我国牛源金黄色葡萄球菌耐药现状及药敏检测方法探讨

为调查我国牛源金黄色葡萄球菌的临床耐药现状,对2009年以来新疆、浙江、山东、内蒙古和上海五省区不同地方分离的120株金黄色葡萄球菌用纸片扩散法进行临床药敏试验。结果显示,新疆分离株对红霉素、克林霉素、青霉素、复方新诺明、多西环素、四环素耐药,22%的菌株对头孢西丁耐药,43%的对氯霉素耐药,64%的对环丙沙星耐药,58%的对庆大霉素耐药;其它4地区分离株耐药情况更为严重,除头孢西丁以外,对其它9种抗生素均耐药。对菌株的多重耐药情况分析发现,新疆分离株中对5种以上抗生素耐药的占86.1%,对10种抗生素完全耐药的占17.4%;而内地分离株的数据为100%和38.2%。此外,在试验中鉴定出33株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,新疆19株,占新疆菌株的22.1%,内地四地区14株,占内地分离株的41.2%。结合2005~2009年间发表的相关耐药数据的分析结果,研究显示,我国牛源金黄色葡萄球菌呈现多重耐药,且出现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,并在不同地区分离株中占有一定的比例;研究还发现,新疆分离株与浙江、山东、内蒙古和上海四地分离株的耐药情况有较大差异。此外,在整理药敏试验资料时,发现在金黄色葡萄球菌药敏试验中,药物的选择没有遵循选药规则,试验操作不规范和试验结果的报告不规范等问题,对此提出一些探讨性建议,供试验人员参考。     

新疆石河子奶牛隐性乳房炎源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解石河子地区部分规模化奶牛场奶牛隐性乳房炎源金黄色葡萄球菌的生物学特性及药物敏感性,为科学防治该病的发生提供参考依据,本试验选择了石河子周边地区不同规模的11个奶牛场,通过采用LMT法检测其隐性乳房炎的感染率,并从采集到的313份隐性乳房炎奶样中分离鉴定金黄色葡萄球菌,同时采用纸片扩散法（K－B法）对分离株的药物敏感性进行了分析。结果表明,试验区奶牛隐性乳房炎的总阳性率为44．56％（869／1950）,金黄色葡萄球菌的分离率为44．71％（93／208）;药敏试验结果表明,大部分菌株对阿莫西林、红霉素、四环素表现为高度耐药,耐药率分别为92．30％（24／26）、80．77％（21／26）、80．77％（21／26）;对庆大霉素、氧氟沙星、头孢唑啉表现为敏感,敏感率分别为57．70％（15／26）、76．92％（20／26）、76．92％（20／26）;部分菌株对克林霉素中度敏感,敏感率为46．15％（12／26）。建议在选用抗生素治疗奶牛隐性乳房炎时,以流行菌株的药物敏感性为依据。     

我国部分地区奶牛乳房炎病例中金黄色葡萄球菌血清型及毒力调查

为了解我国奶牛乳房炎病例中金黄色葡萄球菌(S.aureus)流行血清型和不同血清型菌株的毒力情况,本研究采用玻板凝集和双重PCR方法分别对北京、山西、内蒙古、山东、浙江和新疆奶牛乳房炎乳样中分离的191株S.aureus进行血清分型并从各血清型中随机选取100株菌以小白鼠进行毒力测定.结果表明:这些地区牛源S.aureus中,336PS型为流行血清型,占60.2％(115/191),CP8型占19.4％(37/191),CP5型占11.5％(22/191),未分型菌株占8.9％(17/191).毒力测定显示:336PS、CP8和CP5型菌株中强毒力菌株分别占65.1％、62.9％及61.9％,未分型菌株中强毒力菌株为22.2％.该调查为我国奶牛乳房炎S.aureus疫苗菌株的筛选提供了依据.     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分子流行病学调查

实验对从内蒙古自治区分离到的63株引起奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌进行了随机扩增多态性分析（RAPD），可扩增出2—13条条带，主要分为12个基因型，亲缘关系相同或相近的菌株占73％。     

新疆某规模化牛场乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

为了解新疆某规模化牛场奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的感染情况以及对常用抗生素药物的敏感程度。从该牛场采集50份乳样,采用细菌分离培养、16S rRNA鉴定、生化鉴定等方法对菌株进行分离鉴定;使用药敏纸片对已鉴定菌株进行药物敏感试验;从50份乳样中,分离出了16株金黄色葡萄球菌,分离率为32%;分离出1株大肠杆菌,分离率为2%。将16株金黄色葡萄球菌进行药敏试验。结果显示,氨苄西林的耐药率高达100%,庆大霉素和克林霉素也产生了较低的耐药性,其耐药率均为6.25%,而恩诺沙星、头孢噻呋、呋喃妥因、多西环素等具有较强的抗菌活性,其敏感率均高于80%,本试验为牛场预防乳房以及临床用药提供了科学依据。     

新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的药物敏感性状况,提高药物治疗效果,本试验通过细菌培养特性、染色特点、形态观察、生化试验鉴定出25株金黄色葡萄球菌并对其进行了耐药性分析。结果显示,25株金黄色葡萄球菌对阿莫西林、杆菌肽、复方新诺明的耐药率均在80%以上,对氟苯尼考和林可霉素却高度敏感,分别为100%和92%;耐药谱型表现为最多的菌株耐9种药物,最少的耐药3种。试验结果表明,该地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌对多种药物存在着严重的多重耐药情况。     

金黄色葡萄球菌乳房炎及其防治

研究人员在调查奶牛场的牛群保健情况时发现,由金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)引起的乳房炎依旧是一大问题.虽然我们对这种细菌有所了解,但由于还没找到彻底杀灭或有效处理的办法,我们仍需设法加以控制.     

奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为研究江苏某奶牛场金黄色葡萄球菌的耐药特点,本试验通过MALDIBiotyper系统对8株金黄色葡萄球菌疑似株进行鉴定和耐药性试验。结果显示,8株金黄色葡萄球菌疑似株均为金黄色葡萄球菌,其对青霉素、链霉素、环丙沙星的耐药率均为100%;其次,对阿莫西林的耐药率为75%;极少数对头孢氨苄、庆大霉素、丁胺卡那、卡那霉素耐药;而对四环素、多西环素、克林霉素均敏感。结果表明,该奶牛场金黄色葡萄球菌的分离率为14.55%(8/55),且均呈现多重耐药。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

[目的] 了解泰州市某奶牛场乳房炎中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）感染情况及其对常用药物的敏感性。[方法] 试验选用Baird-Parker培养基分离、生化鉴定、PCR检测等方法,对采集的9份奶牛乳房炎奶样进行分离鉴定和药敏试验。[结果] 共分离到6株葡萄球菌,进一步通过凝固酶试验和16S rDNA测序等方法鉴定其中3株为金黄色葡萄球菌。药敏试验结果显示,3株金黄色葡萄球菌对青霉素G均耐药,2株对四环素耐药,2株对红霉素和苯唑西林表现为中介。[结论] 该次分离的金黄色葡萄球菌主要对青霉素G和四环素耐药,对其他常用抗生素表现为敏感。     

呼和浩特地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性调查

奶牛乳房炎是造成世界范围内奶牛业损失最严重的疾病之一,仅在美国每年由奶牛乳房炎引起的损失达2亿美元[1]。尤其,隐形乳房炎不易察觉,又可在牛群中普遍流行,所以给奶牛业造成严重损失。据目前的报道,金黄色葡萄球菌与大肠杆菌、链球菌一样是引起奶牛乳房炎的重要致病菌。随着     

奶牛乳房炎病例中金黄色葡萄球菌RAPD-PCR基因分型的研究

用随机扩增多态性DNA 技术（RAPD）对来自2个集约化奶牛场不同奶牛乳房炎病例分出的16株金黄色葡萄球菌进行了基因分型。分别用3个寡核苷酸引物扩增，仅OLP11引物可扩增出质量良好、具有RAPD特征的条带图谱。对反应体系的退火温度、模板浓度进行了筛选，模板原倍浓度、33℃的退火温度能使所有检测菌株产生清晰、可分辨、具有较好重复性的带谱。分型结果表明，16株菌可分为2个类群，其中14株位于同一类群，大多数菌株的相关系数差距仅为0.04，这一结果提示这些菌株可能具有相同的来源和相似的遗传背景。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐氟喹诺酮类基因的检测

为了解宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌携带氟喹诺酮类药物的耐药基因的情况,采用PCR对临床分离鉴定的220株金黄色葡萄球菌的gyrA、norA和grlA基因进行了检测,并对PCR产物进行测序和分析。结果显示,gyrA基因、grlA基因和norA基因的检出率分别为80%、78.64%和78.18%。测序结果显示,grlA、norA基因的同源性为99%,gyrA基因的同源性为100%。这表明在宁夏地区gyrA、norA和grlA基因已广泛存在。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测

本研究旨在了解甘肃地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染情况,为奶牛乳房炎的防制提供理论依据。采用KB纸片扩散法,检测17株金黄色葡萄球菌对8种不同抗菌药物的敏感性;再用琼脂稀释法检测了苯唑西林、万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MICs);头孢西丁纸片扩散法和PCR扩增特异性mecA耐药基因对所有受试菌株进行全面的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测。结果表明,菌株对青霉素、磺胺异恶唑具有较强抗性,而对环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素和苯唑西林全敏感;头孢西丁纸片扩散法未能检测出表型为MRSA的阳性菌株,而PCR方法却检测出8株mecA基因阳性菌株,且这些菌株的苯唑西林MIC均小于2 μg/mL。菌株的耐药情况较严重,对甲氧西林敏感而携带mecA基因的菌株高频存在于被调查地区的奶牛场中。     

宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药性分析

为了解宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药情况,采用药敏纸片扩散法,测定了50株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对常用的17种抗茵药物的耐药性.同时采用产色头孢菌素法进行β-内酰胺酶的检测,并采用苯唑西林纸片法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检测.结果表明,所有菌株除了对利福平、万古霉素100％敏感以外,对其他15...     

长春部分地区奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性研究

采用SMT方法,从长春部分地区规模化奶牛场及散养农户各筛选30份患隐性乳房炎牛奶样品,经分离培养及鉴定,17份样品检出金黄色葡萄球菌,其中规模化牛场6份,散养户11份。通过动物致病性试验和药敏试验,结果表明,所分离的金黄色葡萄球菌均具有致病性,所有菌株对链霉素、氨苄青霉素等均具耐药性;多数菌株对头孢噻肟钠和庆大霉素等药物表现为高度敏感;个别菌株对头孢噻肟钠和庆大霉素等中度敏感。     

如何进行奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌疫苗的合理评估

奶牛乳房炎是造成全球奶业经济损失的主要原因,而金黄色葡萄球菌是最主要的病原菌。本文系统、直观地对研究奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌疫苗的科研结论进行量化总结和评估,目的是为奶牛乳房炎疫苗的研发提供新思路,为设计合理的奶牛乳房炎疫苗给动物评估试验方案提供科学依据。本文在Pubmed、Science数据库和CNKI数据库对＂奶牛乳房炎疫苗＂类的文章进行了合理的电子检索,然后对细菌疫苗、细菌类毒素疫苗、DNA-重组蛋白疫苗、单一的重组蛋白疫苗等方面的科研论文从试验设计、方法、疫苗类型和研究结果 4个方面进行了全面的分析。结果表明,采用DNA、重组蛋白新技术的疫苗和传统的细菌疫苗已取得良好效果,疫苗可以成为预防和控制金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎的最好或最有前景的一种途径。但是研究方法差异和双盲试验的缺乏阻碍对疫苗效果的合理评估。     

金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎多价疫苗的研制和免疫效果评价

为研制用于预防金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎的免疫疫苗,使用4株血清型为外膜多糖336型(336PS)、荚膜多糖5型(CP5)和荚膜多糖8型(CP8)强毒力金黄色葡萄球菌试制出金黄色葡萄球菌多价疫苗,并通过抗体水平监测、攻毒保护试验以及两个牧场的田间试验对免疫效果进行了评价。抗体水平监测显示,首免后30 d即可产生较高的抗体水平,二次免疫后有效抗体水平可持续到产后210 d;人工攻毒保护试验显示,疫苗对金黄色葡萄球菌引起的临床型乳房炎的保护率为89%;田间试验结果表明,该疫苗对奶牛临床型乳房炎的保护率在75.2%～83.3%之间,对隐性乳房炎的保护率在49.9%～52.2%之间,免疫组日产奶量较对照组平均提高1.26 kg以上。上述结果表明,所试制的疫苗可以显著降低泌乳牛金黄色葡萄球菌引起的临床型和隐性乳房炎发病率并提高产奶量。     

甘肃地区牛源金黄色葡萄球菌分子鉴定及RAPD分型

本研究目的是分离鉴定引起甘肃地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌,掌握其基因型情况。利用16S、23SrRNA保守序列PCR扩增对乳房炎奶样中的金黄色葡萄球菌进行鉴定,并进行RAPD基因分型。结果表明,310份奶样中共分离出金黄色葡萄球菌100株,RAPD结果显示这100株金黄色葡萄球菌均可得到清晰的RAPD指纹图谱,扩增产物在2～7条带之间,具有多种带型组成。通过聚类分析100株菌产生11个基因型,其中Ⅰ型4株,Ⅱ型4株,Ⅲ型10株,Ⅳ型13株,Ⅴ型7株,Ⅵ型24株,Ⅶ型16株,Ⅷ型6株,Ⅸ型4株,Ⅹ型10株,Ⅺ型2株。Ⅵ型为该地区的流行优势菌群,不同牛场各基因型菌株分布有明显差异。本研究说明牛场的环境与养殖条件对病原菌流行传播有明显的影响,这一结果对地区性奶牛乳房炎的防治提供了可靠的理论依据。     

MLVA方法对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分型研究及效果评价

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分型对预防菌株在牛体之间传播、了解菌株地域性分布特点及针对性疫苗的研制均有重要的意义。本研究旨在将多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)法应用于国内乳房炎金葡菌的分型研究,以进行分子流行病学调查。同时,将其与16-23SrRNA基因间区分析法(RS-PCR)的分型结果比较,以评价MLVA法对乳房炎金葡菌的分型效果。作者建立MLVA方法(多重PCR体系)对27株乳房炎金葡菌进行分型,同时应用RS-PCR法进行分型。结果2种方法均可将8个地区17个牛场分离到的27株菌全部分型,分型率为100%。MLVA法将菌株分为19个型,不同牛场来源的金葡菌均属于不同型,相同牛场来源的菌株除上海和北京某牛场外均属于相同型;此方法的分型力为0.969。RS-PCR法将菌株分为10个型,其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ型菌株均来源于不同地区,分型力为0.829。结果显示,MLVA分型法具有快速、操作方便和分型能力强等特点,可应用于乳房炎金葡菌的分子流行病学研究。同时,研究表明,我国不同牛场的乳房炎金葡菌具有型特异性,该结果与少数优势型金黄色葡萄球菌引起绝大多数乳房炎的报道相反。