猪囊虫循环抗原的特异性

用兔抗囊虫粗抗原IgG,以ELISA双抗体夹心法检测病、健猪血清,阳性率分别为10.68％和5.30％,两者之间无显著差异;经免疫复合物解离处理后,病、健猪血清的阳性率分别为35.29％和2.3％,两者之间差异显著。琼脂凝胶双扩散试验查明,某些病、健猪血清中存在一种共同的抗原成分,导致交叉反应。这种成分不易被3.5％PEG沉淀。病猪血清中还存在一种特异抗原成分,其反应性强,主要以免疫复合物的形式存在。     

琼脂扩散试验检测羊口疮病毒

以羊口疮痂皮毒抗原接种家兔制备高免血清,经琼扩试验检测血清价为1∶16;通过抗原与兔抗羊口疮高免血清的方阵分析,确定兔抗羊口疮高免血清诊断抗体的最佳稀释度为1∶4;该诊断抗体对5份不同地区的羊口疮疑似病料都呈现特异性反应,不与山羊痘疫苗毒、口蹄疫疫苗毒和羊正常皮肤抗原发生交叉反应。琼脂扩散试验检测羊口疮病毒是一种简便、易于判断、实用性强的诊断方法。     

牛支原体间接ELISA检测方法的建立

以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法。通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化。用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测。结果:抗原最适包被浓度为200μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327。用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性。     

抗猪囊虫循环抗原杂交瘤细胞系的建立和鉴定

建立了8株抗猪囊虫循环抗原(CA)的杂交病细胞系。其中6F12和2E7为抗囊虫特异McAb;McAb 1C6、1C7、1B5、4D9、2B9和8D8与囊虫、(?)球蚴、细颈囊尾蚴抗原均可发生反应。这些McAb的腹水ELISA效价为105～107,细胞培养上清液效价为102,并均可与病猪血清中的囊虫CA反应形成沉淀线。用1B5、6F12和8D8分别致敏血球,以反向间接血凝试验检测98份囊虫病猪血清,检出率分别为70.41%(69/98)、6.12%(6/98)和7.14%(7/98)。本研究制备的McAb可用于猪囊虫循环抗原检测。     

禽网状内皮组织增殖病琼脂免疫扩散抗原的研制及应用

禽网状内皮组织增殖病（ＲＥ）琼脂免疫扩散抗原为淡粉红色液体，具有良好的特异性，与抗鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、禽白血病、鸡传染性贫血病、鸡新城疫病毒标准阳性血清不发生交叉反应。抗原还具有良好的敏感性，在实验室对人工感染ＲＥＶ的ＳＰＦ鸡７天即可检出抗体，检出率为４０％，１４天检出率为１００％。抗原在３７℃保存７天，在１５℃保存１５天，在４℃保存３０天，在－２０℃至少保存１８０天，未见效价下降。用本抗原检查血清沉淀抗体来诊断ＲＥ，是一种特异，敏感简便的方法，适于在生产中推广应用。     

应用间接免疫荧光技术快速检测猪细小病毒抗原

用免疫荧光直接法检测组织病料中的猪细小病毒（ＰＰＶ）抗原时,因病毒粒子小,检出率较低。为提高检出率,又适于检验部门的应用,将猪细小病毒高免血清与胎儿组织中ＰＰＶ抗原形成特异的反应,再加兔抗猪ＩｇＧ荧光抗体,扩大抗原抗体反应的范围来提高检出率,建立了间接免疫荧光诊断技术。通过特异性试验,阻断试验,证明此技术特异敏感、快速（５小时内即可报告检验结果）用该技术对黑龙江和辽宁省９个猪场送检的３２头（窝）病例进行检测,阳性率为２５％。     

应用间接血凝技术诊断马脑脊髓丝虫病的研究

用DEAE-Sephadex A50柱层析法对粗抗原进行分离纯化,用琼脂凝胶双扩散法对分离的成分进行抗原性分析,查用旧含0.2M NaCl的PBS洗脱的部分(SD_(0.2)为特异抗原成分,而用含0.35M NaCl的PBS洗脱的部分(SD_(0.35))为交叉反应成分。用组抗原致敏的血球检测抗体时,健马血清的阴性符合率为22％,而用(SD_(0.2))致敏的血球检测时阴性符合率为100％。本项研究首先应用反向间接血凝技术险出病马血清中的循环抗原。用SD_(0.2)致敏的血球检测抗体,同时用反向间接血凝技术检测循环抗原,对发病马的总检出率为82.2％。对自然感染病马系列血清的检测结果表明,病马均能在发病前检出抗体;循环抗原出现在感染早期尚未检出抗体之前和感染后期抗体转阴之后。     

应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病的研究

在猪囊虫病的研究中发现在病、健猪血清中除存在着某些抗原性相同的成分引起交叉反应外,在病猪血清中还含有一种特异循环抗原成分。为了弄清囊虫病猪对此循环抗原的免疫应答状况,自囊虫虫浆浸提物(粗     

用琼脂胶沉淀反应试验比较火鸡疱诊病毒和鸡马立克氏病病毒抗原

从6个鸡群采取了164份鸡马立克氏病阳性野外血清,通过琼脂胶沉淀反应比较试验了FC126株火鸡疱疹病毒和VCⅡ株马立克氏病病毒的A和BC沉淀抗原。试验结果,马立克氏病病毒BC抗原与全部试验血清都产生反应,而用马立克氏病病毒A抗原及用火鸡疱疹病毒的两个抗原检出试验血清的数相同,为85—86%。试验观察到,通过组织培养18代,马立     

半微量补体稀释法补体结合反应对鸡白血病病毒gs抗原检验的研究

1964年 Sarma 等创立了检查鸡白血病病毒群特异 gs 抗原的补体结合反应(COFAL 试验),并证实了它是敏感的、特异的。COFAL 试验被许多国家应用。但它有需要高度特异性抗血清和长时间培养细胞等缺点。1966年 Sazawa 等用鸽抗劳氏肉瘤病毒(RSV)血清做 COFAL 试验获得成功,并证明有较高的特异性。     

水貂阿留申病病毒CIEP抗原结合蛋白初探

以水貂阿留申病病毒对流免疫电泳(CIEP)细胞抗原为材料,经酶印迹(Westemblotting)测定,水貂阿留申病病毒CIEI细胞抗原与多克隆阳性血清反应,分子量为60000,50000和25000,而与CIEP阴性的抗水貂阿留申病病毒的单克隆抗体(Y—2—9)反应,分子量为60000,50000.因此初步确定水貂阿留申病病毒CIEP细胞抗原决定族位于分子25000蛋白上.     

桑萎缩病病原类菌原体的提纯、致病性及抗血清制备研究

用0．3mol／L甘氨酸缓冲液从病桑嫩叶提取病原类菌原体（MLO）,提取液上清经硅藻土柱层析分离,其洗脱液用高速离心浓缩,制备成部分纯化的病原MLO提纯物。采用显微注射技术,将提纯病原注射到介体昆虫体内,使病原在昆虫体内繁殖,再将获毒虫放饲在健桑苗上传毒接种,获得表现典型萎缩病症状的病株。病柔韧皮部筛管细胞的超薄切片在电镜下观察到大量病原MLO粒子,证实提纯MLO具致病性。同时用提纯病原为免疫抗原制备兔抗血清,抗血清用健桑提取液吸收后,获得仅与病桑抗原产生反应的特异抗血清,免疫电泳测验、仅产生一条沉淀带。     

应用琼脂扩散试验对鸡白血病/肉瘤病毒群特异性抗原检测的研究

应用鸽抗SR—RSV血清所建立的琼脂扩散试验可与禽成骨髓细胞增多症病毒、Rous肉瘤病毒及鸡白血病自然病例肝脏gs抗原间形成特异沉淀线,与马立克氏病等禽病病毒抗原间不形成沉淀线。本方法简便、易行,不但可于实验室检测试验样品,也可用于现地对本病的普查。     

新生羔羊溶血病的诊治

新生畜溶血病是指初生仔畜在吮食初乳后引起红细胞大量溶解的一种特殊的贫血性疾病,是由于母畜血清和初乳中存在抗仔畜红细胞抗原的特异血型抗体,引起的一种同种免疫溶血性反应。各种新生畜均可发病,但以新生马骡多见,偶见于犊牛和羔羊。笔者从事基层兽医临床工作10年,共收治羔羊溶血病38例,治愈34例。现将诊治方法介绍如下。     

免疫层析试纸条(ICS)检测禽流感抗体

以纯化的禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）核蛋白作为捕捉抗原，金标兔抗鸡抗体作为金标二抗，建立检测禽流感血清抗体的胶体金免疫层析试纸条（immunochromatographic strip, ICS）。对标准阳性血清不同滴度进行检测，ICS试验的敏感性高于琼脂扩散试验（AGP）。特异性试验证实，禽流感的ICS试验与新城疫（ND）、传染性支气管炎（IBV）、鸡传染性法氏囊病（IBD）及减蛋综合症（EDS-76）均无交叉反应。同时，用ICS试验和HI试验检测105份鸡血清，两者具有较好的符合性。结果认为：禽流感ICS具有快速简便、特异、灵敏等优点。     

利用健馬制造鼻疽补体結合反应标准血清之研究

1.利用鼻疽补体结合反应用液体抗原,按2—3日之间隔给健康马接种7—11次,可获得补体结合抗体滴度达60—80倍之高价血清。 2.在免疫过程中免疫血清和抗原与自然鼻疽患马血清和抗原呈现相同之反应域, 抗原滴度不因血清不同而有所变动。 8.人工免疫血清对液体抗原、粉末抗原及马来因等之反应关系与自然鼻疽患马血清完全一致。 4.人工免疫血清之加热试验成绩与自然鼻疽患马血清并无二致,即予65℃加热30分钟后结合价显著减低,70℃加热30分钟则几乎完全消失,75℃加热则消失殆尽。本文承本所赵庆森所长、赵桐朴副所长及朱建璋研究员的热情指导和校阅,特此一并志谢。     

应用免疫扩散试验检测猪瘟免疫抗体的研究

用原代犊牛肾单层细胞培养的牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)病毒Oregon C24V弱毒抹制备的可溶性抗原与BVD-MD阳性血清和抗猪瘟血清相反应,在48小时内即可在琼脂糖凝胶中出现明显的沉淀线;在对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫猪的血清试验中,免疫扩散试验和中和试验的结果基本一致。     

鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体的间接ELISA检测方法,应用原核表达的IBDV VP2蛋白作为包被抗原,经方阵试验确定间接ELISA试验的最佳反应条件：包被抗原的浓度为8 μg/mL,标准阴、阳性血清的稀释度为1:400,封闭液选用10 %马血清,酶标抗体最佳稀释倍数为1:15000,最佳抗原稀释液为0.01 M PBS(PH 7.2);抗原最佳包被条件为4 ℃过夜,待检血清和酶标二抗反应条件为37 ℃ 60 min,底物作用时间为15 min。待检血清的OD450nm≥0.288判为阳性,反之判为阴性。特异性试验、敏感性试验和重复性试验结果显示,该方法的特异性好、敏感高、重复性好。用建立的间接ELISA方法与商品化IDEXX-ELISA试剂盒对临床血清样品进行检测,符合率为93.5 %。该方法的建立为检测IBDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、方便经济的检测方法,为鸡传染性法氏囊病免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。     

湖北地区桑花叶萎缩病发病状况分析

桑花叶萎缩病在浙江、江苏、安徽、江西、四川、重庆、上海等我国重点蚕区发生危害。病树枝条短小,桑叶萎缩,造成桑叶的产量和质量下降,从而影响蚕茧生产。从栽桑到桑叶盛产需要较长的周期,而病害造成的损失会持续伴随,对蚕桑生产的危害极大。     

鸡包涵体肝炎病毒CELOV 株的鉴定研究

采用鸡胚有限稀释法将鸡包涵体肝炎病毒（CELOV）纯化。将纯化的CELOV在SPF鸡胚上连续传10代,对各代次的毒种均进行毒价测定,并选择不同代次进行外源病毒、抗原性等方面的系统鉴定。结果表明,不同代次的病毒毒价稳定,病毒纯净、特异,无外源病毒感染。采用不同代次病毒鸡胚尿囊液制备3批琼脂扩散试验抗原敏感、特异,用原倍、2倍稀释的抗原可以与32倍稀释的阳性血清反应,出现清晰的沉淀线。抗原不与其它病原体的阳性血清反应。用CELOV制备的琼扩抗原可用于鸡包涵体肝炎病毒感染的血清学检测。