螺旋藻营养添加剂对蜂群王浆产量及工蜂王浆腺发育影响的研究

根据蜜蜂营养原理，设计了一种螺旋藻营养添加剂，经饲喂蜂群表明：与对照组相比，饲喂螺旋藻营养添加剂能使蜂群提高王浆产量19．82％，能延缓15日龄工蜂王浆腺退化。     

蜂王浆增产剂筛选及其应用

根据工蜂营养转化及王浆腺发育的机理，设计组合了４种蜂王浆增产剂，经试验表明：３号蜂王浆增产剂为最佳。与对照组相比，饲喂３号蜂王浆增产剂组，蜂王浆产量能提高２３．６２％～２７．１５％，能延长工蜂王浆腺发育盛期至少３ｄ。     

中华蜜蜂工蜂头部重量与王浆腺重量的相关性

研究结果表明：（１）３－１２日龄各龄工蜂的头部重量与王浆腺重量均呈强正直线相关，相关系数ｔ检验结果差异极显著（Ｐ＜０．０１）；（２）３－１２日龄工蜂（混合样本）的头重（ｘ）与王浆腺重（ｙ）呈强正直线相关，ｒ＝０．７８２３，线性回归方程ｙ＝０．５７６８ｘ－２．８５６５．相关系数差异极显著（Ｐ＜０．０１）．通过本研究我们认为：采用工蜂头部重量来研究王浆腺重量、王浆腺发育，以及与之有关的泌浆生物学是可行的．     

王浆高产蜜蜂和原种意大利蜜蜂咽下腺发育蛋白质组分析

 【目的】对王浆高产蜜蜂（浆蜂）（A. m. ligustica）和原种意大利蜜蜂（原意）（A. m. ligustica）1、3、6日龄工蜂咽下腺进行蛋白质组研究,揭示咽下腺在此阶段的发育特征。【方法】采用双向电泳方法对浆蜂和原意咽下腺进行蛋白质组研究,通过与已鉴定蛋白功能的咽下腺和蜂王浆蛋白质组图谱比较,推断部分蛋白的功能。【结果】浆蜂咽下腺在3个日龄表达的蛋白数（210、192、230）分别显著的高于原意（169、188、212）,两蜂种均在6日龄表达蛋白最多（P＜0.05）。浆蜂咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为119个,其中21个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调,14个蛋白显著下调;原意咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为107个,其中15个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调,19个蛋白显著下调（P＜0.05）。1日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为145个,其中28个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意,14个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂,浆蜂特有蛋白为65个,原意为24个;3日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为138个,其中31个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意,19个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂,浆蜂特有蛋白为54个,原意为50个;6日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为175个,其中44个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意,25个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂,浆蜂特有蛋白为55个,原意为37个（P＜0.05）。与原意相比,浆蜂咽下腺发育3个日龄特有蛋白点总数为72个。从3日龄开始在浆蜂和原意咽下腺的蛋白表达谱中出现大量的王浆主蛋白点。【结论】从工蜂羽化到6日龄这一阶段内,浆蜂咽下腺蛋白表达明显比原意活跃,6日龄是2蜂种表达最为活跃的阶段。咽下腺发育过程中的共有蛋白为咽下腺发育所必需的管家蛋白,但它们的表达模式存在较大差异。不同日龄的特异蛋白表明咽下腺在不同的发育阶段需要不同的蛋白来调控。两蜂种工蜂咽下腺都从3日龄就开始分泌蜂王浆。     

蜂王浆增产措施

蜂王浆是工蜂咽下腺和上颚腺分泌的乳状物质,是工蜂和雄蜂3日龄以内幼虫、蜂王整个幼虫期和生存期的食物。蜂王浆含有多种人体所需要的成分,是一种天然的滋补营养保健品。     

意蜂头部重量与其王浆腺重量的相关性

以意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica spinola)为材料。研究了5,7,9和11日龄共300只工蜂样本的头部重量及其王浆腺重量的相关性,发现意蜂的工蜂头部重量与其王浆腺重量之间存在着密切相关.5,7,9和11日龄工蜂头部重量与其王浆腺重量的表型相关系数(r_P)分别为0.609 0,0.829 5,0.587 9和0.450 9;遗传相关系数(r_A)分别为0.974 3,0.993 3,0.956 0和0.989 6.显著性检验结果 P<0.01,达到极显著水平,所以,用工蜂头部重量代替王浆腺重量进行选择是可行的.     

蜂王浆的保鲜与信用

温度、空气和阳光对蜂王浆的质量影响很大。蜂王浆应在低温、避光和密封条件下保存，另外蜂王浆越新鲜效果越好。目前，市场上出售的纯鲜王浆，一般是保存在-18℃以下的冷库或低温冰箱内，使蜂王浆停止生物氧化，这样可保存数年不变质。个人购买的纯鲜王浆可放在冰箱的冷冻室内，也可保存2年左右。至于蜂王浆蜜、蜂王浆口服液、蜂王浆片等，一般放在阴凉处保存。     

促进蜂王浆增产的主要技术措施

蜂王浆是工蜂咽下腺和上颚腺分泌的乳状物质,是工蜂和雄蜂3日龄以内幼虫、蜂王整个幼虫期和生存期的食物。蜂王浆含有多种人体所需要的成分,是一种天然的滋补营养保健品。     

蜂王浆高产蜜蜂与意大利蜜蜂哺育蜂唾液腺蛋白质组分析

【目的】比较蜂王浆高产蜜蜂（浆蜂,Apis mellifera liguatica）和意大利蜜蜂（意蜂,Apis mellifera liguatica）哺育蜂头唾腺、胸唾腺的蛋白质组差异,揭示唾液腺调控蜂王浆生产的分子基础,为解析浆蜂蜂王浆高产机理提供依据。【方法】解剖浆蜂、意蜂哺育蜂头唾腺和胸唾腺,提取蛋白质、液内酶切并进行液相色谱与串联质谱蛋白质组分析。采用MaxQuant软件对质谱数据定量和定性分析,利用Perseus软件对结果进行生物信息学分析。使用SignalP预测分泌性蛋白。利用ClueGO软件对唾液腺蛋白质组进行生物学进程和代谢通路富集分析。【结果】浆蜂和意蜂哺育蜂唾液腺共鉴定到2 335个蛋白,其中头唾腺1 823个,胸唾腺1 922个。浆蜂、意蜂头唾腺和胸唾腺核心蛋白表达谱相似,主要参与RNA代谢、核酸代谢、ATP代谢、蛋白质的翻译、翻译调控和分解代谢,为腺体行使生物学功能提供了必要的代谢能和核酸、蛋白质等原料。浆蜂、意蜂哺育蜂头唾腺和胸唾腺主成分分析（PCA）显示二者唾液腺分子基础在选育过程中出现了一定程度的分化。意蜂、浆蜂头唾腺分别上调表达254和333个蛋白,意蜂小分子、碳水化合物代谢等通路上调,浆蜂有机氮化合物合成、细胞氧化还原稳态、氨基酸代谢、氧化还原等通路上调,证明浆蜂头唾腺细胞蛋白质合成、氨基酸代谢旺盛、供能加强。意蜂、浆蜂胸唾腺分别上调表达412和162个蛋白,意蜂氧化磷酸化、翻译调控等通路上调,浆蜂氧化磷酸化、对有毒物质的反应等通路上调,说明浆蜂胸唾腺细胞抗逆水平提高。浆蜂、意蜂唾液腺共鉴定到43个分泌性蛋白,其中有15个也在蜂王浆中得到鉴定,蜂王浆主蛋白1、2、3、4、5、7同时在头唾腺和胸唾腺中检出,表明头唾腺和胸唾腺均参与了蜂王浆主蛋白的合成;参与花蜜转化的α-葡萄糖苷酶和参与化学信息素合成与释放的气味结合蛋白3、13、17、21同时在头唾腺和胸唾腺中检出,为花蜜转化和信息素合成奠定了基础。蜂王浆主蛋白1、2、3、7,昆虫储存蛋白70a、110,气味结合蛋白3、13、17、21以及与幼虫先天免疫紧密相关的转铁蛋白、载脂蛋白III样蛋白均在浆蜂唾液腺中高表达,说明浆蜂唾液腺信息素和蜂王浆蛋白质合成较意蜂旺盛。【结论】浆蜂、意蜂唾液腺具有相似的核心蛋白质组以保证蜂王浆蛋白质、信息素和转化酶的合成与分泌。经过长期选育,浆蜂、意蜂唾液腺分子基础出现差异,浆蜂哺育蜂唾液腺较意蜂蛋白质合成、氨基酸代谢旺盛,细胞供能、抗逆性加强且分泌性蛋白普遍在浆蜂唾液腺上调表达,为浆蜂提供了更加持久和高效的蛋白质合成系统,促成了蜂王浆的高产。     

不同取浆时间对蜂王浆产量和成分的影响

研究不同取浆时间(48 h和72 h)对蜂王浆产量和成分的影响。以意大利蜜蜂为实验材料,利用免移虫蜂王浆生产技术生产蜂王浆,测定48 h和72 h取浆时单个王台中的王浆产量和单个幼虫重量以及10-HDA的相对含量、挥发性成分和脂溶性成分等指标。结果表明:72 h取浆时王台中王浆产量和幼虫重量都显著高于48 h,但两者10-HDA含量差异不显著;两者都含有21种相同挥发性成分和15种相同脂溶性成分,但48 h取的王浆含有更多的特有挥发性成分,而72 h取的王浆含有更丰富的特有脂溶性成分。     

蜂王浆介导外源基因转移的初步研究

采用DNA延滞实验研究蜂王浆与DNA的结合能力,然后通过蜂群哺育和人工培育两种方式,对1日龄工蜂幼虫进行短期饲喂,初步研究蜂王浆介导绿色荧光蛋白基因的方法和转移情况.结果表明:在蜂群环境下,蜂王浆中的外源DNA短期内不会完全被分解;但用蜂王浆作媒介并未实现蜜蜂基因转染,蜜蜂能否通过蜂王浆介导实现基因转移,还需进一步探讨.     

产浆框两侧不同巢脾的排列对蜂王浆生产的影响

从产浆框上哺育蜂的分布、蜂王浆产量、幼虫接受率等方面研究产浆框两侧不同巢脾的排列对产浆的影响,试验证明:在蜜粉源比较丰富、群势较强的条件下生产蜂王浆,产浆框两侧排列任何巢脾,对产浆框上哺育蜂的分布和幼虫接受率都基本无影响;产浆框两侧分别排列大幼虫脾、封盖子脾、蜜脾,粉脾、空脾,产浆量差异不显著(P>0.05);浆框两侧分别排列3种子脾,产浆量差异不显著(P>O.05),因此。在产浆过程中不必调整产浆框两侧巢脾,这对指导蜂王浆生产中产浆群的管理,以及人工育王都具有很大的意义。     

蜂王浆对雄兔生长及繁殖性能的影响

 【目的】探讨蜂王浆提高动物繁殖性能的作用机理。【方法】高、低剂量组分别按体重0.2%和0.1%的量对2月龄的雄性日本大耳兔每天空腹灌胃新鲜蜂王浆,对照组灌胃0.1%体重的生理盐水。每周同一时间称重;70 d后分别检测精子密度、活力和畸形率;80 d后分别屠宰,分离主要脏器并计算脏器系数;右侧睾丸制作石蜡切片进行组织形态观察。【结果】（1）第0—8周,高、低剂量组与对照组每周龄体重差异不显著（P＞0.05）;9周后,高、低剂量组每周龄体重都显著高于对照组（P≤0.05）。屠宰测定时,高、低剂量组的雄兔睾丸、下丘脑和脾3个脏器系数都极显著大于对照组（P≤0.01）,而脑、肺、心、肝、肾和膀胱等主要脏器系数差异不显著（P＞0.05）。（2）高、低剂量组的精子密度都极显著大于对照组（P≤0.01）;低剂量组的精子活力极显著高于对照组（P≤0.01）,而对照组又极显著高于高剂量组（P≤0.01）。（3）灌胃80 d后,对照组雄兔睾丸曲细精管生精上皮细胞数量明显少于蜂王浆灌胃组。生精上皮较薄,生精上皮细胞排列疏松,中央的管腔更大,管腔内出现的细胞大部分为初级精母细胞和次级精母细胞;而蜂王浆灌胃组的曲细精管管腔相对缩小,被精子细胞以及精子所充实,细胞层数增多,精原细胞附于基膜上,初级精母细胞、精子细胞和精子依次紧密排列延伸至管腔内,核染色明显,管腔中可见大量的精子。【结论】蜂王浆灌胃能促进雄兔下丘脑、睾丸等生殖器官的发育;灌胃体重0.1%的蜂王浆对精子密度和精子活力都有明显的提高作用。     

中华蜜蜂王浆中DNA的提取方法研究

在国内外首次以中华蜜蜂新鲜王浆为材料,采用改进的苯酚-氯仿法,提取出其DNA并对其含量及纯度进行测定。结果表明:中华蜜蜂新鲜王浆中DNA的含量为66.29~105.34μg/g,平均含量为(82.95±10.39)μg/g,平均纯度(A260/A280)为1.69±0.08,以其作为模板进行RAPD-PCR扩增,扩增的条带较清晰、明亮、稳定性好。