产朊假丝酵母原生质体制备的研究

利用产朊假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｕｔｉｌｉｓ）２．２８１株研究了原生质体的制备。结果表明,该菌经复合剂０．１４ｍｏｌ·Ｌ－１β－ＭＥＴ、０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＤＴＡ予处理;蜗牛酶浓度为７０ｍｇ·（１０ｍＬ）－１;并于３０℃酶解１２０ｍｉｎ;是制备原生质体的理想条件     

产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50%以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90%以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.     

产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50%以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90%以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.     

产朊假丝酵母功能的探究及应用

产朊假丝酵母属于假丝酵母属,其蛋白质产量高,可用于饲料原料、食品用香精等,还可以生产谷胱甘肽,同时可以供给硒,给人类和动物带来益处。文章对产朊假丝酵母营养特性、菌体特点、生长条件及其在生产中的应用进行论述。     

产朊假丝酵母增殖发酵培养基的优化研究

[目的]对产朊假丝酵母培养基进行优化,以提高其产率.[方法l通过单因素试验,研究不同碳源、氮源、无机盐对产阮假丝酵母产量的影响,对产朊假丝酵母发酵培养基成分进行筛选和优化研究,在此基础上,利用响应曲面法对主要影响因素进行回归分析.[结果]获得最优的增值发酵培养基组成为蛋白胨36.32g/L,蔗糖76.17 g/L,磷酸二氢钾1.98 g/L,硫酸镁1.5 g/L,硫酸铵1 g/L.[结论]产朊假丝酵母在优化后的培养基下OD值可达0.916,菌体于重可达11.15 g/L,比对照组提高了2.08倍.     

生物絮团对养殖水体水质和微生物群落功能的影响

为探讨生物絮团对养殖水体水质和微生物代谢功能的影响,采用水质分析和Biolog-ECO技术,分析了葡萄糖强化养殖水体培育生物絮团的过程中水质指标和微生物碳代谢变化特征。结果显示:(1)成熟的生物絮团有效降低了养殖水体氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮水平,并显著提高了养殖水体的总固体悬浮物(TSS)含量。(2)对照组和生物絮团组水体微生物样品平均颜色变化率(average well color development,AWCD)在培养108 h后趋于稳定,生物絮团组AWCD高出对照组18%;同时生物絮团系统水体微生物提高了对聚合物类和碳水化合物类的代谢强度;对比2组水体微生物代谢多样性指数发现,生物絮团组Shannon-Wiener指数和丰富度指数明显高于对照组(P0.05)。(3)2组水体微生物群落碳代谢特征PCA分析表明,主成分1(PC1)贡献度为66.9%,主成分2(PC2)贡献度为12.4%,2组水体微生物差异较大,碳代谢功能差异显著。因此,养殖水体应用生物絮团技术可以有效控制水质,增加水体微生物的代谢活性,影响水体微生物代谢功能。     

产朊假丝酵母富硒条件的优化及发酵罐培养

用富硒产朊假丝酵母制备饲料添加剂饲喂家畜家禽可获得富硒农产品。为获取富硒产朊假丝酵母,以产朊假丝酵母为出发菌株,优化摇瓶培养条件(摇瓶装液量、接种量、亚硒酸钠添加量、添加时间和培养液初始p H),通过L₉(3⁴)正交试验,获得最佳发酵工艺,即：装液量为35 mL,初始p H为6.5,接种量8%,培养时间为12 h,亚硒酸钠添加量为15μg/mL,此时最终发酵液中总有机硒含量最高,为9 792.732μg/L,菌体有机硒含量为1 400.362μg/g。用获得的高生物量富硒产朊假丝酵母制作饲料添加剂,通过补料培养,获得生物量为19.128 g/L,发酵液中总有机硒量为10 089μg/L。     

一株产朊假丝酵母10 L罐发酵工艺优化

[目的]优化产朊假丝酵母10 L罐发酵条件,提高产朊假丝酵母发酵产率.[方法]在10 L发酵罐中研究溶氧量和pH控制方式对产朊假丝酵母分批发酵的影响.[结果]当装液量为7L且通气量控制在8 L/min、搅拌转速达到300 r/min即可满足产朊假丝酵母生长对溶氧的需求.通过流加碱的方式控制发酵pH环境,结果显示,流加氨水控制pH在5.5时最佳.[结论]通过优化发酵溶氧量和pH,产朊假丝酵母干重产量提高了54;,优化成效明显.     

响应面法优化制备高富硒产朊假丝酵母

考察了发酵条件对产朊假丝酵母富硒能力的影响。通过单因素的筛选,对酵母富硒能力影响较大的3个因素:亚硒酸钠浓度、初始pH值及培养温度,以胞内总硒含量为响应值,利用响应面法对其进行优化。结果显示:在培养时间30 h、加硒时间对数生长中期、亚硒酸钠浓度35 mg·L^-1,初始pH 6.6、接种量10%、培养温度27℃、装液量150 mL/500 mL的条件下,最大的菌体生物量为6.87 g·L^-1;胞内总硒含量达到12 639.7μg·L^-1,硒含量为1 839.8μg·g-1,其中亚硒酸钠转化率为79.1%,有机硒含量占90%以上;胞内实际总硒含量与数学模型理论值12 518.8μg·L^-1相差不显著,响应面法能较好地优化产朊假丝酵母富硒工艺条件。     

产朊假丝酵母和DCDHCHO联合工艺处理皂素废水

采用产朊假丝酵母预处理和DCD-HCHO絮凝剂再处理的联合工艺处理皂素废水.通过单因素试验和正交试验来分析和确定联合工艺的最佳处理条件.结果表明:1)产朊假丝酵母法预处理的最适条件为温度25℃、pH5.5、接种率10％、发酵时间3 d;2)DCD-HCHO絮凝剂法再处理的最适条件为pH值7、DCD-HCHO投加量4 m...     

马铃薯淀粉渣固态培养产朊假丝酵母的培养基优化研究

利用马铃薯废渣为主要原料,固体培养产朊假丝酵母菌。通过单因素实验确定其最优加水量为100%与接种量为10%,设计并实施了葡萄糖、硫酸铵、水、磷酸二氢钾、硫酸镁五因素四水平的正交实验,发酵后测定菌数,确定了最佳的培养基配方:葡萄糖9%、磷酸二氢钾0.1%、水与物料1:1,在此配方下,接种量10%,30℃培养48h,菌量最高可达6.63亿个/g。     

产朊假丝酵母C-27利用甜高梁秸秆汁产SCP的培养基优化

应用二次正交旋转组合试验设计方法对产朊假丝酵母C-27产单细胞蛋白(SCP)的发酵培养基组分(甜高粱秸秆汁、葡萄糖、蛋白胨、MgSO4和KH2PO4)进行了优化.结果显示,甜高粱秸秆汁和蛋白胨的浓度对SCP的产量有显著的正效应,而其他组分未表现出显著的影响.产朊假丝酵母C-27产SCP最终的优化发酵培养基配方为:甜高粱秸秆汁220 mL/L、葡萄糖3.25 g/L、蛋白胨37.5 g/L、MgSO4 0.325 g/L 、KH2PO4 0.325 g/L.该优化的发酵培养基配方下SCP产量达8.72 g/L,比初始发酵培养基配方(甜高粱秸秆汁120 mL/L、工业葡萄糖20 g/L、工业蛋白胨20g/L、MgSO4·7H2O 2.0 g/L、KH2PO4 2.0 g/L)下的SCP产量(7.00 g/L)提高了24.57％.     

粟酒裂殖酵母mae1基因的克隆及其在产朊假丝酵母中的整合表达

以粟酒裂殖酵母基因组DNA为模版,逆转录获得cDNA;以cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增,得到苹果酸通透酶(mae1)基因,将其与pMD-18T连接并测序.结果表明cDNA全长为1316 bp,编码438氨基酸,分子质量49ku,与已报道的mae1基因序列的同源性达到99％.mae1与整合型表达质粒...     

生物絮团的培养及影响因素

该研究选择2种氮源(氯化铵和人工配合饲料)对生物絮团进行培养实验。经12d的培养,结果表明:第1~5天,饲料组生物絮团的沉降量高于氯化铵组。第5天时,氯化铵组和饲料组的生物絮团量分别达到1.6m L/L和3.2m L/L;第6~10天,氯化铵组生物絮团沉降量高于饲料组。第10天时,氯化铵组和饲料组的生物絮团量分别达到6.5m L/L和6.1m L/L;第11~12天,饲料组生物絮团的沉降量高于氯化铵组。至实验结束,氯化铵组和饲料组生物絮团形成量分别达到7.2m L/L和8.8m L/L。所以采用投喂人工配合饲料培养生物絮团的方式效果更好。     

一株产朊假丝酵母菌表达体系的研究初报

产朊假丝酵母是一种GRAS生物,已经作为添加剂广泛应用于食品和化妆品行业. 它在作为宿主菌的表达系统方面的研究也有报道.但目前国内尚无产朊假丝酵母通用的高效表达体系的报道.简单介绍了其在国内外的研究进展.并以青贮饲料中的一株产朊假丝酵母为出发菌株,结合项目研究,就构建产朊假丝酵母表达载体的几个元件进行重点评述.研究结果表明:初步构建了一种产朊假丝酵母通用的整合表达载体,对其表达体系的应用进行了初步探索.为微生物青黄贮菌剂的分子改良及应用提供一定的理论基础.     

克鲁丝假丝酵母原生质体形成与再生条件的研究

研究了菌龄，酶浓度，酶作用时间，脱壁促进剂，渗透压稳定剂对克鲁丝假丝酵母（C.krus)原生质体形成与再生的影响，通过单因子试验，综合考虑形成率与再生率后，确定选用对数生长中期的菌体，以17%蔗糖为渗透压稳定剂，0.1%β-巯基乙醇进行预处理，2%蜗牛酶30℃作用60min为制备克鲁丝假丝酵母原生质体的最佳条件。     

施用生物菌剂对烤烟产质量的影响

为明确不同生物菌剂在烤烟上的应用效果,开展田间小区试验,研究溶磷解钾微生物菌剂、土著菌扩繁剂对烤烟生长发育及产质量的影响.结果表明,与CK(常规施肥)相比,团棵期T1(常规施肥+土著菌扩繁剂+土壤溶磷解钾微生物菌剂)、T2(常规施肥+土著菌扩繁剂)处理烤烟农艺性状指标、病毒病发病率及病情指数差异较小;平顶期T1和T2处...     

利用假丝酵母进行棉仁饼固体发酵的培养基筛选

以棉仁饼为原料,热带假丝酵母ＺＡＵ－１为菌种,采用固体发酵技术,对无游离棉酚的酵母饲料进行了研究,探讨了不同原料对酵母饲料发酵的影响,筛选出较合理的固体发酵培养基：棉仁饼６０％,大米蛋白粉２５％,麸皮１０％,饴糖２％,酒糟１％,ＭｇＳＯ４５Ｈ２Ｏ０．２５％,ＫＨ２ＰＯ４０．７５％,ＦｅＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．８０％,ＺｎＳＯ４７Ｈ２Ｏ０．２０％,ＭｎＳＯ４Ｈ２Ｏ０．０６％,ＣｕＳＯ４５Ｈ２Ｏ０．０４％和ＣｏＣｌ２６Ｈ２Ｏ０．０２％．     

养殖密度对墨吉明对虾肠道和生物絮团菌群的影响

运用Miseq高通量测序技术,分析高、中、低3种养殖密度(700、300、100尾/m3)下墨吉明对虾肠道和其养殖系统中生物絮团的菌群结构。结果显示：对虾肠道菌群中,高密度组的丰富度和多样性均最高,丰富度随放养密度的增大而增加,而在生物絮团菌群中,高密度组的丰富度最低;在门水平上,肠道和絮团样本菌群均以变形菌门(相对丰度49.25%~80.33%)、放线菌门、拟杆菌门、绿弯菌门为主,但丰度差异较大;在属水平上,优势菌属的组成和所占比例明显不同,梭菌属、Spongiibacter、Faecalibacterium、Rhodovulum、Blautia仅在肠道样本中存在,Coccinimonas仅在絮团样本中存在;肠道样本中,中密度组弧菌属的相对丰度最小,为5.23%,高密度组弧菌属的相对丰度最大,为23.39%,絮团样本中,低密度组弧菌属的相对丰度最大,为16.15%,中、高密度弧菌属的相对丰度均较小,分别为5.51%和4.20%;随养殖密度增大,肠道样本中拟杆菌属的相对丰度减小,分别为1.36%、0.41%、0.02%,而不同密度絮团样本拟杆菌属的相对丰度差异不明显。可见,生物絮团养殖模式下,养殖密度对墨吉明对虾的肠道和絮团菌群的影响较大。