GnRH脉冲对体外原代培养大鼠GTH细胞中FSHβ mRNA表达水平的影响

为了从分子水平阐述不同脉冲频率促性腺激素释放激素(GnRH)对促性腺激素(GTH)分泌促卵泡素(FSH)的影响,采用细胞体外培养技术结合荧光定量PCR技术,研究体外培养大鼠原代垂体细胞在不同脉冲频率GnRH刺激下,细胞FSHβ mRNA的变化.在相同振幅条件下,低频刺激(120 min间隔)时,FSHβ mRNA表达水...     

褪黑素调控动物生殖内分泌的研究进展

褪黑素(MLT)是松果体分泌的一种神经内分泌激素,具有参与免疫反应、调节生命活动的节律性等多种生物学功能,并与生殖内分泌息息相关。目前对于褪黑素的研究主要集中在人类的癌症和植物等方面,而关于动物生殖内分泌的研究较少,深度较浅。研究表明,褪黑素可以调控动物下丘脑-垂体-性腺轴生殖相关激素的内分泌作用,抑制或促进促性腺激素释放激素(GnRH)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、性腺激素的分泌。而在不同物种间,褪黑素作用效果却不同。论文综述了褪黑素对促性腺激素释放激素、促卵泡素、促黄体素、性腺激素以及其他与生殖相关激素的调控,为褪黑素调控动物生殖内分泌的的研究提供参考,以期对褪黑素在动物生殖调控中的作用更深入了解。     

山羊GnRH和促性腺激素的释放特点

通过外科手术分别连续收集活体山羊中黄体期及早卵泡期的垂体门脉血样和外周血样，经放射免疫测定，山羊中黄体期和早卵泡期的促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）、促黄体生成素（ＬＨ）和促卵泡素（ＦＳＨ）均呈波动式释放。在早卵泡期，ＦＳＨ单位时间内波动次数和血浆平均水平显著高于中黄体期；ＧｎＲＨ与ＬＨ的波动型基本一致，ＦＳＨ的变化不太规则。表明山羊垂体促性腺激素的释放受丘脑下部ＧｎＲＨ的调节，但ＦＳＨ似乎还存在其他调节机理。     

促性腺激素释放激素二聚体对公猪繁殖机能的影响

应用促性腺激素二聚体(GnRH-TD)对12头4月龄公猪进行主动免疫,观测内源促性腺激素(GnRH)的变化.注射GnRH-TD与卵清蛋白(OVA)的偶联物3次,结果发现GnRH-TD能降低血清睾酮浓度和睾丸重量.组织切片显示,曲细精管的精原细胞有少数退化.实验结果表明:公猪接种GnRH-TD-OVA能诱发免疫反应,中和内源GnRH的生物活性,且抑制睾酮的合成,从而导致性器官发育受阻,达到去势的目的.     

促性腺激素释放激素及其类似物在母猪繁殖中应用的研究进展

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH))是下丘脑分泌的生殖激素,主要通过下丘脑-垂体-性腺轴参与调控动物的生殖活动,也可直接作用于性腺或其他器官发挥重要功能。哺乳动物的GnRH具有相同的十肽结构,通过改变十肽结构中第六、九、十位氨基酸可合成不同的GnRH类似物。GnRH及其类似物可通过刺激促黄体素(LH)分泌、抑制雌激素受体二聚化及调节胚胎附植期相关蛋白质的合成来影响动物的繁殖性能。GnRH及其类似物已被证明可提高猪的繁殖力。在母猪生产中,GnRH类似物的应用仍存在受胎次影响、促进排卵但不能增加产仔数等问题。文章主要从GnRH的来源与功能、GnRH及其类似物的结构、GnRH受体(GnRHR)的结构与功能、GnRH及其类似物对母猪繁殖性能的影响,以及存在的问题与展望五方面介绍了GnRH及其类似物在母猪繁殖中的应用研究进展。     

GnRH的生物学作用及其类似物在马属动物中的应用研究进展

繁殖率低是制约马属动物产业发展的瓶颈,繁殖调控技术不完善也是导致该产业发展缓慢的主要因素。促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone,GnRH）是下丘脑分泌产生的神经激素,在下丘脑-垂体-性腺轴通路中起关键作用。GnRH可以有效促进马属动物卵泡发育及排卵。GnRH是具有十肽结构的化合物,通过改变十肽结构中不同位置的氨基酸合成不同的GnRH类似物。GnRH及其类似物可通过刺激卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）和黄体生成素（luteinizing hormone,LH）的分泌、抑制雌激素受体的合成影响动物繁殖性能。GnRH及其类似物已被证明可提高马属动物的繁殖性能。对GnRH和促性腺激素释放激素受体（gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR）的结构特点、生物学功能以及GnRH类似物在马属动物繁殖方面的应用研究进展进行综述,以期为探究GnRH生物学作用的分子机制以及GnRH类似物在马属动物繁殖调控中的科学应用提供参考。     

催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制…

利用无血清培养的鸡泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对泡膜在醇激素合成的作用。用不同剂量的ＲＰＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌醇（Ｅ３）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成了Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＲＰＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ合成，     

鹅GnIH基因克隆及其在卵泡发育中的表达规律研究

为研究促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)基因表达与鹅卵泡发育间的关系,对鹅GnIH基因的CDS区序列进行了克隆与分析,并采用荧光定量PCR检测了该基因在产蛋高峰期鹅的不同大小卵泡中的表达量.序列分析结果表明,所获得的鹅GnIH基因CDS区长471 bp,编码157个氨基酸,与已知的其它鸟类GnIH相似性达87％.鹅GnIH前体包括3个“LPLRF”,具有典型的“LPXRF-酰胺”基序.荧光定量结果表明,鹅GnIH在所有不同大小的卵泡中均有表达,其表达量在卵泡发育过程中呈现规律性变化,总趋势是先增高后降低,且在直径4～5 mm的卵泡中表达量最高.研究结果显示,鹅卵泡GnIH基因的表达与卵泡选择性发育有关,且该选择过程可能发生在直径为4～5mm的卵泡.这一研究可为探讨季节性繁殖禽类卵泡发育的调控机理奠定基础.     

促性腺激素释放激素对兔雌性生殖系统发育的影响

将 2 1只处于间情期的雌兔 ,随机分成试验组和对照组 ,试验组每只肌注 1 m L( 1 5μg)促性腺激素释放激素 ,然后分 7个阶段取材观察卵巢和子宫的形态学变化。结果表明 ,注射促性腺激素释放激素可促进兔卵泡发育、成熟及排卵 ,加速黄体形成 ,促进子宫内膜增殖和内膜腺的发育     

定时输精程序对难孕牛繁殖效率的影响

为了研究定时输精程序对产后难孕泌乳牛受胎率的影响,试验将40头已产3胎、体况良好、膘情适中、产后3个情期以上配种未孕中国荷斯坦成年母牛随机分为2组,每组20头。试验1组不进行激素处理,采用自然发情配种的方法;试验2组采用定时输精程序处理,统计分析两组的参配率和受胎率,同时对试验2组中有发情表现的母牛与未观察到发情表现的母牛的受胎率进行比较。结果表明:试验1组的参配率为5%,试验2组的参配率为100%,两组参配率差异极显著(P<0.01)。试验1组的受胎率为5%,试验2组的受胎率为40%,两组的受胎率差异显著(P<0.05)。试验2组中有发情表现母牛的受胎率为100%,没有发情表现母牛的受胎率为7.69%,两者的受胎率差异极显著(P<0.01)。说明定时输精程序提升了难孕母牛的受胎率且效果明显,试验2组中有发情表现母牛的受胎率高于无发情表现母牛。     

阉割对公马促性腺激素细胞及血中促性腺激素水平的影响

利用免疫组织化学和形态计测学的方法 ,观察了 7匹公马和 6匹在 1～ 2岁期间被摘除了睾丸的阉割马的脑垂体前叶促性腺激素 (GTH )细胞的数量和面积 ,同时利用放射免疫分析方法检测了血浆中垂体促卵泡激素 (FSH)和垂体促黄体激素 (L H)的水平。结果表明 ,公马阉割后 GTH细胞的数量和在垂体前叶实质细胞中的百分率并没有发生明显改变 ,但 GTH细胞的面积却明显增加 ,血中 GTH水平也明显升高。研究结果提示 ,处在生长发育期的马睾丸可能抑制脑垂体中 GTH细胞的合成与储存 ,也抑制 GTH的释放     

促性腺激素释放激素并列体主动免疫对公猪性腺的影响

用GnRH并列体主动免疫公猪 ,并观察了免疫对公猪性腺的影响。结果表明 ,免疫使公猪睾丸体重降低 ,睾丸周长缩短 ,曲细精管管腔空荡 ,性腺萎缩     

GnRH脉冲对体外原代培养大鼠GTH细胞中 LHβ mRNA表达水平的影响

研究不同脉冲频率GnRH对GTH细胞分泌LH的影响。利用细胞体外培养技术结合荧光定量PCR技术,对体外培养的大鼠原代垂体细胞在不同脉冲频率GnRH刺激下,细胞LHβ mRNA的变化进行了研究。在相同振幅条件下,高频刺激(30 min间隔)时,LHβ mRNA表达水平达到高峰。结果表明,高频脉冲主要引起LH的表达,支持了GnRH脉冲频率本身就是一个调控信号的假说。     

促性腺激素对小鼠胚胎卵巢卵泡体外发育的类固醇激素分泌的作用

利用小鼠胚胎卵巢无血清培养体系研究了FSH,hCG对小鼠胚胎卵巢卵泡发育的作用。结果发现，（1）FSH处理组胚胎卵巢卵泡体外生长发育要优于ITS对照组；体外培养15d后，FSH处理组胚胎卵巢睾酮分泌量显著增加;在整个培养过程中，FSH诱导胚胎卵巢分泌少量雌二醇。（2）hCG对胚胎卵巢卵泡发育的作用是双相的。在培养早期，hCG处理组进入生长相的小卵泡显著多于ITS对照组，相应地此时雌二醇水平较高；随着卵巢培养的继续，雌二醇水平显著降低，hCG处理组总卵泡数开始急剧下降，大量小卵泡团缩退化；到培养结束时，处理组卵巢内小卵泡已所剩无几，但残存的生长卵泡卵母细胞平均直径仍显著大于ITS对照组。此时伴随睾酮分泌量的增加，雌二醇的分泌量重新增加。（3）FSH＋hCG处理组卵泡发育类似hCG处理组，体外培养15d后，FSH＋hCG促进鼻酮分泌，而雌二醇的分泌的分泌有促进作用，雌二醇可能是促性腺激素发挥促卵泡体外发育和存活作用所必需的；hCG可促进卵泡提前生长发育，担后期加速胚胎卵囊小卵泡库的耗竭。     

垂体促性腺激素表达的受体后信号转导机制

对促性腺激素释放激素(GnRH)作用机制的研究是一个重要领域。文章综述了国内外GnRH的研究进展,认为GnRH与受体(Rs)结合后,要通过一系列的信号转导,调节和控制促卵泡激素(FSH)和黄体生成素(LH)的合成和分泌。GnRH受体后信号转导途径主要是通过3大信号转导系统完成的:环磷酸腺苷(cAMP)信号转导系统、蛋白激酶C(PKC)信号转导系统和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导系统。cAMP信号转导通路和PKC信号转导通路都属于G蛋白偶联的信号通路,二者最后都要通过激活MAPK信号转导系统来完成调控。这为进一步研究GnRH作用机制提供了依据,同时讨论了存在的问题,并对下一步的研究方向做出展望。     

鹅GnRH基因CDS区克隆、序列分析及原核表达

本研究旨在了解鹅GnRH基因的CDS区序列及其蛋白表达情况,研究鹅GnRH蛋白的生理功能,为进一步阐明GnRH蛋白影响鹅繁殖性能的调控机制提供理论基础。采用RT-PCR方法从溆浦鹅下丘脑扩增获得GnRH基因的CDS区序列,将测序正确的DNA序列定向克隆到pET28a(+),构建表达载体pET28a-GnRH,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌表达目的蛋白,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测和Western blot分析。结果显示:获得的溆浦鹅GnRH基因CDS区部分序列,含有270个核苷酸,编码前体蛋白中的90个氨基酸;溆浦鹅GnRH基因CDS区在大肠杆菌中得到高效表达,GnRH基因CDS区的目的蛋白为9 900,最终测得菌体湿重为0.6g/L,纯化后得到的蛋白为20~30mg/L;清晰检测到GnRH基因表达的蛋白特异带,试验获得的抗体对原核表达的GnRH蛋白具有特异性反应;鹅GnRH基因在动物进化中高度保守,研究得到的鹅GnRH前体蛋白可为进一步研究GnRH基因的生物功能以及其对鹅就巢、产蛋等繁殖性状的影响奠定基础。     

妊娠期奶山羊下丘脑GnRH和OT免疫反应双标记细胞的分布

为了探讨促性腺激素释放激素（GnRH）和催产素（OT）是否在下丘脑细胞中共存,采用免疫组织化学双标记法对妊娠期奶山羊下丘脑中GnRH与OT的分布进行了检测。结果显示：室旁核、视上核、视前交叉上核、弓状核、下丘脑外侧区、乳头体内侧核、乳头体后核等核团（区）有GnRH和OT免疫反应双标记细胞,在妊娠的不同时期,GnRH和OT免疫反应双标记细胞数量有显著差异。这些结果为GnRH与OT相互调节提供了形态学证据。     

催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制作用

利用无血清培养的鸡卵泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对卵泡膜细胞类固醇激素合成的作用。用不同剂量的ＰＲＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促卵泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌二醇（Ｅ２）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＰＲＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ２合成，以及ＦＳＨ刺激的Ｅ２合成。本研究证明ＰＲＬ能作用于鸡卵泡膜细胞，并能抑制促性腺激素ＬＨ和ＦＳＨ诱导的类固醇激素的合成     

促性腺激素释放激素基因及其受体基因的研究进展

作者简要介绍了促性腺激素释放激素基因及其受体基因的位置、结构、表达、调控机理,并初步探讨了这两个基因与繁殖性能的关系。