植物组织培养快繁体系与产业化

对植物组织培养快繁体系及其产业进行了论述，并针对影响快繁的主要因素提出了解决方法。     

姜荷花组培快繁技术研究

采用不同诱导、增殖和生根培养基对姜荷花组织快繁技术进行了研究。结果表明 :最佳诱导、增殖和生根培养基依次为 :MS + 6 BA 2 .0～ 3 .0mg/L(单位下同 ) +NAA 0 .2 ,MS + 6 BA 2 .0 +NAA 0 .2 + 10 %椰子水 (CW)和 1/2MS + 0 .15 %活性炭。试管苗移栽对基质要求不严 ,移栽到疏松透气的基质中 ,成活率可达 82 %～ 94%。     

兰州百合组培快繁体系的构建

以兰州百合新鲜鳞茎为外植体,选择MS和1/2 MS培养基为基本培养基,采用正交设计研究不同消毒剂组合对外植体存活率、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导率和发芽率的影响;并用响应面法优化不同激素组合对生根率的影响。结果表明:(1)最佳消毒剂组合为75%乙醇消毒20 s+2%次氯酸钠溶液浸泡10 min,外植体成活率可达96.30%。(2)愈伤组织诱导最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,诱导率可达96.33%。(3)促进发芽的最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,发芽率可达98.00%。(4)促进生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.5 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA+2 mg·L^-1活性炭,生根率可达94.00%。本研究建立的组培快繁体系可用于兰州百合的快速大量繁殖,可为兰州百合组培苗的工厂化生产提供参考。     

满天星组培快繁体系的研究

满天星（Gypsophila elegans），石竹科霞草属植物。是广泛应用的切花品种，因其花形小，花序密集，通常用于插花的配花，目前主要依靠组培繁殖。2004年仅昆明地区满天星栽培面积就达到160hm^2。栽培苗数约864万苗。因此满天星组培快繁仍具有重要的商业价值。本研究利用田间侧芽为外植体，在MS＋BA2mg／L＋NAA0．1mg／L培养基进行初代诱导，获得分生芽。     

抗盐玫瑰组培快繁体系的建立

以抗盐玫瑰当年生去叶的幼嫩单芽茎段为试验材料,建立体外无性快繁体系。结果表明,适宜玫瑰离体腋芽发芽的最佳培养基配方为MS+0.5 mg/L 6-BA和MS+1.5 mg/L 6-BA;适宜丛生芽继代增殖的最佳培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA和3/4MS+0.3 mg/L IBA;适宜组培苗生根的最佳培养基配方为1/2MS+0.3 mg/L NAA,其生根率可达95%。生根苗木移栽成活率可达87%以上。该体系可以用于抗盐玫瑰的快速大量繁殖。     

超大果软枣猕猴桃快繁体系优化

以超大果软枣猕猴桃的带叶茎节为外植体,采用均匀设计法探讨不同植物生长调节剂对超大果软枣猕猴桃茎节生长的影响,对软枣猕猴桃快繁体系进行优化.结果表明,最适合超大果软枣猕猴桃茎节生长、腋芽萌发、生根的培养基为1/2MS+KT 0.05 mg/L+NAA 0.05 mg/L,即可完成一步成苗,成苗率可达96.3%.基于此,建立了一套超大果软枣猕猴桃快速繁殖技术体系,为软枣猕猴桃的保护和扩繁奠定基础.     

对甘薯快繁体系的优化

试验以MS作为基本培养基,设置空白对照,同时添加不同浓度的外源激素(6-BA、NAA、IAA),研究其对不同品种甘薯的不同部位快速繁殖的影响,以此来优化甘薯脱毒苗的快繁体系。结果表明,在成苗时间、生根时间、成苗率等方面,秦薯5号在MS+0.2 mg/L IAA培养基上接种的双叶茎段效果最为突出;红东在MS+0.4 mg/L NAA培养基上接种的双叶茎段效果最好;但从实际生产的角度来讲,还是单叶茎段的增殖效果最好,所以对秦薯5号使用MS+0.2 mg/L IAA培养基接种单叶茎段,对红东使用MS+0.2 mg/L NAA培养基接种单叶茎段;6-BA会抑制根的形成,但是对芽的分化却有促进作用,而且随着6-BA浓度的增长,其对根的抑制效果增强,但对芽的促进作用渐渐消失。研究明确了单一激素在甘薯快繁整体和各阶段的作用,并且选择出了最适合的甘薯快繁切取部位。     

金线莲快繁技术体系的优化

[目的]研究全线莲快繁技术.[方法]通过对不同基础培养基、植物生长调节剂种类(NAA、6-BA)及不同添加量对金线莲丛生芽数量、生根情况和株高等影响的研究,同时进行不同品种金线莲之间生长情况的比较以及控制光照条件下金线莲的生长情况比较.[结果]用改良MS培养基,添加不同浓度的NAA和6-BA,得出最佳的增殖培养配方为改良MS培养基+NAA 0.4 mg/L+ 6-BA1 mg/L,生根最佳培养基配方为改良MS培养基+IBA 0.4 mg/L.[结论]该研究为金线莲产业化发展做好准备工作.     

花叶艳山姜组培快繁技术的研究

采用不同诱导、增殖和生根等培养基进行的花叶艳山姜组培快繁技术研究结果表明:丛生芽诱导以MS 6-BA2.0～3.0mg/L(单位下同) NAA0.2培养基为好;增殖培养以MS 6-BA2.0 NAA0.2 CW10%为培养基可以获得理想的效果,增殖倍数可达4.8倍;在不含任何激素的1/2MS 0.15%活性炭培养基上即可形成较发达的根系,生根率达100%;试管苗移栽对基质要求不严,移栽到疏松透气的蛭石1份 珍珠岩1份 园土1份混合基质中,成活率可达92%。     

苦参组织培养及快繁体系研究初探

采用苦参种子为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA和6-BA,进行苦参组培快繁技术研究。结果表明,采用75%乙醇8 s＋0.1%升汞8 min对苦参种子消毒后,污染率低,易获得无菌材料。MS培养基中分别添加0.1 mg/L、3.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA、3.0 mg/L 6-BA的组培苗增殖效果较好,增殖率最高可达120.2%;在1/2 MS培养基中添加0.1 mg/L的NAA,更利于苦参组培苗生根。根长1∽2 cm的无菌苗,在自然光下驯化培养5 d后移栽至蛭石基质中成活率较高。     

苦楝组培快繁技术优化试验

为解决苦楝组织培养中出现的芽苗玻璃化、叶黄化、愈伤组织异常等问题,以苦楝半年生种子实生苗带腋芽茎段和茎尖为外植体,诱导出无菌芽,进行培养方法改进及培养基优化对比试验。结果表明：适宜的芽诱导培养基是MS+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+3.5 g/L琼脂;最佳继代增殖培养基是改良MS+0.8 mg/L6-BA+0.3 mg/L KT+0.3 mg/L IBA+1 g/L花宝1号+40 g/L蔗糖+3.8 g/L琼脂,增殖系数达到3.93;适宜的生根培养基是1/2 MS+0.6 mg/L ABT 6号+0.2 mg/L NAA+15 g/L蔗糖+3.2 g/L琼脂,平均生根率达到93.56%。     

矮生一品红组织培养快繁体系的建立

以矮生一品红的幼叶、幼茎、茎芽为外植体，研究了影响丛芽诱导、增殖、生根壮苗的组培快繁的主要因素．结果表明：茎段、茎芽是诱导丛芽的较好试材．适合诱导胚性愈伤组织和芽分化的培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L；适合丛芽增殖成苗的培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋IAA0．1mg／L，继代增殖培养40d的平均增殖倍数为11；适合生根壮苗的培养基为1／2MS＋IBA0．9mg／L，开始生根天数为8d。生根率可达85％．采用河砂和营养土两步炼苗。移栽成活率可达90％以上．     

草原龙胆无性快繁体系建立的初探

[目的]研究草原龙胆以茎段为外植体的丛生芽的诱导与增殖情况。[方法]以草原龙胆为试材,用生长健壮的草原龙胆植株茎段为外植体建立其高效快繁体系,以MS、MB、N63种培养基及IBA,6-BA,GA 3种激素进行正交试验设计。[结果]结果表明,适宜的脱毒材料为0.1%的HgC l2。当基本培养基为MB(MS大量+B5微量+B5有机+Fe盐),IBA为2.0 mg/L,6-BA为0.5mg/L,GA为2.0 mg/L时,其丛生芽的诱导率、分蘖率最高。[结论]该试验结果可用于组织培养快速繁殖草原龙胆。     

长寿花快繁体系的建立

实验采用了愈伤组织和增强腋芽生枝能力两种途径对长寿花进行组织培养。愈伤组织途径：基本培养基为MS，最佳外植体为叶片．诱导愈伤培养基中PGR最佳浓度配比为：6-BA(2．0mg／L) NAA(0．4mg／L) 2，4-D(0．8mg／L)，胚状体的分化培养基中不加入生长调节物质效果最好。增强腋芽生枝能力途径：基本培养基为MS，外植体为带节的茎段，诱导丛生芽培养基中PGR最佳浓度配比为：6-BA(3．0mg／L) NAA(0．4mg／L)。生根培养中，最佳培养基为I／2MS NAA(0．2mg／L)。生根后，待根长到3-5cm即可炼苗、移栽。     

万寿菊雄性不育系离体快繁体系的建立

[目的]建立色素万寿菊雄性不育系离体快繁体系,为开展万寿菊育种研究和杂交制种打下基础.[方法]以4个色素万寿菊母本资源(B1-1、B1-3、B1-4和Bnm)雄性不育株的叶片和茎段为外植体,以不同生长调节剂组合对其进行愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养,建立适宜色素万寿菊离体快繁的技术体系.[结果]以叶片为外植体的各色素万寿菊雄性不育株再生能力均较以茎段为外植体的再生能力强,其愈伤组织诱导率和不定芽分化率排序均为B1-3>B1-1>Bnm>B1-4;适宜B1-3和B1-1叶片愈伤组织诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA),诱导率分别为99.2%和95.3%;适宜茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA,其中B1-3和B1-1的诱导率较高,分别为81.4%和80.1%.萘乙酸(NAA)与玉米素(ZT)组合诱导4个不同色素万寿菊的愈伤组织不定芽分化率普遍高于NAA与6-BA组合,其中B1-3叶片和茎段的愈伤组织在MS+1.0 mg/L NAA+3.0 mg/L ZT中的不定芽分化效果较佳,分化率分别达72.5%和57.7%.适宜色素万寿菊不定芽生根的培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,其中B1-3和Bnm的生根率均达100.0%;再生植株移栽成活率达95.0%.[结论]叶片是诱导色素万寿菊雄性不育系植株再生的良好材料,B1-3是获得色素万寿菊离体培养雄性不育植株最佳的母本资源;建立的色素万寿菊雄性不育系离体快繁体系可为其育种研究和杂交种种子生产提供资源保障.     

辽东楤木的组培与快繁

辽东楤木[Aralia elata (Miq.)Seem.],又名刺龙牙.为五加科落叶小乔木,是1年栽植、多年受益的优良野生植物.     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

木薯品种西选03快繁体系的建立

[目的]探讨木薯品种西选03快繁技术,为其种苗规模化生产提供技术支持.[方法]以水培幼茎腋芽为外植体,调查MS基本培养基中添加不同用量6-BA和PP333对外植体芽诱导、增殖培养和生根的影响.[结果]外植体采用0.1％ KMNO4预处理10 min后经75％酒精20 s+0.1％ HgCl2(加吐温-80)5 min的灭菌效果较好,污染率为14.0％,成活率达79.3％.采用MS+6-BA 0.05 mg/L培养基进行初代诱导效果较好,外植体培养15d腋芽萌发率达90.0％,且萌发芽生长旺盛,茎秆粗壮.无菌腋芽茎段在MS+6-BA 0.1 mg/L培养基中继代增殖效果最佳,芽增殖倍数为4.6.MS+PP3330.3 mg/L培养基诱导生根效果较好,生根率100.0％,培养30d平均根数为6.9,叶色墨绿,植株健壮.[结论]以幼茎腋芽为外植体的快繁体系可用于西选03种苗规模化生产.     

月季组培快繁技术的研究

通过诱导芽分化和诱导愈伤两种途径 ,研究不同植物生长调节剂及浓度、对外植体萌发和生根的影响。MS附加不同种类、不同浓度的细胞分裂素和生长素 ,进行正交设计。结果表明 ,细胞分裂素 6 - BA分别与 3种生长素NAA,IAA,IBA配合使用均能诱导月季出芽。