几种牛羊布鲁氏菌病抗体检测方法的比较

应用虎红平板凝集试验、试管凝集试验、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金法对牛羊血清样品进行布鲁氏菌病抗体检测,对不同的检测方法进行比较,以建立和优化动物布病简便快速的检疫诊断方法。结果显示:针对牛血清,胶体金法结果阳性率最高,虎红平板凝集试验与间接ELISA结果阳性率相似,试管凝集试验与竞争ELISA结果阳性率一致,表明胶体金法和虎红平板凝集试验的敏感性较好,而试管凝集试验与竞争ELISA特异性较好。针对羊血清,试管凝集试验、竞争ELISA和胶体金法的敏感性和特异性好于虎红平板凝集试验和间接ELISA。     

布鲁氏菌病抗体不同检测方法的比较

布鲁氏菌病(简称布病)是一种危害养殖业的重要疫病。为了筛选出布病净化过程当中适合的检测方法,从而做好动物布病的诊断和净化工作,对GB/T 18646—2002和世界动物卫生组织(OIE)推荐的布鲁氏菌病抗体检测方法进行了比较。结果表明:在检测牛、羊血清布鲁氏菌病抗体的试验中,虎红平板凝集试验与其他方法差异最大,Kappa分析值(K值)在0.122~0.701之间,两种ELISA法一致性最高,K值在0.9以上,ELISA法和试管凝集试验、补体结合试验的K值在0.329~0.566之间,一致性较差,试管凝集试验和补体结合试验的K值在0.483~0.723之间,一致性较好。说明虎红平板凝集试验的敏感性最高,但是易出现假阳性,适合初步筛选,而在确诊时应优先选择间接ELISA试验或竞争ELISA试验,其次是试管凝集试验或补体结合试验。     

济宁地区猪布鲁氏菌病流行病学调查及3种检测方法比较

为了解济宁地区猪布鲁氏菌病的感染状态,从该地区随机选择5个猪场,采集600份血液样本,以上猪场均未免疫猪布鲁氏菌病疫苗。先用布病虎红平板凝集试验(RBPT)筛选,再用试管凝集试验(SAT)和ELISA(酶联免疫吸附试验)复核。结果表明,虎红平板凝集试验共检出阳性血清样本13例,阳性率为2.17%;试管凝集试验检出阳性血清样本12例,阳性率为2.00%,与虎红平板凝集试验符合率为92%;ELISA试剂盒检出阳性血清10例,阳性率为1.67%,与虎红平板凝集试验符合率为77%。结论为:济宁地区的猪场存在布病感染,种猪的阳性率最高,其次是肥育猪和仔猪,并且在3种检测方法中,RBPT最敏感,而ELISA特异性最好。     

川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行病学调查

同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%（272/1070）,虎红平板凝集试验检测阳性率为12.7%（136/1070）,而试管凝集试验检测阳性率为9.1%（97/1070）。8个县均发现阳性布鲁氏菌病血清。与间接ELISA相比,虎红平板凝集试验的相对敏感性和特异性分别为50%和100%,而试管凝集试验的相对敏感性和特异性分别为35.7%和100%。布鲁氏菌病在川西北地区广泛存在,血清学方法是检测和监测布鲁氏菌病最常用和最简便的方法,其中间接ELISA方法最为敏感。     

含抗凝剂样品对畜间布鲁氏菌病检测结果的影响

[目的]探讨含抗凝剂样品对布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验的影响。[方法]选取2012年内蒙古东胜区周边牛、羊各50头(只),每只动物分别采集2份血液样品,其中一份用含有抗凝剂肝素钠采血管,另一份用不含任何抗凝剂的普通采血管。2份血液样品同时离心,取上清液按照动物布鲁氏菌病诊断技术进行试验。[结果]同只动物血液标本用含有抗凝剂采血管的试验结果均为布鲁氏菌病阳性,用不含抗凝剂的普通采血管结果均为布鲁氏菌病阴性。[结论]布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验不能使用含有抗凝剂的血液样品,易出现假阳性。     

新疆乌鲁木齐市基层兽医实验室检测能力比对

为了解新疆乌鲁木齐市目前的基层兽医实验室检测能力,利用样品比对方法,对辖区内8个区县实验室进行了布鲁氏菌病虎红平板凝集试验、布鲁氏菌病试管凝集试验,以及H5亚型禽流感、猪瘟、口蹄疫抗体检测等5个比对项目考核。结果显示,上述5个比对项目的样品检测符合率分别为100.0%、80.7%、86.2%、88.3%和88.4%,平均符合率为88.0%。比对结果表明,新疆乌鲁木齐市基层兽医实验室已基本掌握了常用的动物疫病血清学检测技术,其中对布鲁氏菌病虎红平板凝集试验检测技术掌握较好,而对其他4个比对项目,尤其是布鲁氏菌病试管凝集试验检测技术,还需进一步提高检测水平。比对发现,2012—2015年的样品检测符合率均在90%以上,而在2016和2017年分别降至76.4%和84.9%,表明乌鲁木齐市基层兽医实验室检测水平还不稳定。这可能是实验室技术人员减少,且岗位不固定引起的。为此,应进一步加强基层实验室专项技能培训,稳固与提升基层兽医实验室检测能力。     

鲁山县尧山白山羊3种疫病血清学调查

研究旨在掌握河南省鲁山县尧山白山羊常见疫病流行情况,为进一步防控疫病提供基础数据。应用虎红平板凝集试验、试管凝集试验、ELISA试验和正向间接红细胞凝集试验对鲁山县不同羊场共563份血清样品进行了布鲁氏菌病、副结核病流行学和O型口蹄疫免疫抗体监测。结果表明:鲁山县尧山白山羊O型口蹄疫抗体效价合格率94.49%;副结核病阳性率7.28%;应用虎红平板凝集试验和试管凝集试验诊断布鲁氏菌病,阳性率分别为3.55%和3.02%,两种方法检测阳性率差异较小。说明布鲁氏菌病和副结核病在被调查羊群中广泛流行,应引起养殖户和相关防疫部门的重视;山羊O型口蹄疫免疫与防制工作较为有效,但仍需提高警惕。     

改良试管凝集试验和虎红平板凝集试验检测羊布鲁氏菌病结果比较

虎红平板凝集试验方便、快捷,目前已广泛应用于养殖场羊布鲁氏菌病的普查,但其假阳性情况有待探究。利用改良试管凝集试验对虎红平板凝集试验检出的阳性个体进行分析,发现阳性率仅为88.8%。表明虎红平板凝集试验存在假阳性,可先用虎红平板凝集试验进行大面积普查,阳性样品再用改良试管凝集试验复核。     

两种诊断制品对临床样品中布鲁氏菌抗体的检测比较

本研究以国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646-2018)中的试管凝集试验方法为确诊金标准,对353份临床牛、羊和猪血清样品进行确诊,然后分别采用虎红平板凝集试验抗原和抗体检测试纸条,对该353份临床血清进行检测,比较两种诊断制品在布鲁氏菌病初筛中的差异。经统计分析发现,虎红平板凝集试验抗原敏感性为100%(23/23),特异性为97.88%(323/330),与确诊结果间的Kappa值为0.86;布鲁氏菌抗体检测试纸条敏感性为100%(23/23),特异性为99.39%(328/330),与确诊结果间的Kappa值为0.95,两种方法的重复性试验结果均一致。试验结果证明,布鲁氏菌抗体检测试纸条和布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原都能满足布鲁氏菌病初筛的需求;由于布鲁氏菌抗体检测试纸条的储存、运输和操作的便捷性,在部分地区或特殊环境下可替代布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原用于布鲁氏菌病初筛。     

2018-2023年西昌市某奶牛场布鲁氏菌病血清学监测分析

为掌握西昌市某奶牛场布鲁氏菌病流行情况,做好奶牛布鲁氏菌病的防治工作,2018-2023年连续六年对该奶牛场采集血清样本,累计采集2 201份血样,经西昌市动物疫病预防控制中心兽医实验室采用虎红平板凝集试验（RBT）、间接酶联免疫吸附试验（iELISA）进行初筛;运用试管凝集试验（SAT）、竞争酶联免疫吸附试验（c ELISA）进行复核。结果显示,2018-2023年虎红平板凝集试验初筛阳性数分别为5、6、4、8、7、0,初筛阳性率分别为1.5%、1.89%、1.25%、1.96%、1.98%、0;间接酶联免疫吸附试验初筛阳性数分别为4、4、3、8、5、0,初筛阳性率分别为1.20%、1.26%、0.93%、1.96%、1.41%、0;试管凝集（SAT）试验与竞争酶联免疫吸附试验（c ELISA）的复核结果显示,2018、2019年阳性数分别为2和1,阳性数占总群分别为0.60%和0.32%,2020-2023连续四年均为阴性。针对奶牛布鲁氏菌病流行特点及血清学检测结果,制定符合该牛场布鲁氏菌病净化的相应防控措施,以期预防控制奶牛布鲁氏菌病的发生,能够及时发现并淘汰病畜,为奶牛健康生产...     

兰州市城关区犬布鲁氏菌病血清学调查与分析

为了解甘肃省兰州市城关区犬布鲁氏菌病的流行情况，从兰州市城关区动物医疗机构和兰州市流浪动物救助站共采集犬血清343份，采用光滑型虎红平板凝集试验、粗糙型虎红平板凝集试验、通用型胶体金检测法和光滑型胶体金检测法进行检测，对4种方法检测出的阳性血清进行通用型快速PCR复检；对光滑型虎红平板和粗糙型虎红平板凝集试验检测出的阳性血清再分别进行光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检。结果表明，4种方法共检出34份阳性血清，其中抗体检测法虎红平板凝集试验、试管凝集试验及布鲁氏菌通用型抗体检测试纸条分别检测出阳性血清22份、18份和12份，抗体阳性率分别为6.4%、5.2%和3.5%;抗原检测法通用型快速PCR检出阳性血清25份，抗原阳性率为7.2%。22份虎红平板凝集阳性样本经光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检，共检出阳性血清18份，且均为粗糙型；布鲁氏菌光滑性抗体金标快速检测卡检测均为阴性。说明兰州市城关区犬感染的主要是粗糙型布鲁氏菌，快速通用型荧光PCR的阳性检出率最高。     

黔西南州羊布鲁氏菌病的血清学监测及分析

采用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)方法对采自不同养羊场的7 654份羊血清样本进行布鲁氏菌病血清学监测,结果显示89份阳性,表明本地区羊群存在不同程度的布鲁氏菌感染。监测结果为防控布鲁氏菌病提供理论依据,为制定本病的防控措施、净化奠定了基础。     

奶牛布鲁氏菌病微量凝集试验诊断方法的建立

为探索操作简便、快速、实用的奶牛布病诊断方法,本研究建立了奶牛布鲁氏菌病(布病)诊断96孔V型板微量凝集方法,并优化了试验条件。结果显示,抗原的最佳稀释浓度为1:20,反应最适温度为37℃,反应时间为24 h;为验证本研究建立的微量凝集方法的准确性,对120份奶牛布病虎红平板凝集试验阳性血清样品进行微量法凝集和试管凝集试验,结果显示,微量法与虎红平板凝集试验的符合率为83.3%,试管法与虎红平板凝集试验符合率为80.0%。提示,微量凝集试验可以作为试管凝集试验的替代方法,应用于规模化奶牛场布病的诊断和检疫。     

一例草原黄牛携带布鲁氏杆菌病调查及分析

目的:通过对牛群秋季例行检疫,检出来一头公牛携带布鲁氏杆菌,检验过程及讨论分析,说明在布病稳定控制区必须采取综合防治措施才能有效控制布鲁氏菌病,为降低动物及人的感染风险具有重要参考价值。方法:遵照《动物布鲁氏菌病诊断技术》国家标准方法 (GB/T 18646-2002):虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和补体结合试验(CFT)复合。结果:(1)虎红平板凝集试验RBPT方法结果示(+);(2)布鲁氏菌血和淋巴液涂片检验,淋巴液片中检出布鲁氏杆菌(+),呈红色多数集结细胞内短小杆菌,只有少数在细胞外;(3)试管凝集试验SAT方法结果显示:1:100(++);结论:该牛确诊患布鲁氏杆菌病。根据目前松原地区布病发展趋势,采取综合防治措施予以控制。牛应该预防接种布氏杆菌19号活菌苗。     

抗凝剂对动物布鲁菌病虎红平板凝集试验的影响

为探讨含抗凝剂样品对动物布鲁菌病虎红平板凝集试验的影响,采集猪、牛、羊等不同动物的血液各10份,经柠檬酸钠、EDTA、肝素钠等抗凝剂处理后与对应的自然凝固、立即离心获得的样品分别进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验,比较两种试验结果的差异。结果显示,经抗凝剂处理后的血浆样品虎红平板凝集试验结果均为阳性,试管凝集试验均为阴性,而自然凝固的血清样品两个试验结果均为阴性,不同处理方式造成的虎红平板凝集试验结果差异现象不受动物种类的影响。抗凝剂对虎红平板凝集试验影响非常显著,对试管凝集试验无影响。因此,临床上用虎红平板凝集试验进行动物布鲁菌病筛查时,不能使用含有抗凝剂的血液样品,否则会出现严重的非特异性凝集现象。     

融水县家畜布鲁氏菌病血清学调查

为进一步了解融水县家畜布鲁氏菌病防控成果,全面了解融水县家畜布鲁氏菌病的流行病学情况,2013年,笔者采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验法对辖区内20个乡镇的猪100份、牛100份、羊75份血清进行了检测。结果发现：采用虎红平板凝集试验法检测的275份血清检出15份阳性（其中猪5份、牛5份、羊5份,且均来自同一个乡镇）,其余260份血清均为阴性;但采用试管凝集试验法对虎红平板凝集试验阳性的20份样品进行检测,结果均为阴性。     

羊布鲁氏菌病不同血清学检测方法的比较

羊布鲁氏菌病用不同血清学检测方法进行检测,对虎红平板凝聚试验、试管凝集试验、竞争ELISA抗体检测三种检测方法进行了比较分析,得出不同血清学检测方法对布鲁氏杆菌病的检测效果.     

2017—2021年新疆伊吾县牛羊布鲁氏菌病血清学监测

为掌握伊吾县羊牛布鲁氏菌病(简称布病)的流行特点和净化效果,依据国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》,用虎红平板凝集试验(RBT)初筛,试管凝集试验(SAT)确诊的方法,2017—2021年连续5年对伊吾县养殖场户所有牛羊采集血样进行布鲁氏菌抗体检测,共检测牛羊血清样品1040792份,检出阳性样品7005份,平均阳性率...     

庆阳市2009～2013年间布鲁氏菌病流行病学调查

基于分析庆阳市畜间布鲁氏菌病（Brucellosis）流行特征、疫情变化趋势及原因,为制定布鲁氏菌病防治对策提供科学评价依据.按照《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T 18646～2002）虎红平板凝集试验（RBPT）和试管凝集试验（SAT）操作方法进行采样和检测.共检测羊、牛、猪、犬血清共计209 864份,检出布病阳性血清1415份,阳性率为0.67％.     

福建省石狮市牛羊布鲁氏菌病流行病学调查和分析

通过采集牛羊血清样品,进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验,掌握牛羊群布鲁氏菌病感染状况,并通过全县(区)问卷调查,探寻牛羊养殖布鲁氏菌病发生的风险因素,为牛羊布鲁氏菌病的综合防控提供技术支持。