聚乙二醇胁迫杂交桑品种桂优62丛生芽部分生化指标的变化

本文以桂优62号桑萌发幼苗为材料,用不同浓度聚乙二醇(PEG)模拟干旱胁迫,测定了可溶性糖、丙二醛和脯氨酸含量的变化。结果表明:在幼苗期,随着干旱胁迫的加重,可溶性糖和丙二醛含量逐渐降低;脯氨酸含量逐渐提高。向培养基中添加PEG筛选抗旱性组培桑苗的临界浓度为7%。     

桑树中的1-脱氧野尻霉素含量变化规律研究

综合桑品种、桑树生长季节、桑树不同药用部位以及桑叶的不同发育阶段等因素探讨桑树(Morus L.)体内1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,1-DNJ)的积累规律,期望发掘富含1-DNJ的生物资源。利用反相高效液相色谱法测定了18个代表性桑品种的摘芯芽和2个桑品种全年不同季节、不同发育时期的桑叶以及不同季节桑枝皮中1-DNJ的含量,并测定了与桑树亲缘关系相近的构树(Broussonetia papyrifera L.)等7种植物中的1-DNJ含量。在18个供试桑品种的摘芯芽中,1-DNJ含量以秋雨和沙2×伦教109最高,质量分数均达0.328 0%左右,黄鲁的1-DNJ含量最低。农桑14号和陕桑305两个桑品种冬、春季不同发育时期桑叶中的1-DNJ含量以冬芽最高,质量分数分别达到0.345 3%、0.255 7%,在开叶期和叶片成熟期较高,在缓慢生长期较低;不同季节桑叶中1-DNJ的含量均是嫩芽>嫩叶>成熟叶>老叶,其中嫩芽和嫩叶中1-DNJ含量以晚秋最高,成熟叶中以夏季最高,而老叶中的1-DNJ含量以春季最高;桑枝皮中1-DNJ的含量以中秋和晚秋期较高,夏季最低。测定的7种非桑属植物均不含1-DNJ。结果说明桑树是富含1-DNJ的主要植物资源,其中在桑园管理过程可以大量获得的桑树摘芯芽以及桑树伐条剪下的桑枝(桑皮)中均富含1-DNJ,具有重要的开发利用价值。     

温湿度及制粒工艺对犬用营养素影响

本研究采用40℃高温和90%相对湿度分别将犬用维生素预混料贮存1个月,评估高温高湿对犬用预混料品质的影响;同时使用预混料采取挤压膨化制粒工艺生产犬粮,测定制粒前后犬粮维生素含量变化。结果表明:(1)40℃处理1个月后Fe2+、维生素A、维生素E和维生素B6较初始值分别极显著降低39.95%、17.86%、22.99%和10.97%(P0.0001);(2)90%相对湿度处理1个月后预混料含水量较初始值极显著提高76.81倍,Fe2+、维生素A、维生素E和维生素B6较初始值分别极显著降低63.97%、20.41%、33.69%、84.21%(P0.0001);(3)挤压膨化制粒后,犬粮中维生素A、E、B6分别较调质制粒前极显著降低29.63%、27.81%和22.06%(P0.0001)。综合以上结果表明,犬用预混料需防范高温高湿,同时,犬粮生产时需考虑挤压膨化工艺造成的维生素损失,以确保犬粮品质。     

温湿度及制粒工艺对犬用营养素影响

本研究采用40℃高温和90%相对湿度分别将犬用维生素预混料贮存1个月,评估高温高湿对犬用预混料品质的影响;同时使用预混料采取挤压膨化制粒工艺生产犬粮,测定制粒前后犬粮维生素含量变化。结果表明:(1)40℃处理1个月后Fe2+、维生素A、维生素E和维生素B6较初始值分别极显著降低39.95%、17.86%、22.99%和10.97%(P0.0001);(2)90%相对湿度处理1个月后预混料含水量较初始值极显著提高76.81倍,Fe2+、维生素A、维生素E和维生素B6较初始值分别极显著降低63.97%、20.41%、33.69%、84.21%(P0.0001);(3)挤压膨化制粒后,犬粮中维生素A、E、B6分别较调质制粒前极显著降低29.63%、27.81%和22.06%(P0.0001)。综合以上结果表明,犬用预混料需防范高温高湿,同时,犬粮生产时需考虑挤压膨化工艺造成的维生素损失,以确保犬粮品质。     

黄花棘豆组培过程中愈伤组织诱导培养基的优化

为了诱导黄花棘豆组培过程中产生愈伤组织,本文以黄花棘豆种子发芽获得幼苗的叶片为外植体,采用正交试验,探讨在MS和1/2MS培养基上生长激素BAP、NAA和TDZ的不同浓度对黄花棘豆愈伤组织诱导的影响。结果表明:两种培养基上的种子发芽率差异不显著,均在70%以上。比较极差得到,在MS培养基中3种生长素对黄花棘豆组培过程中愈伤组织生长影响的主次顺序依次为:NAATDZ、BAP,在1/2MS培养基中的顺序为TDZNAABAP。由正交试验与数据分析可得在MS培养基中黄花棘豆出愈的最佳生长素配比为BAP浓度为1mg/L,NAA为1.6mg/L,TDZ为2mg/L,在1/2MS培养基中的最佳配比为BAP0.5mg/L,NAA 1.6mg/L,TDZ 2mg/L。     

野桑蚕和不同家蚕品系幼虫体内1-脱氧野尻霉素含量测定

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-紫外检测法测定了野桑蚕和不同品系家蚕体内的1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量,并调查了家蚕5龄幼虫不同组织不同生长时期1-DNJ含量的变化。野桑蚕与家蚕、家蚕不同品系间的1-DNJ含量存在极显著差异:野桑蚕全蚕粉中1-DNJ含量最高,质量分数平均为0.427 8%;家蚕以黄血蚕最低,平均0.220 5%。家蚕5龄幼虫不同组织的1-DNJ含量也存在明显差异:家蚕血干粉中的1-DNJ含量最高,质量分数达0.848 7%;其次是中肠、体壁和脂肪体组织,分别为0.512 2%、0.472 2%、0.308 5%;而在丝腺中几乎检测不出1-DNJ。家蚕5龄幼虫体内1-DNJ含量随发育时期呈明显变化,5龄第4天含量最高,达0.329%,第5天以后迅速下降。     

猪丹毒活疫苗合成培养基中B族维生素对培养菌数影响试验

为使猪丹毒活疫苗在合成培养基生产中的细菌培养效果更为理想,通过对自行研制合成的培养基中B族维生素含量的进行调整,以提高丹毒杆菌培养后的菌数,并在大规模生产中能够在一定范围内实现菌数可控,降低批与批之间的菌数差异,从而稳定丹毒疫苗生产。本试验在不改变其他培养基成分的前提下,通过3种不同B族维生素含量培养基进行比较发酵培养试验,同时设制传统肉肝胃酶消化汤作为对照,通过比对发现,配方2在培养后及冻干后最为稳定。     

培养基成分对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响

基于探讨适合桑黄酮类化合物合成的优化培养条件,以桑品种陕桑305为材料,研究了培养基成分及其添加量对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响。结果表明:当培养基中果糖的质量浓度为30g/L,氮元素浓度为60.02mmol/L,氨态氮与硝态氮物质的量比为0.3165,MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O的质量浓度分别为11.15、4.3mg/L,激素质量浓度为0.1mg/LNAA(α-萘乙酸)、0.5mg/L6-BA(6-苄氨基嘌呤)、0.5mg/LKT(激动素)时,有利于桑树试管苗叶片中黄酮类化合物的合成;Mn2+和Zn2+浓度能影响苯丙氨酸解氨酶活性,当培养基中的MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O分别为11.15、4.3mg/L时,酶活性最高。     

叶面施铁对假俭草草坪绿度与品质影响

假俭草对Fe缺乏非常敏感,容易出现缺Fe症状.试验在不同季节对叶面施不同浓度的Fe、N+Fe后,通过测定叶片内Fe与叶绿素含量的变化以及草坪的品质变化情况,结果表明,夏秋季叶施Fe使草坪叶片变短变窄变厚,草坪高度自然降低,叶绿素含量增加,使草坪质地变细、均一性增加、颜色深绿,提高了草坪的品质,也使根系分布范围扩大,增加了假俭草抗旱性,Fe浓度应该低于0.8 L/m2;在秋季叶施Fe可以改善草坪的绿度,延长草坪的绿期,N+Fe效果好于单独施Fe,其最佳浓度为N4g/m2+Fe0.6 L/m2.     

12个桑树品种桑叶中的1-脱氧野尻霉素含量测定与分析

基于开发我国桑树资源的药用保健功能的目的,采用柱前荧光衍生高效液相色谱法对云南省不同种的12个桑树品种桑叶中的1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量进行了检测与分析。结果表明:不同桑树品种桑叶中的1-DNJ含量有差异,其中开远蒙桑桑叶中的1-DNJ的质量比为4.070 mg/kg,其含量最高,极显著高于其他品种;水桑、开远鬼桑、河口长穗桑桑叶中的1-DNJ含量较高,显著高于其余品种;其余8个品种之间的差异不显著。     

不同全蚕粉中的1-脱氧野尻霉素含量及其对小鼠血糖浓度的影响

为探讨全蚕粉中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,1-DNJ)含量与降血糖效果的关系以及蚕体内1-DNJ的来源,测定了7个家蚕品种或杂交组合以及用5个桑品种和不同叶质桑叶饲养5龄蚕制备的全蚕粉中1-DNJ含量,同时测定了由相应的全蚕粉配制的蚕粉复合物对小鼠食后1.5 h血糖值的影响。结果表明,不同家蚕品种以及用不同桑品种和不同叶质桑叶饲养家蚕制备的全蚕粉复合物的降血糖效果均存在显著差异,凡是降血糖效果显著的全蚕粉,1-DNJ含量都处于较高水平,而1-DNJ含量低的全蚕粉其降血糖效果均较差,但降血糖活性与1-DNJ含量之间并不存在显著正相关关系,说明全蚕粉中还存在其它降血糖活性成分。养蚕用桑中的1-DNJ含量与蚕体内1-DNJ含量存在高度正相关性,而且用不含桑叶粉的人工饲料饲养的家蚕幼虫不含1-DNJ,因此证实了蚕体内的1-DNJ来源于桑叶,家蚕本身不能产生1-DNJ。     

桑树组织培养物中1-脱氧野尻霉素的产生规律初探

为探讨桑树合成1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的代谢途径,采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析法,研究了桑树品种大10的组织培养物中1-脱氧野尻霉素的产生规律。结果表明:桑树几种组织培养物中1-DNJ的质量分数在无菌苗叶片中为0.309604%,无菌苗中为0.158516%,再生芽中为0.318756%,再生苗中为0.168672%;桑树绿色愈伤组织、疏松愈伤组织、悬浮培养细胞、悬浮细胞诱导愈伤组织中不含1-DNJ。推测1-DNJ产生于由愈伤组织分化为再生芽的阶段。     

用反相高效液相色谱-紫外检测法测定桑叶中芦丁、槲皮素和1-脱氧野尻霉素的含量

为高效检测桑叶中的药用活性成分,进行了用反相高效液相色谱-紫外检测法(RP-HPLC-UV)综合测定桑叶中芦丁、槲皮素和1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量的试验。采用85%乙醇超声辅助萃取桑叶中的芦丁和槲皮素,以0.05 mol/L HCl为溶剂提取1-DNJ,并在pH8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的1-DNJ-FMOC络合物。色谱柱为Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长分别为360、360、254 nm,流动相分别为V(四氢呋喃)∶V(0.02%磷酸)=25∶75、V(乙腈)∶V(pH4.0、0.5 mol/L醋酸缓冲液)=27∶73、V(乙腈)∶V(0.1%醋酸)=36∶64。检测结果显示:芦丁、槲皮素和1-DNJ的色谱图分离效果良好,峰面积与浓度呈高度正相关,回收率(n=3)分别为99.14%、98.89%、100.85%,相对标准偏差(RSD)分别为1.01%、0.33%、1.24%。试验显示建立在以上条件下的检测方法精密度高,检测结果准确可靠。     

桑叶保健代用茶的成分测定与分析

为探明利用选792桑树品种研制出的桑叶茶中的1-DNJ、蛋白质、脂肪、可溶性总糖、铜、锌、铁、锰、磷、钾、硒、钙、18种游离氨基酸以及重金属砷、铅、镉、汞的成分含量与干桑叶中的成分含量是否存在差异,分别采用RP-HPLC法以及国标相应的检测方法,对主要成分1-DNJ及其它部分营养成分和重金属的含量进行了测定。比照分析的结果,桑叶茶和干桑叶中的蛋白质、脂肪、铁、锌、总游离氨基酸和重金属等成分含量总体无差异;主要成分1-DNJ含量比干桑叶低14.2%,可能与该成分具有热不稳定性有关。     

降糖桑叶保健茶专(兼)用型桑树品种的筛选

从200余份桑树品种(系)中筛选出含量高于当前山东主栽品种选792(对照)的8个品种,2015年重点对这9个品种1-DNJ含量、年产叶量、抗病性、耐瘠薄力性状进行了测试,结果表明:沂源黄鲁桑、青黄桑,1-DNJ含量分别比对照选792高19.69%、12.21%,方差分析达极显著水平(P0.01);年产叶量与对照相当,抗病性与耐瘠薄力也表现为中等和强,可以作为降糖桑叶保健茶专用型桑树品种或基础育种材料;选792桑叶1-DNJ含量排第九位,时下可以作为降糖桑叶保健茶兼用型桑树品种应用。     

"龙桑1号"不同部位中1-脱氧野尻霉素含量测定研究

采用高效液相色谱法测定"龙桑1号"不同部位中1-脱氧野尻霉素的含量。结果:不同部位中DNJ含量差异很大,其中桑根皮中含量最高,为0.624%;秋采桑叶中含量最低,为0.074%。     

59份野生桑桑叶中的DNJ含量及粗提物对α-糖苷酶的抑制活性

对来自云南省不同地区的59份野生桑桑叶中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量,以及桑叶粗提物对淀粉酶、蔗糖酶和麦芽糖酶的体外抑制活性进行了测定,同时采用液-质联用(LC-MS)仪分离纯化桑叶粗提物中的DNJ,并对其抑制蔗糖酶的机制进行了初步研究,期望筛选出适用于治疗糖尿病药物开发的药用桑资源,以及为解析桑叶粗提物和纯化的桑叶DNJ抑制α-糖苷酶活性的机制提供线索。研究结果表明:不同来源的野生桑桑叶中的DNJ含量存在明显差异,其中来自开远地区的岩桑桑叶中DNJ的质量分数高达0.791 1%,是具有药用开发价值的野生桑资源;不同来源的野生桑桑叶粗提物对淀粉酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活力的体外抑制率差异显著,但抑制活性的大小与样品中的DNJ含量不成正比,推测桑叶中除含有DNJ外还含有具有明显的α-糖苷酶抑制活性的多种DNJ类似物;从野生桑桑叶粗提物中分离纯化的DNJ对淀粉酶无明显抑制活性,但对蔗糖酶和麦芽糖酶有显著的抑制活性,对蔗糖酶表现为非竞争性抑制作用。