金钗石斛的离体快繁体系研究

[目的]研究金钗石斛的离体快繁体系。[方法]以金钗石斛的种子为材料,采用组培法进行离体培养。[结果]适宜于金钗石斛圆球茎诱导增殖及芽分化的培养基为:MS+1 mg/L BA+0.02 mg/L NAA+浓度2%马铃薯+浓度3%白糖,增殖系数为7～10。生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA+浓度2%香蕉+浓度2%马铃薯+浓度2%白糖;生根率达98%以上,移栽成活率在90%左右。[结论]该方法对金钗石斛的离体快繁体系进行了研究,为组培繁殖金钗石斛种苗提供了参考。     

不同浓度香蕉汁对金钗石斛组培苗生长的影响

[目的]研究不同浓度香蕉汁对金钗石斛组培苗生长的影响。[方法]以金钗石斛无菌组培苗为材料,以MS为基本培养基,研究不同浓度的香蕉汁(0、10、20、30、40 g/L,其中0为对照组)对金钗石斛组培苗生长的影响。[结果]香蕉汁浓度为30 g/L时,金钗石斛组培苗生长速度最快,株高增长最明显,鲜重增加最多,根系粗壮发达,且与对照组相比差异明显。[结论]以30 g/L香蕉汁为培育金钗石斛组培苗的最佳浓度。     

金钗石斛的组织培养和快繁技术

该项目选用宝天曼国家自然保护区野生的金钗石斛茎段,消毒后接种于MS 6-BA2．0 NAA0．5 2.0％蔗糖培养基上诱导出再生植株．在MS 6-BA2．0 NAA1．0 2．0％蔗糖培养基上,增殖系数可达5～6,在MS KT2．0 IBA0．5 2．0％蔗糖培养基上,培养30天左右,可形成3-4条粗壮的根、6-7cm的完整植株,移栽到小树皮 小兰基石十椰壳粉(1．5：1．5：1)基质上,成活率可达到95％。     

金钗石斛的组织培养和快繁技术

以宝天曼国家自然保护区野生的金钗石斛茎段为试材,消毒后接种于MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L 2.0%蔗糖培养基上诱导出新生芽,在MS 6-BA2.0mg/L NAA1.0mg/L 2.0%蔗糖培养基上,增殖系数可达5～6,在MS KT2.0mg/L IBA0.5mg/L 2.0%蔗糖培养基上,培养30d左右,可形成3～4条粗壮的根和6～7cm的完整植株,移栽到小树皮 小兰基石 椰壳粉(1.5:1.5:1)基质上,成活率可达到95%。     

金钗石斛的组织培养和快繁技术

选用宝天曼国家自然保护区野生的金钗石斛茎段,消毒后接种于MS+6 BA2.0+NAA0.5+2.0%蔗糖培养基上诱导出新生芽,在MS+6 BA2.0+NAA1.0+2.0%蔗糖培养基上,增殖系数可达5～6,在MS+KT2.0+IBA0.5+2.0%蔗糖培养基上,培养30d左右,可形成3～4条粗壮的根、6～7cm的完整植株,移栽到小树皮+小兰基石+椰壳粉(1.5∶1.5∶1)基质上,成活率可达到95%。     

不同附生树种对金钗石斛石斛碱含量的影响

[目的]测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。[方法]以贵州赤水仿野生3年苗为试验材料,不同树种继续附生生长1年,采用气相色谱内标法,测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。色谱柱:DB-1(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:初始温度80℃,10℃/min升温至250℃,保持5 min;进样口温度250℃;FID检测器温度250℃。[结果]不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量有明显差异,其中,杉木附生金钗石斛的石斛碱含量最高,为0.932%,枇杷、杨梅、龙眼附生金钗石斛石斛碱含量分别为0.825%、0.790%和0.601%。[结论]不同附生树种的金钗石斛石斛碱含量均符合2015版《中国药典》限量要求,该研究为确定适宜的附生树种提供参考依据。     

光照强度对金钗石斛吸收氮素的影响

应用15N 研究光强度对金钗石斛吸收氮素的影响,结果表明光强度为 2×104Lx 处理,在石斛生长的四个阶段吸收营养液中氮量分别比光强度为 5×10Lx 处理高 26．54％,50．07％,31．11％和 22．22％;吸收木屑培养基质中的氮量分别提高 32．84％,43．41％,21．85％和 19．01％;吸收总氮量分别提高 29．19％,46．44％,26．01％和 20．51％。在石斛生长的四个阶段,光照强度为 2×104Lx 处理,植株干物重分别比 5×103Lx 处理提高 12．40％,22．22％,17．08％和 15．00％;但是,光照强度为 5×103Lx 处理根干物重较光强为 2×104Lx 处理高 18．21％,9．63％,10．04％和18．45％。     

金钗石斛栽培技术

为给金钗石斛栽培提供技术参考,介绍了金钗石斛的播种、田间管理和效益。     

基本培养基和激素组合对金钗石斛原球茎增殖的影响

以野生金钗石斛茎段诱导长出的原球茎为材料,比较了M S、1/2 M S、B 5、M iller四种不同基本培养基在四个不同培养周期中金钗石斛原球茎生长增殖的情况,筛选出最佳增殖培养基为B 5培养基,原球茎的最适培养周期为30d;在不同生长素比较试验中,NAA对原球茎的增殖效果明显好于IBA;在不同激素6 BA和NAA配比组合正交试验中,采用Ducan多重比较法进行差异显著性分析表明,处理6 BA 0.5m g/L NAA 0.2m g/L的配比为最佳激素组合,原球茎净增殖倍数达到5.146倍。     

HPLC法测定金钗石斛中石斛碱含量

采用反相高效液相色谱法测定不同产地金钗石斛茎的石斛碱含量。结果表明,贵州赤水产金钗石斛石斛碱含量最高（0．55％）,罗甸产金钗石斛石斛碱含量最低（0．04％）;石斛碱在0．01～0．05μg范围内线性关系良好。     

干旱胁迫对金钗石斛幼苗生理生化的影响

用加有不同浓度聚乙二醇(PEG6000)(0,5%,10%,15%,20%,25%)的MS培养液模拟干旱胁迫,胁迫时间分别为3 d9、d和15 d,并测定干旱胁迫对金钗石斛幼苗生理生化特性的影响。结果表明:干旱胁迫可以引起金钗石斛幼苗脯氨酸、可溶性糖的积累,降低可溶性蛋白质相对含量,增大细胞质膜的相对透性;随着胁迫强度和时间的增加,各生理生化特性变化明显。     

种质与环境对金钗石斛药材品质的影响

将7个不同种质的金钗石斛苗分别在3个栽培基地进行多点栽培试验,测定多点栽培金钗石斛的外观性状、产量及活性成分含量,并结合各栽培基地的气象资料,采用数理统计软件分析种质与环境对金钗石斛药材品质的影响。结果表明,在同一栽培基地中,不同种质金钗石斛外观性状、产量、活性成分含量均存在差异,根据联合方差分析可知金钗石斛茎长、茎直径、产量及石斛碱含量主要受种质因素影响,叶长、叶宽、多糖含量主要受种质与环境因素交互作用影响。影响金钗石斛的主要气候因子是相对湿度、1月均温、平均最低气温、年平均温度;直径短边与年平均温度呈显著负相关,生长在年平均温度较低的地区金钗石斛直径短边较粗壮;叶长与1月均温呈显著负相关,1月均温较低的地区适宜金钗石斛叶片长度的生长;叶宽与年平均温度呈显著正相关,年平均温度较高的地区适宜金钗石斛叶片宽度的生长;多糖含量与年平均温度呈显著负相关,年平均温度较低的地区适宜金钗石斛多糖含量的积累。     

金钗石斛林下栽种固定法试验报告

[目的 ]移栽时,种苗贴石固定方法(传统固定法有泥糊固定、牛粪固定、直接压石、低标号水泥固定等)不同,直接影响金钗石斛苗的成活率。本试验在传统经验基础上,通过不同栽种固定法试验,探索金钗石斛组培苗栽种的最佳固定方式。[方法 ]设置5种不同的移栽方式观察记录金钗石斛的生长状况。[结果 ]线卡固定苔藓盖根的金钗石斛长势最好。[结论]在实际生产中当选用线卡固定苔藓盖根的移栽方式。     

金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响

为了研究金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响,将实验小鼠随机分为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组;采用Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验及迟发性变态反应试验测试试验组小鼠的细胞免疫功能;采用抗体生成细胞检测及溶血试验测试其体液免疫功能;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试其特异性免疫功能.结果表明,与对照组比较,金钗石斛复方能够明显提高脾淋巴细胞增殖能力、溶血空斑数、小鼠抗体积数、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;金钗石斛复方对提高小鼠NK细胞活性能力无显著影响.金钗石斛复方对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有明显的增强作用.     

不同叶面肥对金钗石斛幼苗生长和药用成分含量的影响

为明确不同叶面肥对金钗石斛幼苗生长和药用成分的影响,在金钗石斛幼苗栽培基质上设置不同小区,喷施不同种类的叶面肥后,测定金钗石斛幼苗形态指标、多糖和石斛碱的含量.结果表明：不同叶面肥对石斛幼苗生长效果不同,喷施沼液肥效果最好,与不施肥相比,茎粗增加33％、根长增加67％、株高增加29％、分蘖数增加75％、叶片数增加79％、茎节数增加54％、产量增加67％,根多糖含量增加93％、茎多糖含量增加110％、叶多糖含量增加68％、茎部石斛碱含量增加156％.无机性叶面肥1、叶面肥2和多元素复合肥的施用效果差于沼液肥.所以喷施沼液肥能够显著促进金钗石斛幼苗的生长和药用成分含量的提高.     

内生真菌分泌物对金钗石斛酶活性的影响

测定了3株内生真菌分泌物对金钗石斛SOD、POD和PAL活性的影响。结果表明,随菌株37分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD活性呈先减小后增加趋势,POD和PAL活性逐渐增加;随菌株117分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD活性呈先增加后减少趋势,POD和PAL活性呈先下降后上升趋势;随着菌株120分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD和PAL活性逐渐增强,POD活性先降低后升高。     

金钗石斛原生态栽培方法及技术

为金钗石斛栽培技术的推广应用,从栽培方法,技术及田间管理方面介绍金钗石斛原生态的种植技术。     

不同移栽基质对金钗石斛试管苗成活和生长的影响

[目的] 研究4种移栽基质对金钗石斛试管苗成活率和生长的影响。[方法] 以苔藓、锯木屑、树皮、腐殖土为移栽基质,观测移栽试管苗的成活率、株高、茎粗、根数、根长、干重并比较其差异性。[结果] 移栽30 d的试管苗的成活率在锯木屑中达94.7%,在苔藓和树皮中达90%以上,在腐殖土中为77.7%;其株高在锯木屑中增加0.250 cm,在腐殖土中增加0.080 cm,其茎粗在苔藓中增加0.086 cm。移栽60 d的试管苗的株高在锯木屑中增加0.370 cm;其茎粗在腐殖土中增加0.210 cm,在苔藓中增加0.132 cm,在锯木屑中增加0.086 cm,在树皮中增加0.047 cm;其单株平均根数在苔藓中为5.1条,在腐殖土中为2.7条;其根长在锯木屑、树皮、苔藓和腐殖土中分别为4.6、4.2、3.7和3.5 cm,其全株干重在锯木屑中达16.33 mg,在树皮中为10.60 mg。[结论] 锯木屑是用于金钗石斛种苗生产的最佳移栽基质。     

赤水市金钗石斛基地建设经济效益分析

通过分析2010年3月至2011年12月金钗石斛种植的投入与产出,对其种植效益进行评价。