猪传染性胃肠炎分子生物学诊断方法研究进展

检测TGEV的方法主要有病毒的分离鉴定、免疫荧光抗体试验、病毒中和试验、电镜观察、免疫电镜观察、ELISA方法、核酸探针杂交技术、限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析,RT-PCR和荧光定量PCR等,伴随着对TGEV基因组分子生物学的深入研究,一系列分子生物学诊断技术不断出现,现对猪传染性胃肠炎病毒的分子生物学诊断方法的研究进展作以综述。     

猪两种腹泻病毒混合感染的病原诊断

对我省流行的疑似猪病毒性腹泻进行了病原诊断，通过细菌培养、ＲＮＡ电泳和电镜形态观察等辅助诊断和免疫萤光特异性诊断，确诊该病病原为猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）与猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）的混合感染，混合毒代号为ＴＰＶ３。     

应用免疫磁珠纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒的研究

为探讨应用免疫磁珠纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒的可行性,利用猪圆环病毒2型病毒样颗粒抗原特异性免疫磁珠,对经IPTG诱导表达的重组菌pET30a-Cap2d/Rosetta目的蛋白进行纯化,之后电镜观察纯化效果.结果显示,免疫磁珠可以特异性地结合猪圆环病毒2型病毒样颗粒.结果表明,应用免疫磁珠纯化猪圆环病毒2型病毒样颗...     

VP2蛋白Cys-402、Cys-214对猪细小病毒VLPs影响的初步研究

试验以猪细小病毒VP2 Cys-402(A)、Cys-214(B) 定点突变体为基础,将突变体真核表达载体转染COS-7细胞及核酸免疫猪细小病毒抗体阴性的小白鼠,通过电镜技术和流式细胞仪技术探讨突变Cys-402、Cys-214对猪细小病毒病毒样颗粒的影响,旨在寻找利于外源基因插入的病毒样颗粒内部位点.电镜和小白鼠核酸免疫试验结果表明:Cys-214对病毒样颗粒的组装和免疫原性的发挥是必需的,其突变后不能促使VP2形成病毒样颗粒,更不能在免疫后的小白鼠血清中监测出相应抗体的存在;而Cys-402的突变并不干扰病毒样颗粒的形成和免疫原性的发挥.由此可以推测Cys-402及其附近可能存在利于外源基因插入的位点.     

青海地区猪流行性腹泻的病原诊断

对青海地区疑似猪流行性腹泻病料进行了细菌学和轮状病毒核酸电泳的诊断。试验结果:排除了致病菌和轮状病毒的病原感染;乳猪回归试验,复制出与自然病例相同的临床症状;病料经处理后与猪流行性腹泻病毒免疫血清发生特异性凝集;与猪传染性胃肠炎病毒荧光抗体染色呈阴性反应;与猪流行性腹泻病毒免疫血清进行间接荧光染色时,在细胞浆内见到了特异性荧光;电镜观察到冠状病毒科的病毒颗粒。从而确诊青海地区猪流行性腹泻病原为猪流行性腹泻病毒,代号为PEDV—青毒1株。     

猪圆环病毒检测技术研究进展

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒(PCV)感染引起的,以免疫抑制为特征的一类病毒性传染病,临床表现主要是由PCV-2引起的仔猪断奶后多系统衰竭综合征。文章就近几年国内外对该病毒检测技术,包括病毒分离、电镜观察、聚合酶链式反应、间接免疫荧光试验、免疫组织化学技术、酶联免疫吸附试验、原位核酸杂交试验等的研究进展做了阐述。     

猪流行性腹泻病毒野毒株/疫苗株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

开放阅读框3(Open reading frame 3,ORF3)是猪流行性腹泻病毒(PEDV)基因组中的惟一辅助基因。前期研究表明,PEDV疫苗株的ORF3在245²93位缺失49个核苷酸。在ORF3缺失区域两端设计合成引物建立反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)可以对PEDV野毒株和疫苗株进行鉴别诊断,野毒株扩增产物为319 bp,疫苗株扩增产物为270 bp。用该鉴别诊断方法对猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒和猪繁殖和呼吸综合征病毒的cDNA进行扩增均无特异性条带,说明该方法特异性强。现地病料的检测结果表明,该鉴别诊断方法能够区分PEDV野毒和疫苗株,而且可以排除其他病毒的影响,有助于减少免疫猪被淘汰的可能,降低经济损失。     

猪圆环病毒检测技术研究进展

猪圆环病毒是近年来新发现的畜禽病毒之一,疑为一种潜在人兽共患病病原,具有重要的经济意义。文章就其检测技术,如病毒分离、电镜观察、聚合酶链式反应(PCR)、多重PCR、多重套式PCR、定量竞争性PCR、PCR 限制性片段长度多态性分析(PCR RFLP)、免疫组织化学技术(IHC)、原位杂交技术(ISH)等的研究进展做一阐述。     

猪圆环病毒病病原学及流行病学研究进展

猪圆环病毒（PCV）首先是由德国学者Tischer等在传代的PK—15细胞中发现,当时他观察到一种形态类似小RNA病毒的圆型小颗粒病毒,该病毒可以持续感染PK—15细胞,不会引起细胞病变。1982年,Tischer等用超速离心法提取了病毒及核酸,鉴定了病毒的核酸类型,观察了病毒形态,首次证实是一种单链环状DNA病毒,并命名为猪圆环病毒（PCV）。随后,Tischer、Allian用从PK—15细胞中分离的PCV人工感染猪,没有引起任何临床症状和病理变化,当时认为PCV只是一种可以感染猪但不引起发病的病毒,对猪不造成危害。1991年Clark报道,     

应用免疫电镜技术检查猪传染性胃肠炎病毒和轮状病毒(上)

本文提出了应用免疫电子显微镜技术(IEM),作为检测和鉴定幼猪胃肠炎病例的粪便和肠内容物中的传染性胃肠炎病毒和轮状病毒(呼肠孤病毒样因子)的一种辅助诊断方法;并测定了应用直接IEM时的有关变数及其敏感性。在与同种的康复期抗血清相混合的病毒样品中,看到了被覆特异性抗体的病毒凝聚物;但是,在与感染前的血清或异种病毒所产生的抗体相混合的对照样品中则未见到。利用家兔抗猪IgG来加强聚集病毒抗体复合物的间接IEM,比直接IEM检出病毒的敏感性至少可提高10倍。用该技术研究了猪轮状病毒的大小和形态,其颗粒直径为55—70毫微米,并具有壳粒结构。在形态学上,猪轮状病毒与小牛和人的轮状病毒相似。应用IEM对每个病毒的特异性抗血清进行观察,发现猪轮状病毒在抗原性上与这两种病毒有关,与呼肠孤病毒3型则无关。     

猪圆环病毒诊断方法研究进展

文章就猪圆环病毒病毒实验室检测技术,包括病毒分离、电镜观察、聚合酶链式反应、间接免疫荧光试验、免疫组化技术、荧光定量PCR等方法的研究做了阐述,旨在提升行业对圆环病毒的检测和防控策略。     

RT—PCR快速诊断猪流行性腹泻

猪流行性腹泻病毒(PEDV)属于冠状病毒,是一种猪肠道病原性腹泻病毒.其感染猪表现的临床症状与猪传染性胃肠炎(TCE)十分相似.虽然通过细胞培养可以进行病毒分离、诊断PEDV感染,但是PEDV只能在Vero细胞中繁殖,而且通常需要胰蛋白酶参与的情况下盲传数代,因此,有必要建立一种病原鉴别诊断方法.     

猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒的多重PCR诊断临床应用研究

为了研究规模猪场病毒性疾病早期、快速诊断方法,试验采用多重PCR方法对来自宁夏灵武地区某种猪场的临床血清进行了猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)的病原诊断。结果表明:在哺乳仔猪、保育猪、母猪及种公猪中均检测出PRV、PCV-2阳性个体,PCV-2的阳性率达87.5%,PRV的阳性率为12.5%,但未检测出PPV。临床样品主要为PCV-2和PRV混合感染,阳性率达45.3%,其中1头主要采精的长白种猪携带有PCV-2和PRV。因此,推断该场仔猪发病可能与种公猪的带毒有关,建议该场仔猪全群免疫,同时对感染与带毒种猪群进行净化。     

猪圆环病毒病2型诊断技术的研究进展

猪圆环病毒(PCV)是迄今为止发现的一种最小的脊椎动物病毒,可引起断奶仔猪进行性消瘦、淋巴组织等组织病变的一种多系统衰竭综合征的重要传染病,临床上主要与断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、仔猪先天性震颤(CT)、坏死性间质性肺炎(PNP)及母猪繁殖障碍等疾病有关。根据病毒致病性的差异,以及核苷酸序列和抗原性的不同,将猪圆环病毒分成无致病性的猪圆环病毒1型(PCV1)和具有致病性的猪圆环病毒2型(PCV2)。本文从病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断等方面综述了当前国内外PCV2常用的实验室诊断方法的研究进展,可为临床上猪圆环病毒病的确诊提供参考。     

猪细小病毒病诊断技术研究进展

猪细小病毒病是由猪细小病毒(PPV)感染引起的猪的重要传染病之一。该病主要感染母猪特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪,导致母猪流产、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪等,而感染母猪本身无明显症状。该病呈地方性流行,严重地影响着养猪业的发展。由于猪细小病毒常与其他病毒如猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染,导致断奶仔猪多系统衰竭综合征。临诊上本病与猪伪狂犬病、猪乙型脑炎和猪布鲁氏菌病的症状极为相似,故仅靠临诊确诊较为困难。目前对本病的诊断方法主要有临床诊断、病原学诊断、血清学诊断以及分子生物学诊断等。特别是分子生物学诊断方法以其灵敏度高、特异性强而被人们所重视。主要针对该病近年来诊断方法的研究进展进行阐述,从而为猪细小病毒病的诊断提供参考。     

猪流行性腹泻与猪传染性胃肠炎病毒的电镜和免疫电镜观察

应用电镜（ＥＭ）和免疫电镜（ＩＥＨ）技术对猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）和胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）进行了观察。ＥＭ结果表明两者在形态上存在有细微差异：ＰＥＤＶ为多形性,粒子大小变化范围较大,纤突短小而密集,核芯呈多形性;ＴＧＥＶ为圆形,或椭圆形,粒子大小较均一,纤突大而稀疏,核芯为环形。ＩＥＭ结果ＰＥＤＶ与ＴＧＥＶ无免疫交叉反应。可应用ＥＭ和ＩＥＭ对ＰＥＤＶ和ＴＧＥＶ做实验室诊断。     

规模猪场圆环病毒病的诊断与防控

<正>猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)首先由Tischer于1974年在PK-15猪肾传代细胞系中发现。1982年通过对该病毒的处理用电镜观察核酸状态,首次揭示了这种单链环状DNA病毒并命名,是迄今发现的最小动物病毒之一。该病毒是圆环病毒科圆环病毒属成员,为单股DNA病毒,目前已知该病毒有两个血清型,即PCV1和PCV2。PCV1为非致病性病毒,接种试验猪不能观察到临床症状。PCV2为致病性病毒,是断奶猪多系统衰竭综合征的病原体,该病毒对外界的     

应用ELISA(双抗体夹心法)检测猪流行性腹泻病猪粪便中的病毒抗原

应用猪流行性腹泻(PED)—ELISA直接法(双抗体夹心法)对120头健康猪和5头猪传染性胃肠炎(TGE)病猪粪便标本进行检测,均不出现交叉反应;对15头PED病毒实验感染仔猪粪便标本检测,全部呈阳性;将对3(?)份ELISA阳性粪便标本和3份阴性标本的检测结果与电镜观察结果比较,其阳性符合率为97.37％,阴性符合率为100％;对在PED发病季节从不同地区采集的腹泻病猪粪便标本112份检测结果,阳性率为60.71％,而阴性反应的标本,绝大多数是在病愈后15～20d采集的。     

猪流行性腹泻病毒检测方法研究进展

介绍了猪流行性腹泻病毒实验室检测方法的研究进展,在细胞生物学方面,主依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等检测方法;在分子生物学方面,主依靠核酸杂交技术、RT—PCR法和实时荧光定量RT—PCR法等检测方法。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者提供参考。     

猪捷申病毒检测方法研究进展

猪捷申病(PTD)是危害养猪业的一种重要传染病,论文概述了猪捷申病毒(PTV)实验室检测方法的研究进展.在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等.在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起的RT-PCR技术和实时荧光定量RT-PCR技术等.介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考.