小麦叶片离体培养体系的建立和优化

以济麦22和临麦4号小麦叶片为材料进行离体培养试验,通过添加1/2MS、霍格兰营养液(Hoagland)、6-苄氨基腺嘌呤(6-benzylaminopurine,6-BA)分析不同培养条件下小麦离体叶片叶绿素及植物总蛋白的变化,建立适用于两个品种的离体培养体系。结果表明,筛选的培养体系中1/2MS液体培养基最适用于济麦22和临麦4号,叶片离体培养10 d内可保持生理活性稳定;霍格兰营养液仅适用于临麦4号;1/2MS液体培养基添加6-BA后叶片SPAD值及总蛋白含量增加,浓度25 mg/L时效果最佳,离体培养14 d叶片仍可保持良好的生理活性。本研究建立了适用于济麦22和临麦4号的叶片离体培养体系,为进一步开展小麦抗病性研究提供一定的科学依据。     

油葵叶片离体再生体系的建立

以油葵自交种7B7的无菌苗子叶为诱导不定芽材料,MS培养基为基本培养基,研究油葵子叶组织培养有关影响因子.比较了不同培养基成分、不同碳源、不同附加物对不定芽分化的影响,确定出油葵自交种子叶离体诱导再生芽的最佳培养基:改良MS(MS大量、微量、铁盐、B5有机)+0.5; KNO3+0.05; CH+0.01; 肌醇+3; 葡萄糖+4 mg/L 6-BAP+6～9 mg/L AgNO3+2.6 g/L Phytagel,建立了油葵相对高效的再生体系.为油葵基因转化的研究奠定了基础.     

油柿叶片离体再生体系的建立

 以油柿叶片为材料开展了离体培养研究，旨在建立其再生体系，为转基因操作奠定基础。结果表明，油柿叶盘在MS（1/2N）+IBA0.1mg/L+ ZT3.0mg/L培养基上，经前期暗处理3周后移至正常光照下培养的再生效果最好，其不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高，分别为80.5%和（4.1±0.8）个。再生苗接种于添加IAA和IBA各0.5mg/L的MS(1/2N)培养基上，4周时生根率可达92%，成功地建立了油柿叶片的离体再生体系。     

薄荷离体培养再生体系的建立及优化

试验结果表明,薄荷芽苗增殖的最佳培养基为附加6-BA1.0mg/L、NAA0.05mg/L、ag0.7%、Su3.0%的MS培养基,最佳培养温度条件为25℃,增殖系数最高可达10.7。在附加IBA1.0mg/L的MS培养基上培养10d,生根率达90%;在增殖培养基上延长继代时间至30d时,生根率达84%。     

金花茶离体培养体系的建立

[目的]通过愈伤组织发生途径建立金花茶(Camellia nitidissima)的离体培养体系,为金花茶的快速繁殖和种质资源保存提供理论和技术支持.[方法]在金花茶种子萌发阶段以沙子替代培养基进行无菌萌发,以其成熟植株的茎尖、茎段和叶片为外植体,在WPM培养基上添加不同种类和浓度激素进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化及生根培养.[结果]金花茶成熟种子去壳、去皮、取出胚乳后在添加无菌液的湿润沙子中培养,平均萌发率为95.40%,平均萌发时间为19.10 d;WPM+2.00 mg/L 6-BA+0.50 mg/L 2,4-D是金花茶子叶、胚轴愈伤组织诱导的适宜培养基;WPM+2.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA是愈伤组织分化的适宜培养基,分化系数为4.56;1/2WPM+0.50~1.00 mg/L IBA是金花茶生根的适宜培养基,生根率为45.40%~54.00%,生根时间为19.80~20.90 d.[结论]金花茶离体培养可通过胚轴诱导产生愈伤组织进而分化成完整植株.     

菘蓝叶片离体培养与试管无性系的建立

以菘蓝幼嫩叶片为外植体,研究了不同激素及其组合对菘蓝离体叶片的分化方向及不定芽诱导效率的影响,建立了菘蓝叶片高效不定芽发生、植株再生体系。结果表明,在MS基本培养基中单纯添加2,4-D,不能诱导离体叶片发生不定芽,只诱导愈伤组织发生。如果在MS基本培养基中加入2,4-D和6-BA,也无不定芽发生,而添加NAA和6-BA,可以诱导其发生不定芽。在激素组合为NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L时,不定芽的诱导率达到95%,在单纯加入NAA1.0 mg/L的MS基本培养基上,菘蓝叶片也可以发生不定芽,不定芽诱导率为93%,且不定芽生长健壮,不易老化,经过一段时间的培养可以直接生根并移栽成活。     

库尔勒香梨离体叶片再生体系的建立

【目的】建立库尔勒香梨叶片诱导再生的稳定高效再生体系。为梨的遗传转化研究奠定基础。【方法】以库尔勒香梨离体培养的继代30 d左右的无菌苗叶片为材料,1/2 MS为基本培养基,用 TDZ与 IBA或 NAA分别组合设计配方,研究不同生长调节剂质量浓度组合对不定芽诱导过程中愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,选取最优配方附加不同质量浓度的AgNO₃,获得不定芽再生的最佳培养基。用IBA和NAA分别组合设计生根生长调节剂的配比,根据生根率、平均生根数以及平均生根长度筛选最适宜生根的生长调节剂的配比,建立生根的培养体系。【结果】库尔勒香梨叶片诱导不定芽再生的最佳培养基为1/2 MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+AgNO₃ 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率100%,不定芽形成率84.92%。最适宜香梨再生苗生根的培养配方为1/2 MS + 0.5 mg/L IBA + 0.9 mg/L NAA,结合前期暗培养7 d,生根率可达100%,平均生根条数为5.66,平均根长度为 2.8 cm。【结论】建立了库尔勒香梨的再生体系。     

菊花离体叶片快繁体系的建立

以菊花叶片为外植体,诱导植株再生,建立高效植株再生体系。结果在MS 2mg/LBA 0.2mg/LNAA的培养基上诱导出愈伤组织,在MS 3mg/LBA 0.1mg/LNAA的培养基上诱导出芽,并在1/2MS 0.6mg/LNAA的培养基上诱导出根,从而获得再生完整植株,生根的小苗在温室生长良好。     

菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

菊花离体培养体系的优化

对菊花离体培养体系的优化进行了研究,研究结果表明:激素对芽和根系的产生是必需的,其中NAA对能否产生芽具有决定作用,IAA对能否产生根系具有决定作用,6BA能够明显改善根系和芽的生长质量;适合诱导丛生芽的优化培养基为M S 5 m g/l 6BA 0.5m g/NAA 1 m g/l AC,适合生根的最适培养基为M S 1m g/l 6BA 2m g/l IAA;加入适量的AC有利于减少褐化、死亡现象,且能够促进芽和根系的产生及质量的提高。     

芜菁离体培养再生体系建立

【目的】研究不同激素对芜菁再生不定芽,不定根的影响;并建立芜菁再生体系。【方法】设置2种浓度NAA激素0.1 mg/L,0.5 mg/L;和4种浓度6-BA激素0.25、0.5、0.75、1.0 mg/L处理2种新疆芜菁、1种温州盘菜的子叶、下胚轴。观察记录子叶、下胚轴的不定芽再生频率和再生根频率。【结果】三种芜菁下胚轴产生不定芽的频率为:柯坪芜菁(75.32%)>温州盘菜(73.73)%>喀什芜菁(72.55%)。NAA为0.5 mg/L时下胚轴的生根率要高于NAA为0.1 mg/L时的生根率。【结论】三种芜菁的下胚轴诱导不定芽的效果要优于子叶的诱导效果;柯坪芜菁与喀什芜菁不定芽诱导最适激素浓度为6-BA 0.75 mg/L、NAA 0.1 mg/L;温州盘菜最适激素浓度为6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L。     

文冠果叶片离体再生体系的优化研究

[目的]探明不同处理对文冠果叶片离体再生体的反应。[方法]以成熟文冠果叶片作为外植体,通过诱导和培养的方法,研究不同培养基激素配比对文冠果离体培养的影响。[结果]2,4-D及其与BA组合诱导的愈伤组织不适宜进行间接不定芽诱导;MS培养基中添加2.0mg·L-1 KT和0.2mg·L-1 NAA时,愈伤组织诱导率最高,且在愈伤组织上可分化出不定芽,是叶片通过愈伤组织诱导不定芽再生的一条最佳途径。IBA与NAA、IAA组合中,NAA、IAA浓度为1.0mg·L-1时,为最佳生长素配比;生长素速蘸方法不适宜进行试管苗生根培养。[结论]不同组合和配比生长系,对文冠果再生体有不同效果。     

南果梨叶片离体培养的高效再生体系

为探索一种南果梨叶片离体培养高效再生的方法,以南国梨离体培养试管苗叶片为材料,在MS基本培养基中添加6-BA、NAA、IAA进行离体培养,系统地研究植物生长调节物质浓度、苗龄、不同部位叶片、接种方向、温度、pH值及光照强度对南国梨叶片离体培养再生的影响。结果表明,MS+5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖为南国梨叶片再生芽诱导的适宜培养基,诱导率最高,为46.1%;选择25~35 d苗龄叶片、近叶柄处远轴面向上叶片可获得高再生频率;南果梨叶片离体再生的适宜条件为:温度(25±2)℃,pH值为5.8~6.4,高光照强度。     

君迁子休眠芽及叶片离体培养体系优化及植株再生

以君迁子(Diospyros lotus Linn.)休眠芽和叶片为外植体,研究基础培养基种类和外植体基因型对休眠芽初代培养的影响,比较叶片放置方式、TDZ浓度、ZT与TDZ不同浓度组合及暗培养时间对叶片愈伤组织形成和不定芽再生的影响;然后对再生芽进行生根。结果表明:君迁子休眠芽初代培养中,DKW培养基最适合其生长发育,休眠芽生长势最佳;初代培养中,不同基因型的外植体在DKW培养基中生长势基本相同,说明外植体基因型对其初代培养没有影响,但对继代培养影响较大。叶片下表面朝上放置在MS+ZT 0.1 mg/L+TDZ2.0mg/L中暗培养20d,愈伤组织形成率达100%,在(1/2N)MS+2.200 mg/L TDZ上愈伤组织形成率为81.4%;叶片下表面朝上放置在MS+ZT 1.0mg/L+TDZ 2.0mg/L中暗培养0d,不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高,分别为34.4%和2.1±0.3。组培苗在1/2MS(1/2N)+IBA 1.0mg/L中培养5d后,转入1/2MS(1/2N)+1g/L活性炭培养20d,生根率为58.14%,平均根数为4条。     

富贵菜离体培养体系的建立

富贵菜(Gynura divaricata)离体培养研究结果表明,以幼叶为外植体,最适致密愈伤组织诱导培养基为改良MS+6-BA2.0mg.L-1+NAA0.2mg.L-1+KT0.4mg.L-1+蔗糖3%,诱导率为95.9%;最适诱导增殖培养基为改良MS+6-BA3.0mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+蔗糖3.0%,分化率为88%,增殖系数12.60;最适生根培养基为1/2改良MS+NAA0.3mg.L-1+蔗糖3%,生根率为100%;经该途径诱导得到的植株,经炼苗后移栽成活率≥93%。     

香樟离体培养体系的初步建立

以香樟茎段为试验材料,采用正交试验设计方案,研究了大量元素、BA和NAA三因素对初步建立香樟茎段离体培养体系的影响。接种30d后,培养基中的香樟茎段均有程度不同的器官发生现象。统计分析结果表明:大量元素、BA和NAA均对香樟茎段隐芽的发育以及愈伤组织的产生有显著影响。全量的MS大量元素适于香樟茎段的隐芽发育。BA/NAA浓度比为40时适于芽的萌出,为5时适于愈伤组织产生。在笔者试验中,9号即MS BA2.0(mg/L) NAA0.05(mg/L)培养基为香樟茎段隐芽萌动与伸长的最适培养基,7号即1/2MS BA0.5(mg/L) NAA0.1(mg/L)培养基为香樟茎段产生愈伤组织的最适培养基。在进一步工作中还可加大BA浓度促进芽的萌发,增加NAA浓度或降低BA浓度促进愈伤组织产生。     

皇家夏天葡萄离体叶片再生体系的建立

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的葡萄离体叶片不定芽再生体系,以优良无核葡萄品种皇家夏天为试材,取试管苗顶端1￣3叶位幼嫩叶片,研究了基本培养基成分、生长调节物质的种类和浓度、碳源等因素对叶片不定芽再生的影响。结果表明:供试WPM、1/2MS、B5和NN694种基本培养基,均可诱导其叶片再生不定芽,差异不显著;碳源以添加10￣20g/L的葡萄糖或食用白砂糖较好;培养基中附加3.0mg/L的6-BA与0.05mg/L的IAA配比利于出芽和成苗,应用TDZ虽出芽较多,但芽丛多畸形、出苗困难,不宜使用。     

百合离体培养与植株再生体系的建立

以香水百合鳞叶为外植体,探讨不同外源激素水平对其小鳞茎分化、增殖与不定根形成的影响。结果表明:以MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+IAA 0.1~0.3mg/L培养基的不定芽分化、增殖效果好,分化率达78.5%以上,增殖系数达5.6以上;1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IAA 0.5mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1~0.3mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.8mg/L的生根效果好,生根率可达96.0%以上;在泥炭∶珍珠岩=1∶1的基质中驯苗,成活率可达96.3%。     

辣根叶片的离体培养

以辣根(Armoracia rusticana (Lam.)Gaertn)叶片为外植体进行离体培养,考察了叶片采集时间、培养基中添加激素的种类和浓度对组织培养的影响.结果表明,2月份采集辣根叶片,组织培养污染率较小,为15％.愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,出愈率为100.0％;叶片分化不定芽的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,分化率为80％;不定芽增殖的适宜培养基为MS+.0.2 mg/L KT;适宜的生根培养基为MS+0.2 mg/L NAA.