和蛋白水平上能检测到HA基因的表达。说明成功构建了HA基因的分泌型真核表达载体PEF1α-HA-AcGFP。     

应激颗粒和抗病毒先天性免疫

病毒感染哺乳动物细胞过程中,病毒复制产生的基因组或病毒蛋白激活先天性免疫信号通路后,产生干扰素的同时诱导干扰素下游基因表达,促进细胞的抗病毒反应。与此同时,病毒感染宿主细胞还能引起胞质颗粒的聚集,其成份大多为核糖核蛋白,RNA结合蛋白、翻译起始因子等,这个聚集区域被称之为应激颗粒(stress granules,SG)。先天性免疫通路和SG都是宿主细胞对病毒感染的一种抵抗性反应,而与之相对,一些病毒却通过抑制SG和先天性免疫通路的形成来促进自身复制。由于SG中包含RNA结合蛋白以及一系列病毒或宿主的RNA,而先天性免疫中识别病毒RNA的模式识别分子也能特异性结合病毒RNA,那SG如何协同先天性免疫在宿主抗病毒中发挥一定的作用,本文就SG在病毒感染诱导的先天性免疫中的作用进行简要综述。     

DBNL蛋白影响A型流感病毒复制机制的研究

A型流感病毒(IAV)在宿主细胞内复制过程中需要许多宿主因子的参与,同时IAV也能调控多种宿主因子的表达。为寻找调控IAV复制的宿主因子,本研究通过SDS-PAGE电泳检测发现H1N1亚型流感病毒A/WSN/1933株(简写为WSN)感染A549细胞会上调表达55 ku左右的特异蛋白条带(感染后9 h),将该55 ku左右的蛋白条带切胶回收后进行质谱分析,根据质谱分析的筛选标准选择蛋白得分(Mass score)较高、谱图数(Matches)和序列数(Sequences)较为可信的宿主因子DBNL作为调控IAV复制的潜在研究对象进一步研究。本研究针对DBNL设计特异的siRNA和对照Scrambled si RNA,将其分别转染A549细胞,通过荧光定量PCR确定DBNL si RNA在转录水平的干扰效果显著;利用细胞活力测定试验确定DBNL si RNA的干扰不影响细胞活力。利用DBNL si RNA下调表达A549细胞中的DBNL后,以WSN感染该细胞,在感染后24 h、48 h分别收集细胞上清,利用MDCK细胞进行噬斑滴定试验。试验结果显示,与对照组相比,下调表达DBNL后IAV...     

布鲁氏菌分泌蛋白BPE005的亚细胞定位及与宿主细胞互作蛋白的筛选

【目的】 分析布鲁氏菌分泌蛋白BPE005的蛋白结构及细胞定位,筛选宿主细胞内与其存在相互作用的靶蛋白,为后续研究BPE005的生物学功能奠定基础。【方法】 通过生物信息学软件对BPE0005的蛋白结构进行初步分析;构建PDRRED2-C1-BPE005重组荧光定位载体,转染人胚肾上皮细胞293T,通过扫描激光共聚焦显微镜观察BPE005的细胞定位;构建PGBKT7-BPE005诱饵载体,验证诱饵载体是否有细胞毒性和自激活现象;以小鼠巨噬细胞RAW264.7 mRNA的cDNA文库为AD文库菌液,检测文库滴度,通过酵母双杂交系统筛选宿主细胞内与BPE005相互作用的靶蛋白。【结果】 布鲁氏菌分泌蛋白BPE005属于疏水性蛋白,内含有大量的无规则卷曲、α-螺旋和延伸链。成功构建PDRRED2-C1-BPE005荧光定位载体和PGBKT7-BPE005诱饵蛋白载体,BPE005定位于宿主细胞核。PGBKT7-BPE005诱饵蛋白载体无酵母细胞毒性和自激活现象,AD文库菌液滴度>2×10⁷/mL,筛选出4个宿主细胞内与BPE0005存在相互作用的蛋白:RNA聚合酶Ⅱ多肽G、补体因子H、鸟苷酸环化酶2G及颗粒蛋白。经复筛、测序、BLAST比对、一对一验证后,最终筛选出1个在宿主细胞内与BPE005具有较强相互作用的靶蛋白(RNA聚合酶Ⅱ多肽G)。对该蛋白的作用网络分析表明,RNA聚合酶Ⅱ多肽G对宿主细胞内mRNA的转录和合成具有重大影响。【结论】 布鲁氏菌分泌蛋白BPE005定位于宿主细胞核,在宿主细胞内可与RNA聚合酶Ⅱ多肽G产生较强相互作用,对进一步阐明布鲁氏菌感染过程中关键效应分子的作用机制具有指导意义。     

高山鼠兔消化系统中酶的分布和活性分析Ⅱ

为了掌握高山鼠兔消化系统中酶的分布和活性,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法,对高山鼠兔消化系统(食道、胃、小肠、大肠、盲肠、肝脏、胰脏)中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)同工酶进行分离、分析。结果表明:在高山鼠兔7种组织器官中,分离出SOD_1～SOD_(25)、电泳迁移率为0.809～0.033的25条谱带,酶活性顺序为肝脏胰脏小肠食道胃大肠盲肠;分离出POD_1～POD_(21)、电泳迁移率为0.647～0.088的21条谱带,酶活性顺序为肝脏胰脏食道小肠胃大肠盲肠。说明7种组织器官中SOD和POD同工酶的表达强度、谱带分布有所不同,存在明显的组织特异性。     

东北林蛙消化系统SOD和POD同工酶电泳分析

为了对东北林蛙的人工养殖和深入研究提供基础的生理生化指标依据,试验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法,对东北林蛙春季消化系统中食道、胃、肠道、肝脏4种器官组织的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)同工酶进行分离、分析。结果表明:东北林蛙消化系统中共分离出SOD1~SOD_(16)、电泳迁移率为0.649~0.034的16条谱带;共分离出POD_1~POD_(13)、电泳迁移率为0.814~0.093的13条谱带。4种器官组织中SOD和POD活性顺序相同,均为肝脏﹥食道﹥胃﹥肠道。     

重口裂腹鱼消化道黏膜的超微结构

用透射电镜技术对重口裂腹鱼消化道黏膜的超微结构进行了观察。结果显示:口咽腔和食道黏膜上皮均为复层上皮,上皮中存在大量粘液细胞,相邻细胞间通过发达的犬牙交错的桥粒紧密相连,表层和中间层细胞中有较多致密颗粒,表层细胞游离端表面有绒毛状突起。前肠吸收细胞微绒毛长而密,细胞质中线粒体、滑面内质网、粗面内质网、高尔基体发达。后肠吸收细胞微绒毛短而粗,终末网区中吞饮小泡较多。巨噬细胞中有多量溶酶体,其中见有凋亡细胞。2种形态的肥大细胞含大量分泌颗粒。肠黏膜上皮中存在少量凋亡细胞,其胞体、胞核和胞质均见有明显的形态学变化。     

雌性中华鳖输卵管精子储存结构的研究

应用光镜和电镜技术,系统观察雌性中华鳖输卵管精子储存情况,显示与精子储存有关组织结构与细胞形态。结果表明,精子储存在雌性中华鳖输卵管的蛋白分泌部后部至子宫部,但各段的组织结构及精子储存量存在一定差别。蛋白分泌部后部上皮较发达,由典型的高柱状纤毛细胞和分泌细胞构成,固有膜中腺体多为泡状腺。上皮和腺体中含有大量高密度的膜性分泌颗粒,此段只有少量的精子储存。峡部较窄且固有膜内无腺体,上皮排列紧密并呈迷路样迂回分布,上皮细胞内高电子密度分泌颗粒成团集中分布在核上方。峡部管腔中分布着大量的精子,靠近管腔的精子或精子头部嵌入上皮纤毛之间或顶端凹陷的胞质中,且精子嵌入部分的细胞结构保持完整。子宫前部形成垂直于管腔的储精小管(SST),子宫上皮及此段SST上皮的分泌颗粒电子密度不均,含高密度电子致密斑,腺体中的分泌颗粒也呈现不同的内部结构。子宫部及SST的管腔中储存有大量精子。这些区段复杂的细胞结构及分泌活动,可能在精子储存中发挥重要作用。     

CONTRAST‐ENHANCED ULTRASOUND OF THE NORMAL CANINE PROSTATE GLAND

Canine prostate gland abnormalities affect a large number of adult male dogs. In veterinary medicine, the commonly used methods to diagnose canine prostate gland disease are digital rectal examination and abdominal ultrasound. We evaluated the ability of ultrasound contrast agent to provide additional information about the vascularity of the canine prostate gland; such information could be useful in detecting early prostate gland disease and in staging disease known to be present. We characterized the ultrasonographic appearance of prostate gland vascularity in 10 healthy dogs before and after the injection of an ultrasound contrast agent (Levovist^?). Before injecting Levovist^?, the prostate gland blood flow was classified as poor in all dogs, whereas after contrast agent injection blood flow was classified as moderate or good, in 3 and 7 dogs respectively. Knowledge of the status of prostate gland vascularity could be useful for the characterization, diagnosis and therapeutic monitoring of canine prostate gland lesions.     

家蚕前胸腺超微形态的观察

通过电子显微镜观察了家蚕前胸腺超微形态的变化.在四龄龄初细胞基底膜很致密,细胞核不规则形.四龄中期以后.基底膜疏松,而呈纤维状,细胞核以细分枝伸向细胞全域.线粒体形状呈多态,马蹄状和环状线粒体明显增多.在四龄眠中和五龄吐丝期,细胞质中出现大型液胞和裂隙状液胞,粗面内质网和光面内质网一般是龄的后期比前期发达.     

保幼激素和蜕皮激素对家蚕离体后部丝腺吸收核酸和蛋白质标记前体的影响

用后部丝腺离体培养和示踪原子法,研究了保幼激素类似物和植源性蜕皮激素对家蚕后部丝腺吸收核酸和蛋白质标记前体的影响。离体后部丝腺对~3H-胸腺嘧啶核苷、~3H-尿嘧啶和~3H-甘氨酸的吸收活性均受培养液中激素的影响。在本试验培养时间内,总吸收量均以两种激素同时加入高于单种激素加入;在加入其中一种激素时,吸收活性还因供试幼虫发育时期的不同(五龄前期或后期)而表现出相反的趋势;吸收的~3H-甘氨酸参入后部丝腺蛋白质合成的比率,以加入保幼激素类似物时较低,加入蜕皮激素和两种激素同时加入时较高。因此认为,不同发育时期接受过不同内源激素作用了的后部丝腺,在短期的体外条件下对激素的反应是不同的;但五龄任何时期的后部丝腺,均是在两种激素共同作用下,比单种激素作用更有利于核酸和蛋白质的合成。     

鸡肾上腺神经的分布──WGA－HRP法研究

将ＷＧＡ－ＨＲＰ注入７５～９０日龄鸡肾上腺内，追踪支配鸡肾上腺传出神经元的胞体，结果显示：鸡肾上腺接受交感神经节前和节后神经元的支配，以节后神经元支配占主导；迷走神经的传出神经元也支配鸡肾上腺，并处于次要地位。     

成鸡卵巢嗜酸性细胞、卵泡外腺细胞和卵泡膜腺细胞微细结构的研究

对成鸡卵巢的嗜酸性细胞、卵泡外腺细胞和卵泡膜腺细胞作H.E染色、油红—O染色和电子染色,然后进行光镜和电镜观察。结果:嗜酸性细胞单个分布在卵巢基质中,形态不一。胞核形态多样,异染色质数量中等,核仁位于核的偏中心部位。胞质中有许多电子密度较高的圆形嗜酸性颗粒,高尔基复合体发育良好,粗面内质网数量中等,有少量嵴少、基质电子密度低的线粒体,其它细胞器较少,油红—O染色阴性。卵泡外腺细胞分布在卵泡之间,由数个细胞结合成一细胞团。细胞形态多样。胞核圆形或卵圆形,一至数个核仁,异染色质少。胞质中充满大小不一的卵圆形脂滴,线粒体嵴多、基质电子密度较高,有管状嵴和板状嵴,还有较多囊泡状的滑面内质网,粗面内质网数量少,油红—O染色阳性反应。卵泡膜腺细胞也是数个细胞结合成一细胞团,分布在卵泡膜内层,结构与卵泡外腺细胞极为相似,油红—O染色阳性。卵泡外腺细胞和卵泡膜腺细胞都具有分泌类固醇激素细胞的结构特征。     

两种生物肉毒杀鼠素诱鼠颗粒毒饵防治高原鼠兔田间小区试验报告

通过应用C.肉毒杀鼠素诱鼠颗粒毒饵和D.肉毒杀鼠素诱鼠颗粒毒饵进行防治高原鼠兔的田间小区对比试验,结果表明:两种诱鼠颗粒毒饵防治高原鼠兔的平均校正防治效果分别可达93.65%和91.56%,两药剂间防治效果差异不显著(F=1.6990.05)。且与常用药剂(0.1%C.肉毒杀鼠素燕麦毒饵)具有相同的防治效果。     

CONTRAST‐ENHANCED ULTRASONOGRAPHY OF THE NORMAL CANINE ADRENAL GLAND

Contrast‐enhanced ultrasonography is useful in differentiating adrenal gland adenomas from nonadenomatous lesions in human patients. The purposes of this study were to evaluate the feasibility and to describe contrast‐enhanced ultrasonography of the normal canine adrenal gland. Six healthy female Beagles were injected with an intravenous bolus of a lipid‐shelled contrast agent (SonoVue^®). The aorta enhanced immediately followed by the renal artery and then the adrenal gland. Adrenal gland enhancement was uniform, centrifugal, and rapid from the medulla to the cortex. When maximum enhancement was reached, a gradual homogeneous decrease in echogenicity of the adrenal gland began and simultaneously enhancement of the phrenicoabdominal vessels was observed. While enhancement kept decreasing in the adrenal parenchyma, the renal vein, caudal vena cava, and phrenicoabdominal vein were characterized by persistent enhancement until the end of the study. A second contrast enhancement was observed, corresponding to the refilling time. Objective measurements were performed storing the images for off‐line image analysis using Image J (ImageJ^©). The shape of the time–intensity curve reflecting adrenal perfusion was similar in all dogs. Ratios of the values of the cortex and the medulla to the values of the renal artery were characterized by significant differences from initial upslope to the peak allowing differentiation between the cortex and the medulla for both adrenal glands only in this time period. Contrast‐enhanced ultrasonography of the adrenal glands is feasible in dogs and the optimal time for adrenal imaging is between 5 and 90 s after injection.     

亚高山草甸6种主要牧草营养动态研究

分析了亚高山草甸的苔草、狼针草、羊茅、细茎鸢尾、裂叶蒿、蓝花棘豆６种牧草在各个生育期的粗脂肪、粗蛋白质、酸性洗涤纤维（ＡＤＦ）和钙、磷等营养成分的含量。结果表明，牧草中各种营养成分的含量动态与生长发育阶段密切相关。粗蛋白质和磷随生育期逐渐减少；ＡＤＦ和钙含量随着生育期逐渐增加。     

异黄酮植物雌激素:反刍动物营养生物学发展与应用前景

本文对异黄酮植物雌激素的种类、测定方法及在动物体内代谢规律进行了综述 ,同时也就该激素对生殖和乳腺发育双向作用进行了评述 ,最后对其研究和应用前景进行了展望     

THE COMPUTED TOMOGRAPHIC ENHANCEMENT PATTERN OF THE NORMAL CANINE PITUITARY GLAND

Dynamic computed tomography (CT) of the pituitary gland was performed on four healthy male dogs of similar size, weight and age. The pituitary gland region was first identified on lateral scout and transverse non-contrast images. After localization, water soluble iodinated contrast medium was administered intravenously as a bolus at a dose of 1 ml/lb using a pressure injector at an injection rate of 10 ml/sec and a total of 40 post contrast images of the pitutary gland were acquired. No images were made after 400 seconds. The same pituitary region was imaged in each slice. The slice thickness was 1.5 mm, with a two second scan time and an eight second delay between images (resulting in images every ten seconds). The contrast medium injection and initial image were acquired simultaneously, resulting in a non-contrast enhanced initial image. At the completion of the CT scan, a region of interest (ROI) was drawn around the pituitary gland and time density data were obtained. The mean pituitary Hounsfield number was plotted as a function of time. A bi-exponential least squares model was used to derive the best fitting line through the data. The mean relative peak increase in pituitary Hounsfield Units (HU) was 65.9% +/- 2.1%. After the initial increase there was a decrease in pituitary Hounsfield number with a half-time of 16.1 seconds, followed by a slower phase with a half-time of 16.5 minutes. The mean pituitary gland HU value during the period of gradual opacity decline was 35.0% +/- 4.4% above that of the pre-contrast image. Establishing the enhancement pattern in the canine pituitary gland is the precursor to the clinical application of dynamic CT of the pituitary gland to diagnose pituitary microadenomas and/or small macroadenomas before they become exceptionally large.