石刁柏花药培养研究初报

本研究结果表明：（1）花蕾长度为1．5－2．0mm、花粉发育时期为单核中期时，愈伤组织诱导率最高；（2）接种日期影响愈伤组织诱导效果，5月初接种的花药愈伤组织诱导明显高于10月份；（3）石刁柏不同品种，倍性及植株间，愈伤组织诱导率有显著差异，UC－72品种的诱导率高于Mary washington500，二倍体植株诱导率高于四倍体植株；（4）诱导愈伤组织以1／2MS＋BA1．0－2．0mg/L naa2.0mg/l蔗糖4％较好，茎叶分化培养基为MS＋BA1．0mg/l NAA0.2mg/l＋蔗糖2％。     

八倍体小黑麦体细胞耐盐变异体发生机制初步研究

对同一植株不同分蘖进行幼穗、花药培养,分别诱导双、单倍体愈伤组织。继代选出生长好的无性系用于耐盐变异体筛选,测定各无性系出现耐盐变异体的频率。计算单、双倍体无性系的变异体频率之比值（H/D）。据变异体发生机制的不同会导致单、双倍体愈伤组织出现变异体频率的不同,将几种可能机制的理论H/D值与实测H/D值比较分析,发现八倍体小黑麦体细胞耐盐变异体的发生机制是具有显性作用的基因扩增,而非严格意义上的基因显性突变。     

茄子小孢子培养技术研究

[目的]开展茄子小孢子培养技术研究,为茄子单倍体育种在生产实践上应用提供技术支持.[方法]以6个不同基因型茄子栽培品种为试材进行小孢子培养,探究基因型、花药预处理、花药壁组织及供体植株生长环境对茄子小孢子培养的影响.[结果]6个茄子栽培品种均能诱导出愈伤组织,但诱导频率差异明显,其中,37号和128号品种的小孢子愈伤组织诱导频率极显著高于其他品种(P< 0.01,下同);6个茄子品种中仅37号品种能形成再生植株,其中5株为单倍体植株,8株为双单倍体植株.茄子小孢子培养必需进行高温(36℃)热激处理,最佳处理时间6d;低温(4℃)预处理不能启动茄子小孢子脱分化形成愈伤组织,但能极大促进愈伤组织形成;花药预处理以低温(4℃)处理6d+高温(36℃)处理6d的效果最佳,愈伤组织的诱导频率达60.0个/花药;花药壁组织与小孢子共培养能促进愈伤组织形成,最佳处理时间8~12 d.供体植株在露地环境条件下小孢子愈伤组织诱导频率极显著高于温室环境条件.[结论]对露地环境条件下种植的37号和128号茄子的花药进行低温(4℃)处理6d+高温(36℃)处理6d,可获得最佳的小孢子愈伤组织诱导效果.     

马铃薯耐盐突变体的离体筛选

以4个马铃薯栽培品种的叶片为外植体进行耐盐突变体筛选,结果表明:不同品种愈伤组织的耐盐性存在差异,东农303、鄂1号两品种在细胞水平对NaCl的最大耐受质量浓度为8g/L,费乌瑞它为6g/L,夏波帝为4g/L。当继代次数低于10次,叶片耐盐愈伤组织在无盐胁迫诱导分化培养基上才有进一步诱导再生植株发生的能力;而在盐胁迫诱导分化培养基中,愈伤组织继代次数超过8次即很难继续分化再生。     

石刁柏花药培养再生单倍体植株和染色体数变异

石刁柏花药接种在MS 2,4-Dlmg/l 6—BAlmg/1 NAA0.1mg/l的培养基上产生愈伤组织.诱导率为46.15%.愈伤组织转接到MS 6-BA0.5mg/l十IBA0.2mg/l时分化芽.而形成根的培养基为MS NAA0.1mg/l.愈伤组织诱导胚状体的培养基为MS十6-BA0.5mg/l IBA0.5mg/l,胚状体萌发形成小植株.再生植株的倍性变化,单倍体植株占11.90%,二倍体28.57%,四倍体9.52%,各种混倍体50%.     

粳型杂交稻双单倍体的遗传及其育种意义

以六个粳型杂交稻的幼穗为外植体,诱导愈伤组织并分化为胚性细胞,经秋水仙素处理,使胚性细胞染色体加倍为四倍体。共获得２４３个四倍体株系,再由四倍体花药培养成双单倍体。观察到,这种四倍体性状稳定,但在少数株系中出现二倍体,此为无融合生殖的双单倍体。在获得的８６个双单倍体不同株系之间表现遗传的多样性,大多数株系性状稳定,少数株系有分离。经过性状的考查分析,双单倍体的株系中有少数株系产量优势接近或超过原供     

硫酸二乙酯诱导烟草单倍体愈伤组织耐聚乙二醇的变异

烟草花药培养获得单倍体植株，进而诱导产生单倍体愈伤组织，用硫酸二乙酯（DES）进行诱变处理，其半致死浓度为0．32％。处理后的单倍体愈伤组织接种到含有15％聚乙二醇（PEG）的筛选培养基上，PEG耐受突变体诱导率为9．8％，突变体与对照相对电导率和丙二醛（MDA）含量差异均达极显著水平。     

水稻耐盐机理的研究：Ⅱ,不同基因型愈伤组织耐盐性比较

氯化钠胁迫对水稻愈伤组织的生长有明显的影响。表现为存活率下降、生长量减少以及干/鲜值增加等。然而用上述指标进行比较,具有植株水平耐盐性差异的不同基因型,愈伤组织之间却没有显著差异,表明植株水平的耐盐程度与愈伤组织的耐盐程度之间没有直接联系。在氯化钠胁迫的情况下,耐盐基因型愈伤组织的K~+含量低于盐敏感基因型,而前者的Na~+和Cl~-含量却略高于后者。这种趋势与植株水平不一致,暗示了愈伤组织水平对无机离子的吸收可能具有与植株水平不同的机制。     

三球悬铃木体细胞同源四倍体诱导及鉴定

将三球悬铃木愈伤组织置于含有不同浓度秋水仙素的双层WPM培养基上诱导四倍体植株,用变异植株根尖细胞染色体计数和成熟叶片单细胞DNA含量测定的方法进行倍性分析。结果表明,悬铃木愈伤组织在秋水仙素浓度为1000mg.L-1的双层培养基上预培养72h处理时,四倍体诱导率最高,为20.9%。根尖染色体压片结果表明,三球悬铃木二倍体染色体数为2n=2x=42,四倍体为2n=4x=84。此外,诱变出的四倍体植株与二倍体相比,具有生长慢,茎变粗,叶片变宽,节间变短,单个气孔面积增大,气孔密度减少等特征。     

百喜草耐盐性愈伤组织的生理生化特性研究

［目的］从细胞水平分析比较百喜草耐盐性愈伤组织的生理生化特性。［方法］应用不同浓度（0、5、10、15、20 g/L）的NaCl 处理百喜草成熟种子,诱导产生耐盐的颗粒状愈伤组织和同种普通愈伤组织,研究其含水量、细胞膜透性、MDA含量、POD酶活性、SOD酶活性的变化。［结果］结果表明：随NaCl胁迫浓度的升高,百喜草耐盐组愈伤组织与对照组愈伤组织在多方面存在明显差异,前者含水量、丙二醛含量均高于后者; POD酶活性、SOD酶活性亦均高于对照组。在提高愈伤组织耐盐性诸因素中,脯氨酸起着重要作用。［结论］该研究为进一步筛选百喜草耐盐突变细胞系奠定了良好的基础。     

甘蓝游离小孢子培养及再生植株倍性鉴定研究

对108个甘蓝品种进行游离小孢子培养,计算出胚率,分析表型与出胚难易的关系。经流式细胞仪对其再生植株进行倍性鉴定,计算自然加倍率。以流式细胞仪的结果为基准对再生植株叶片气孔保卫细胞周围叶绿体数目,保卫细胞长、宽以及周长规律进行研究。结果表明:具有圆球、早熟、春甘蓝3个特性的甘蓝品种易出胚,而扁球、中熟、晚熟以及越冬甘蓝不易出胚;再生植株的自然加倍率会因基因型的不同而有较大差异;不同倍性的再生植株叶片保卫细胞周围叶绿体平均个数所得规律为:单倍体6~9个,二倍体9~12个,四倍体12~23个,且随着倍性的增加,叶绿体个数分布范围更加广泛。保卫细胞长度变化范围为:单倍体18~23μm,二倍体25~35μm,四倍体35~45μm。保卫细胞周长变化范围为:单倍体60~75μm,二倍体75~95μm,四倍体100~115μm。保卫细胞宽度随气孔大小变化而差异较大,规律不明显。在保卫细胞长度和周长均能说明倍性的情况下,显然通过测量保卫细胞的长度来判定倍性的方法更为简便。     

从黄花菜未受粉子房培养出单倍体植株

初步实验表明,培养发育时期为成熟胚囊的黄花菜未受粉子房能获得单倍体植株,产生单倍体植株的途径之一是通过卵器产生的愈伤组织分化而来。并对来受粉子房培养提高单倍体植株诱导频率进行了初步讨论。     

硬粒小麦单倍体高效再生体系的建立

硬粒小麦×玉米形成的单倍体幼胚,由于缺乏胚乳滋养往往发育不良,致使幼胚培养成苗率很低。本试验通过诱导杂种幼胚产生愈伤组织的途径,建立起高效硬粒小麦单倍体植株再生系统,从而可以大量获得单倍体试管苗,为经植株移栽和染色体人工加倍后仍能获得大量成活的纯合二倍体植株提供了保证。     

通过苹果原生质体融合获得融合体再生植株(简报)

苹果品种 Gala和富士单倍体原生质体经 PEG诱导融合 ,6 0 d左右培养产生愈伤组织 .该愈伤组织经分化诱导的再生植株 ,通过细胞学 ,同工酶和 RAPD鉴定 ,再生植株 RH- 1具有双亲共同特征为融合体植株     

光敏雄性不育水稻的花药培养及密矮64s的选育

对７个籼型光敏雄性不育系及其杂交Ｆ１进行花药培养的研究发现，光敏不育水稻虽然雄性不育，但其愈伤诱导率、绿苗产量均高于常规籼稻品种以及籼／籼、籼／粳杂交Ｆ１，光敏雄性不育系的花培后代植株中，单倍体、二倍体、多倍体的出现频率与常规品种花培后代相似，在二倍体植株中，光繁雄性不育系及其互交Ｆ１的花粉植株，９０％以上都能保持长日照下雄性不育的特性，光敏雄性不育系和常规品种杂交Ｆ１的花粉植株中，大约有２５％的     

多油辣木PKM-1花药培养获得愈伤组织

【目的】针对多油辣木(Moringa oleifera Lam.)PKM-1品种内高度杂合、种性容易退化的问题,拟通过花药培养获得双单倍体植株,实现品种内纯合。【方法】基本培养基MS添加激素2,4-D和NAA,诱导多油辣木PKM-1花药愈伤组织,对花药愈伤组织进行秋水仙素加倍,以及添加6-BA、KT和NAA分化植株。【结果】PKM-1花药愈伤组织形成与2,4-D密切相关,2.0 mg/L时愈伤组织平均诱导率6.0%;NAA诱导花药愈伤组织,效果不明显。秋水仙素和处理时间对辣木花药愈伤组织染色体加倍具有剂量效应,0.6%秋水仙素处理72 h和0.8%秋水仙素处理48 h获得相同加倍效率,二倍体诱导率达60%。没有添加秋水仙素的对照,也形成少量二倍体愈伤组织,说明辣木花药愈伤组织存在一定比例的自然加倍。添加不同浓度6-BA、KT和NAA,诱导辣木花药愈伤组织分化,但均未分化出胚状体。【结论】本研究初步建立了多油辣木PKM-1花药培养获得愈伤组织的技术体系,但分化完整植株有待进一步研究。     

（南京航空航天大学英文学报）征稿简则

采用大葱茎尖分生组织直接成苗及分化丛生苗、茎盘诱导愈伤组织培养再生植株,通过染色体压片,对大葱愈伤组织及幼苗染色体数目变化进行了研究。结果表明,茎尖分生组织培养的幼苗及丛生苗遗传稳定,其染色体未发生倍性变异,均为2n=16;愈伤组织及其再生苗遗传稳定性较差,愈伤组织染色体数变异率为43.4％.其中单倍体占6.7％、三倍体占2.5％、四倍体占10％、五倍体占4.2％、六倍体占3.3％、七倍体占4.2％、八倍体占3.3％、非整倍体占9.2％;愈伤组织分化苗染色体变异率为11.7％,其中单倍体占6.7％,三倍体占1.7％,四倍体占3.3％。     

芦笋花药愈伤组织诱导技术研究

[目的]对芦笋花药愈伤组织诱导培养技术进行详细研究。[方法]以MS为基本培养基,附加外源激素对二倍体花药愈伤组织诱导技术进行研究。[结果]二倍体芦笋花蕾长度为1.5～2.0 mm时,其诱导效果最好;采用5%高糖浓度可显著抑制花药体细胞分裂和提高花粉愈伤组织诱导率;同一品种不同植株花药愈伤组织诱导率差异显著;适合于二倍体花药愈伤组织诱导的激素配比是1.0 mg/LNAA+1.0 mg/L BA。[结论]为芦笋的品种改良与选育奠定了基础。     

利用禾谷镰刀菌粗毒素筛选抗小麦赤霉病突变体

以赤霉粗毒素为选择剂筛选小麦抗赤霉病的细胞突变体，结果表明：小麦幼胚（穗）愈伤组织抗（耐）赤霉粗毒素的最佳选择浓度为（０．５～０．６）ｘ１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ。在此浓度下，不同基因型的幼胚（穗）出愈率和愈伤组织对粗毒素的反应有差异，在１０￣（－３）～１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，愈伤组织的存活率随浓度的升高而下降。经毒素处理后的耐毒素愈伤组织较对照稍小、略紧密、微黄色，继代于不含毒素的培养基上能很快恢复生长，与对照相当，但继代于含同样浓度毒素培养基上，存活率下降９５．２％。经０．６ｘ１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ毒素处理３０ｄ后，各基因型的耐毒素愈伤组织成苗率在２０％～３５％之间，多数耐毒素愈伤组织生理上受到伤害，失去分化成苗的能力，从抗（耐）毒素的细胞系中已筛选获得田间抗性优于原供体品种的Ｒ＿１代植株９株，Ｒ＿２代植株２５株。     

苹果花培植株的过氧化物酶同工酶分析

单倍体育种是当今育种工作的一个新途径。近年来,随着花药(花粉)组织培养的进展,不少作物和果树已从花药培养诱导获得了单倍体的愈伤组织、胚状体乃至小植株。然而,经由花药培养诱导而获得的植株就有可能是起源于花药的药壁、药隔等营养体的二倍体体细胞组织,这些植株则仍然是属于营养系后代——二倍体植株;当然,也有可能确实起源于花粉配子体,这才是我们进行花药培养所需要的单倍体起源的植株。那么,如何对获得的