鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察

用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。     

ND─EDS二联油乳剂灭活苗的研制

用鸡新城疫（ＮＤ）克隆３０毒株接种鸡胚，鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ）ＢＨ９１毒株接种鸭胚，分别收获ＮＤ鸡胚尿囊液毒和ＥＤＳ鸭胚尿囊液毒，用福尔马林灭活，二者混合后，加入１０号白油油相中，制成ＮＤ─ＥＤＳ二联油乳剂灭活苗。该苗接种在产前母鸡，可使接种鸡获得对ＮＤ和ＥＤＳ强毒攻击坚强的抵抗力。该苗安全、稳定，４℃保存期至少可达１２个月以上，适用于基层推广使用。     

Dot－ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ免疫抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫、再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平；带母源抗体（ＭＡｂ）的雏鸡于２１日龄首次免疫，效果良好；带ＭＡｂ的鸡胚于１８日胚龄接种ＩＢＤ弱毒苗，雏鸡出壳后可在较长时间内获得良好的保护。     

鸡减蛋综合症——新城疫二联苗的研制与应用

用减蛋综合症（ＥＤＳ‘７６）ＡＶ－１２７和新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ毒株，分别接鸭胚和鸡胚，收获尿囊液，福尔马林灭活，用白油佐剂乳化成二联灭活疫苗。本苗接种产量鸡后１４天产生ＮＤ和ＥＤＳ’７６抗体，１个月持续升高，而ＮＤＨＩ抗体产生时间略早。二联苗物单苗有相同的免疫效果，两者无干扰性，免疫剂量以０．５ｍｌ／只为宜。接种后９个月ＨＩ抗体仍维持在较高水平，并能经受强毒的入击，疫苗在４－８℃条件下贮存１     

鸡新城疫和减蛋综合症异源二联油乳剂灭活疫苗的研制

将鸭源鸡新城疫（ＮＤ）病毒Ｄ１０株和鸡减蛋综合症（ＥＤＳ－７６）病毒ＧＣ２株同时接种于同一鸭胚内复制，增殖 ９６ ｈ收取尿囊液，用甲醛灭活后加白油佐剂制成 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。简化了生产工艺、降低了制苗成本。经试用表明，该疫苗可有效地预防ＮＤ和ＥＤＳ－７６的发生。     

鸡新城疫、产蛋下降综合症病毒血凝抑制试验抗原的研制

新城疫病毒（ＮＤＶ）鸡胚尿囊液和产蛋下降综合症病毒（ＥＤＳＶ）鸭胚尿囊液在不同保护剂和保存条件下血凝（ＨＡ）试验结果表明，以１０％甘油做保护剂制备的抗原，在－１８℃、４～８℃和常温条件下可保存一年，其ＨＡ效价稳定。抗原制备方法简单，成本低廉，适合基层生产单位使用。     

Dot—ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫，再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平，带     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫（ＮＤ）基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４～６ｄ和１１～１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒可以检测免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染，为ＮＤ的监测提供了新手段。     

ND-EDS-76异源二联油苗田间试验研究

鸭源ＮＤＶ－Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２每株混合接种同一鸭胚，培养９６ ｈ收集尿囊液，制成ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群，在 １０，２０，３０，１８０，３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较，结果差异不显著。在免疫后 ３０，１８０，３６０ ｄ随机取鸡各 ６０只为 １组，用 ＮＤＶ－Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较，结果表明两种疫苗在 ３０，１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％，３６０ ｄ对ＮＤ和ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２％和８７％以上．对临床２００万只开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６强毒的攻击。     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｖ４株的毒价、血凝（ＨＡ）稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶＶ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０－８．３～１０－１０．１／０．１ｍＬ，２５℃存放２８ｄ、３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种、６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ＞１５０ｈ     

马立克氏病毒Z4株培养特性和免疫原性的研究

将鸡马立克氏病毒（ＭＤＶ）血清２型Ｚ４毒株第１０代（Ｚ４－１０），在对鸡马立克氏病（ＭＤ）高度易感的Ｐ系ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）单层上连续传代至第３０代（Ｚ４－３０），Ｚ４毒株空斑形成速度和空斑形态均未发生显著变化，分别以Ｚ４－１１，Ｚ４－２５和Ｚ４－３０细胞结合毒作单介疫苗，将Ｚ４－１１，Ｚ４－２０和Ｚ４－３０细胞结合毒分别与ＦＣ１２６细胞结合毒组成二价疫苗，免疫Ｐ系ＳＰＦ鸡，用ＭＤＶ强毒     

ND—EDS-76异源二联油乳剂疫苗与普通二联疫苗田间对比试验研究

鸭源ＮＤＶ—Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２毒株混合接种同一鸭胚,培养 ９６ ｈ后收集尿囊液,制成ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群,在 １０ ｄ、２０ ｄ、３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较,结果差异不显著。在免疫后３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ,随机取鸡各 ６０只为一组,用 ＮＤＶ—Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较,结果两种疫苗在 ３０ ｄ、１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％,３６０ ｄ对 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２ ％和８７ ％以上,差异不显著。对开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗,可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６自然强毒的攻击,是一种理想的生物防疫制剂。     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒Ｖ４株的毒价，血凝稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶ Ｖ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０＾－￣１０＾１０．１／０．１ｍＬ，２５存放２８ｄ，３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种，６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ〉１５０ｈ。     

鸡减蛋综合症病毒（EDS—76）的分离与鉴定

采取新疆五家渠某鸡场发病鸡病料，接种鸭胚，分离病毒，病料在鸭胚中盲传至第５代，鸭胚尿囊液ＨＡ效价达２１７，ＨＡ可被ＥＤＳ－７６标准阳性血清抑制。免疫电镜观察到了病毒颗粒，表明该病是由ＥＤＳ－７６病毒所致     

析城疫病毒强,弱毒鉴定方法的初步研究

不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、Ｌａｓｏｔａ、Ｐ和分离株Ｘ以１：１００００倍稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚、每胚０．２ｍｌ结果发现，Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力强，可５０ｈ左右致死鸡胚，Ｌａｓｏｔａ、Ｐ和Ｎ－７９较弱。Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉、肝脏、脑和尿囊液均有大量病毒存在，而Ｎ－７９、Ｐ和Ｌａｓｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在，胚体病毒极少。将ＮＤＶ经酶解后接种鸡胚、胰蛋白酶可使弱毒Ｎ－７９、     

用ELISA检测传染性囊病病毒诱导的细胞凋亡

用５株传染性囊病病毒（ＩＢＤＶ）分别感染鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）,于感染后不同时间收集接毒组与对照组的细胞进行检测,试验结果显示,接毒组与对照组细胞的ＤＮＡ在琼脂糖凝胶电泳谱上均呈现梯状条带,用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测各组细胞中降解ＤＮＡ量,发现感染ＩＢＤＶ７ｈ后,接毒组细胞降解ＤＮＡ量比对照组明显增加,且各接毒组间降解ＤＮＡ量有一定的差异,试验结果表明：各株ＩＢＤＶ均诱导ＣＥＦ发生细胞     

免疫鸡群马立克氏病病毒分离物的生物学特性

本实验在对内蒙古呼和浩特和包头的７个鸡场进行ＭＤ流行情况调查的基础上，通过病毒分离实验，首次自内蒙古呼和浩特、包头地区经ＭＤ疫苗免疫过的５个发病鸡群和１个健康鸡群中分离到６株马立克氏病毒（分别命名为ＨＡ、ＨＢ、ＨＣ、ＨＥ、ＨＦ和ＢＧ），并对６株病毒在鸡胚成纤维细胞（ＥＦ）上的增殖特性、蚀斑形成、形态和毒力等生物学特性进行了鉴定。结果表明，ＭＤ在呼和浩特、包头地区鸡群中广泛流行。自然感染鸡羽囊中ＭＤＶ抗原与病毒血症呈正相关。雏鸡接种法和组织培养法用于分离ＭＤＶ时，敏感性无显著差异。应用ＣＥＦ分离ＭＤＶ是１种快速、简便、敏感、经济的方法；６株ＭＤＶ在ＣＥＦ上能良好地增殖，并引起比较规则的细胞病变，还能在ＣＥＦ上产生圆形或椭圆形的小细胞蚀斑、大小为１．０８～１．４２ｍｍ。６株ＭＤＶ对雏鸡均有致病性，其中ＨＢ、ＨＥ、ＨＦ和ＢＧ４株之间毒力差异显著，ＨＢ和ＢＧ株的毒力比京—１株ＭＤＶ强。根据以上结果判定６株ＭＤＶ均属血清Ⅰ型ＭＤＶ强毒。结合接种雏鸡的病理学检查结果确定，ＨＡ、ＨＢ、和ＨＥ为内脏型ＭＤＶ，属Ⅰ生物组；ＨＣ、ＨＦ和ＢＧ为神经型ＭＤＶ，属Ⅱ生物组。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离鉴定与免疫研究

从吉林省３个地区接种过传染性支气管炎疫苗（Ｈ１２０、Ｈ５２）后又发生肾型传染性支气管炎的鸡尸中采集了８份病料,经抗菌处理后接种鸡胚尿囊腔中进行病毒的分离与扩繁。并通过鸡胚发育观察、ＨＡ试验、干扰ＮＤＶ试验、耐酸碱试验及电镜观察,证明其中２株是ＩＢＶ。又对分离株（ＪＮ５、ＪＮ６）进行了琼脂扩散试验、回归试验及ＥＩＤ５０测定。经上述试验后,采用标准Ｔ株与ＪＮ６株病毒等量混合液制成油佐剂灭活疫苗。该苗免疫试验鸡后,气管注射攻毒法保护指数（ＰＩ）为０９３１,滴鼻攻毒法保护指数（ＰＩ）为０９６３。免疫接种４５万只鸡,免疫期为６个月,保护率达９８％以上。     

减蛋综合征贵州分离毒全基因组探针的制备及检测

为准确检测鸡群中减蛋综合征病毒感染情况,从减蛋综合征病毒（ＥＤＳ）贵州分离毒株ＨＳ－１中提纯病毒ＤＮＡ后,用地高辛标记制备了全基因组探针。在Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ中该探针不与正常鸭胚尿囊液核酸提取物及马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ发生反应,只与３株ＥＤＳ病毒（国际标准毒ＡＶ－１２７、贵州分离毒ＨＳ－１、南京分离毒（ＧＣ２）ＤＮＡ呈阳性反应,具有较高的特异性;可检测出３０ｐｇ的同源ＤＮＡ,具有较强的灵敏度     

减蛋综合征油佐剂灭活疫苗的研制

减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒南京毒株（ＮＥ４）在鸭胚中增殖后，用甲醛灭活，加入７号白油，制成ＥＤＳ油佐剂灭活疫苗，抗原量为每头份５０００血凝（ＨＡ）单位。经１２００万只鸡的试用表明，该苗能够有效地预防ＥＤＳ的发生。