松材线虫萎蔫病在我国南方林区的流行能力

通过人工接种松材线虫测定6个“北带”马尾松种源和2个“中带”马尾松种源的3～6年生苗的感病性。接种苗枯死率为37.5%至80%,与马尾松在全国现有疫区内普遍不同程度自然发病枯死的情形一致。7个种源接种苗的平均枯死率(53.5%)低于黑松对照(89.4%)。表明国内的马尾松种源对松材线虫中等或中等以上感病。测定国内重要疫区的5个代表性松材线虫株对8年生黑松和3年生马尾松苗的致病力,枯株率分别为90%以上和30%～90%。由此分析了松材线虫萎蔫病在南方林区流行的极大可能性。     

松材线虫自然侵染后松树感病进程中光合作用及抗氧化酶活性的变化

根据松树针叶变色程度及流脂状况,野外分别选取不同感病阶段的黑松、马尾松为对象,以研究松材线虫自然侵染黑松和马尾松后,两种松树的光合作用及其相关生理生化变化过程。结果表明,黑松、马尾松在感病初期,针叶净光合速率(Pn)大于健康阶段数值,随后逐渐下降,感病重期为负值,即松材线虫的侵入破坏了黑松、马尾松的光合作用。由叶绿素荧光参数分析可看出,光合作用的下降是由于光合系统Ⅱ反应中心实际进行光化学反应的效率(ФPSⅡ)下降引起的,而ФPSⅡ的下降是由于PSⅡ反应中心捕获光能效率Fv'/Fm'下降和开放的PSⅡ中心数目qP下降共同导致。两种松树在感病进程中,针叶叶绿素含量和类胡萝卜素含量整体呈下降趋势,但在感病初期含量上升,这也是引起光合作用速率下降的因素之一。此外,针叶含水量变化也一直呈下降趋势,是引起松树萎蔫,叶绿素含量下降,光合作用速率下降的主要原因之一。实验表明,随着松材线虫侵染的加重,植株体内与抗性相关的抗氧化酶系统活性也会发生变化。黑松和马尾松过氧化氢酶(CAT)活性随着感病进程逐渐下降,过氧化物酶(POD)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性略有上升,但不显著,说明松材线虫的侵入破坏了黑松、马尾松的抗氧化酶系统,导致松树自我保护作用减弱,同时由于两种松树热耗散能力(NPQ)的下降,产生的多余电子进一步破坏了抗氧化酶系统,导致光合速率下降。研究表明,松材线虫的侵染,对寄主光合作用产生了破坏,同时寄主也作出相应防御反应,但随着松材线虫的大量繁殖,寄主自身保护作用逐渐丧失。     

几种松树松材线虫病木和健木pH值差异的研究

 对江苏、安徽2疫区的黑松、赤松、马尾松、火炬松、湿地松等5个树种松材线虫病Bursaphelenchus xylophilus的病、健木pH值差异性分析结果表明:感病品种黑松、赤松、马尾松病木pH值降低,且差异显著;较抗病的湿地松虽然也降低,但差异不显著;抗病性强的火炬松病木pH值反而高于健木,且差异显著。由此可见,不同松树品种松材线虫病的病、健木pH值的差异性也不同,对松材线虫越敏感和受害越严重的,其病木pH值降低的就越多,与健木pH值差异就越显著。该分析结果初步为我国松材线虫为害比较严重的几种主要松树品种,利用指示剂进行松材线虫病快速检测的可行性提供了一个依据。     

松褐天牛与马尾松大量萎蔫死亡关系的调查

马尾松萎蔫死亡主要是由松褐天牛携带的松材线虫侵害引致。由于马尾松不是松材线虫的感病松属,对松材线虫的繁殖存在一定的抗性。松材线虫疫区马尾松所以大量快速死亡,不但与松材线虫及其主要传播媒介松褐天牛幼虫为害有关,而且与松材线虫侵入后,使大量已受松突圆蚧为害生势衰退的马尾松更趋衰弱,从而引致除松褐天牛外,还有赤梗天牛、松白星象等已查明的8种专门为害生势衰弱马尾松的害虫迅速繁殖为害有关。不及时砍伐快速死亡马尾松灭虫的疫区尤其严重。病虫综合为害是疫区马尾松大量萎蔫死亡的基本因素。     

马尾松(Pinus massoniana)感染松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的研究

 1987-1988年在江苏南京-镇江松材线虫疫区内采(征)集143份自然枯死或濒死马尾松样本,在94份(65.7%)样本中查见松材线虫。有关林分中马尾松的病枯情况不一,在句容桥头一下蜀一线、江宁汤山和六合方山等处有过相当多的马尾松发病死亡。表明松材线虫是当地马尾松自然枯死的主要原因。人工测定了无黑松林区5年生浙江富阳马尾松苗及混栽黑松林区4-5年生江苏马尾松苗对两种松材线虫分离物的反应,结果指出,供试松苗都表现中度感染或高度感染,并有20%或70-80%的病枯株。接种林间马尾松,初步证实马尾松对松材线虫的抗性随树龄变化。1-2年生马尾松苗高感松材线虫,病枯株率高达85.7%;树龄25年以上的成材树病枯株率约30%;而10年左右的幼树则无一发病死亡。     

马尾松(Pinus massoniana)感染松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的研究

1987—1988年在江苏南京—镇江松材线虫疫区内采(征)集143份自然枯死或濒死马尾松样本,在94份(65.7%)样本中查见松材线虫。有关林分中马尾松的病枯情况不一,在句容桥头一下蜀一线、江宁汤山和六合方山等处有过相当多的马尾松发病死亡。表明松材线虫是当地马尾松自然枯死的主要原因。人工测定了无黑松林区5年生浙江富阳马尾松苗及混栽黑松林区4—5年生江苏马尾松苗对两种松材线虫分离物的反应,结果指出,供试松苗都表现中度感染或高度感染,并有20%或70—80%的病枯株。接种林间马尾松,初步证实马尾松对松材线虫的抗性随树龄变化。1—2年生马尾松苗高感松材线虫,病枯株率高达85.7%;树龄25年以上的成材树病枯株率约30%;而10年左右的幼树则无一发病死亡。     

雪松和黄山松对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的抵抗性

 过去3年的调查表明,在江苏南京镇江松材线虫病区内雪松(Cedrus deodara)自然枯死相对很少,在采得的22株枯死雪松松材中,从未查见松材线虫。在1987-1989年用松材线虫分离物1号、3号或4号(分别分离自江苏和深圳罹病黑松Pinus thunbergii和马尾松P.masso-niana病材中),分5次接种60株4或7-8年生雪松苗或20多年及30多年生雪松树,仅2株4年生接种苗发病死亡,从死苗中分离到的松材线虫数量远低于接进的虫量。可见雪松苗期至成材期在江苏病区都能高度抵抗松材线虫。     

日本松材线虫和南京松材线虫对雪松和马尾松的致病性研究

用来自日本的木质包装材料上截获的松材线虫和南京松材线虫进行对雪松Ｃｅｄｒｕｓｄｅｏｄａｒａ和马尾松Ｐｉｎｕｓｍａｓｏｎｉａｎａ的致病力试验，发现日本松材线虫能使４～５年生雪松苗２０％发病，１０％左右枯死，而南京松材线虫则没有致病力；１０年生雪松对两种松材线虫具有高度抗性。这两种松材线虫都能使马尾松中度感病和１０％左右的枯死     

雪松和黄山松对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的抵抗性

过去3年的调查表明,在江苏南京镇江松材线虫病区内雪松(Cedrus deodara)自然枯死相对很少,在采得的22株枯死雪松松材中,从未查见松材线虫。在1987—1989年用松材线虫分离物1号、3号或4号(分别分离自江苏和深圳罹病黑松Pinus thunbergii和马尾松P.masso-niana病材中),分5次接种60株4或7—8年生雪松苗或20多年及30多年生雪松树,仅2株4年生接种苗发病死亡,从死苗中分离到的松材线虫数量远低于接进的虫量。可见雪松苗期至成材期在江苏病区都能高度抵抗松材线虫。黄山上4年生黄山松(P.taiwanensis)苗在南京人工接种条件下,对松材线虫分离物1号及3号都高度感染,20株接种苗全部发病死亡。     

黑松13个抗病家系对松材线虫的抗性反应及组织病理学观察

 为评估自日本引进的抗性黑松对松材线虫(Pine Wood Nematode,PWN)的抗病性,选用3个不同来源的PWN强毒和中强毒虫株采用皮接法接种,对1.5年生的黑松13个优良家系进行抗病性测定。结果表明,引进的黑松大部分家系对3个PWN虫株都表现出一定的抗病性,但针对不同虫株,抗病各家系间差异明显,其中有7个家系(3、4、5、6、9、11和12号)表现良好。同时,为探讨引进黑松家系感染PWN后的组织病理反应,对12号抗性家系进行组织病理学研究。观察表明,松材线虫在抗性黑松和普通黑松中的纵向扩散速度差别不明显,但其在抗性黑松内的横向扩散速度比在普通黑松内要慢,且抗性黑松体内木射线细胞和围绕树脂道泌脂细胞的薄壁细胞,出现病变要比普通黑松晚;在接种后同一时间取茎段的同一部位发现,抗性松苗组织解剖结构及细胞的病变和破坏程度要比普通松苗轻。     

松材线虫侵染对马尾松、黑松水分及其相关代谢的影响

 以盆栽马尾松(Pinus massoniana)幼苗和离体水培黑松(P.thunbergii)、马尾松为材料,研究了松材线虫(Bursaphe-lenchus xylophilus)侵染对寄主水分、游离脯氨酸及叶绿素含量的影响以及由此引起的幼苗萎蔫与干旱萎蔫间的差异。松苗和离体枝接种松材线虫后,茎部相对含水量逐渐下降,早期下降缓慢,中后期加快。叶片变化滞后于茎部,相对含水量的明显下降发生在叶片褐变萎蔫症状出现之后(病害发展后期)。游离脯氨酸含量、叶绿素含量变化完全随叶片相对含水量的变化而变化。水分状况是影响受侵植株叶片脯氨酸和叶绿素含量的决定因子。自然干旱枯萎和由松材线虫侵染引起枯萎的松幼苗,两者从枯萎方式到茎、叶相对含水量的变化均存在显著差异。     

松材线虫对黑松一些生理生化指标的影响（英文）

 松材线虫病是松树的一种毁灭性病害。本文对接种松材线虫后3~4年生黑松茎部的一些生理生化指标的变化进行了研究。结果显示,接种线虫后,松苗的可溶性糖含量降低,在病情发展中期和后期比早期降低更显著。松苗的可溶性蛋白质和抗坏血酸含量逐渐降低,游离氨基酸含量也降低。松树茎部的可溶性蛋白质含量可用于病害的早期诊断。此外,对这4个生理生化指标在病害致病机理中的作用进行了讨论。     

松材线虫病组织病理学研究

 利用马尾松水培离体松枝作接种试验材料,对松材线虫侵染早期寄主细胞和组织所发生的一系列病理变化作了观察。切片结果表明,接种枝树脂道的细胞最先受到线虫侵袭的破坏。由核变形、胞质凝聚标志的轴向和射线薄壁细胞的死亡,是寄主对线虫侵染的第一个明显的组织病理学反应。这一反应随线虫侵入时间而日益显著,死亡薄壁细胞数量和程度上的逐步增加,反映了病害的发展进程。     

马尾松松材线虫病与松材蓝变相关性研究

 研究表明:松材线虫引起的马尾松(Pinus massoniana)病树死亡后期,必然有蓝变(Blue-stain)现象。松材蓝变程度与松树树干部位相关性不大。但是,对于同一棵树,若蓝变程度高,则每一部位的蓝变程度都比较高;若蓝变程度低,则每部位的蓝变程度可能都比较低。蓝变程度与松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的含量也没有正相关关系。在松材线虫病木的检疫过程中,松木蓝变仅可以作为松材线虫病的参考指标。     

黑松感染松材线虫后几种有机酸含量的变化

 Changes of benzoic acid, phenylacetic acid and salicylic acid contents in stem of 3-4 year old Pinus thunbergii inoculated with Bursaphelenchus xylophilus were studied by HPLC. The results showed that after nematode infection, contents of benzoic acid and salicylic acid in the stem of Pinus thunbergii increased gradually and then decreased when serious disease occurred, while content of phenylacetic acid increased at early stage and decreased at later stage of the disease. The role of benzoic acid, pbenylacetic acid and salicylic acid during the development of the disease was discussed.     

Development of a water-soluble preparation of emamectin benzoate and its preventative effect against the wilting of pot-grown pine trees inoculated with the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus

Water-soluble preparations have been investigated to develop a trunk injection agent based on the poorly water-soluble anti-nematode emamectin benzoate. Following tests on the phytotoxicity of some solvents and solubilizers and demonstration of the ability of some solubilizers to dissolve emamectin benzoate in water, acetone + methanol was selected as the solvent and Polysorbate 80 as the solubilizer. This water-soluble preparation of emamectin benzoate prevented the wilting of pot-grown 4-year-old trees of the Japanese black pine, Pinus thunbergii, artificially inoculated with the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, at a dose of 20 g emamectin benzoate per cubic metre of pine tree.     

Relationship between resistance to pine wilt disease and the migration or proliferation of pine wood nematodes

To study the relationship between resistance to pine wilt disease and the migration or proliferation of pine wood nematodes (PWN) (Bursaphelenchus xylophilus), we conducted experiments using clonally-propagated Japanese black pines (Pinus thunbergii) with pre-evaluated individual resistance levels. Bark including the cortical resin canals—one of the main migration pathways of PWN—was removed by girdling, but neither the migration of PWN nor symptom development of pine wilt disease were inhibited by this treatment in non-resistant clones. Histological observations showed no significant differences in the lumen area or the number of cortical- and xylem- axial resin canals between resistant and susceptible clone groups from a half-sib family. A bioassay using methanol extracts from resistant and susceptible clones showed that extracts from both clones showed similar attractant effects to PWN, but neither had repellent effects. The resistant clones were multi-inoculated with PWN into three split points to mimic migration in the stem. The proportion of damaged plants was not significantly different from that in single-inoculated plants (control). In this experiment, the number of PWN detected from partially-damaged plants was much higher than that from non-damaged plants. An inoculation test using stem cuttings showed that the population of PWN increased in susceptible cuttings at 1–20 days after inoculation (dai), while it remained unchanged or gradually decreased in resistant cuttings. These findings suggested that the factors contributing to resistance were associated with inhibiting the proliferation of PWN, rather than inhibiting their migration.     

松材线虫伴生细菌与松树萎蔫病关系的初步研究

利用马尾松水培离体松枝作接种材料,接种消毒后的松材线虫、线虫虫体上分离到细菌分离物GD1以及两者的混合体。结果表明,单独接种消毒后的松材线虫蔌细菌分离物GD1均不能使松枝萎蔫,只有两者混合接种才能使松枝发病枯死。从而说明了松材线虫的伴生细菌对松树萎蔫病的发生起着重要的作用。     

Susceptibility evaluation of Picea abies and Cupressus lusitanica to the pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus)

Pine wilt disease (PWD), recently introduced into Europe, is caused by the pine wood nematode (PWN) Bursaphelenchus xylophilus and is a devastating illness that affects mainly pine trees. It is known that the PWN is capable of infecting other conifers; however, there is currently no information on which other plant species may be susceptible to PWD. In this study, the potential susceptibility of two common species of European forests, Picea abies and Cupressus lusitanica, to PWN was assessed through the monitoring of visual external symptoms, dimension and localization of the nematode population in stems, quantification of total chlorophyll, total soluble phenolics and lignin, at 7, 14, 21 and 28 days after inoculation. The degree of susceptibility was established through the comparison of symptoms with Pinus pinaster, a well‐known PWN host. Furthermore, the stem ultrastructure of P. abies, C. lusitanica and Pn. pinaster was analysed by scanning electron microscopy. The results suggest that P. abies and C. lusitanica are resistant to PWN, and that lignin biosynthesis in these species is affected at an early stage of the infestation. Nevertheless, P. abies seems to be a compatible host that could act as a repository for PWN.