MHC分子在动物疫病防治中的作用

主要组织相容性复合体(MHC)是个高度多态性的基因群。MHC基因产物根据结构和功能的不同可分为4种类型:MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、MHC-Ⅲ及MHC-Ⅳ。其中MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类是能够递呈抗原的分子,在调节免疫应答和免疫细胞发育中发挥作用,而MHC-Ⅲ和MHC-Ⅳ类分子具有与免疫反应相关的其他功能。在某些病毒感染的疾病中,病毒     

畜禽疱疹病毒逃避CTL识别的策略：干扰MHC-Ⅰ分子抗原递呈途径

畜禽疱疹病毒持续感染会损害养殖动物的健康，影响生产性能。借助自身强大的免疫逃避能力，疱疹病毒可以有效抵抗畜禽宿主免疫系统的识别和清除。疱疹病毒在复制过程中，充分利用宿主细胞加工机制产生多种分子类型，干扰MHC-Ⅰ介导的抗原递呈途径，从而避免被细胞毒性T细胞清除。解析病毒蛋白下调MHC-Ⅰ的分子机制是疱疹病毒研究的热点领域之一。本文总结近十年来畜禽疱疹病毒调节MHC-Ⅰ分子的研究进展，按MHC-Ⅰ递呈抗原的不同阶段详细介绍相关蛋白的分子机制，分析了病毒同源蛋白的结构域和功能差异，指出本研究领域目前存在的问题和今后需要突破的方向，以期为治疗畜禽疱疹病毒感染、开发和优化疫苗提供新的视角。     

鸡MHCⅠ分子三维结构与抗原多肽结合特征的研究进展

随着养殖规模的扩大,鸡病毒性传染病的种类和复杂程度日益增加,许多养殖场遭受了巨大的经济损失。疫苗免疫是控制鸡病毒性传染病的主要手段,但由于多种原因,使免疫鸡群仍有疫病暴发。多项研究表明,鸡主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(MHCⅠ)在抗病毒免疫应答中起着十分关键的作用,MHCⅠ决定鸡对马立克氏病毒(MDV)、劳氏肉瘤病毒(RSV)等病毒的抗性与易感。编码BF分子(鸡的MHCⅠ分子)的BF基因(鸡的MHCⅠ)包含两类Ia基因,即BF1 (以前称为BFⅠ、BFⅡ或次要的BF)和BF2 (以前称为BFIV或主要的BF)基因。在确定BF2分子结构和功能方面的研究,已经取得了相当深入的进展,之后的研究明确了BF2分子是鸡唯一的以递呈抗原方式来诱导CTL特异性免疫反应的分子。多项研究表明,鸡BF2分子三维结构与鸡马立克氏病(MD)和劳氏肉瘤病(RS)等病毒病的遗传抗性密切相关。论文以鸡BF2分子三维结构与抗原多肽结合特征为出发点,对鸡BF2分子三维结构进行分析,并着重分析其与抗原多肽相互作用关键位点的空间结构,进而从结构免疫学角度,解析鸡BF2分子对MD/RS遗传抗性的影响,为养禽业中抗病育种、病毒多肽抗原筛选及疫苗设计提供理论依据。     

禽流感病毒T细胞表位与体外重建鸡MHC Ⅰ类分子结合试验

为探讨体外重建的MHCⅠ复合体BF2-linker-β2m鉴定病毒抗原肽系统能否在体外结合抗原多肽，以及不同类的MHCⅠ类分子结合相同和不同抗原多肽表位能力的差异，本研究采用人工合成的禽流感病毒的3条多肽，猪口蹄疫病毒的2条多肽，以及来源于草鱼呼肠孤病毒的2条多肽分别与4类体外重建的串联鸡MHCⅠ类分子复合体BF2-linker-β2m进行了体外结合试验。BF2-linker-β2m与不同的病毒抗原九肽按照1：10的摩尔比进行混合，作用后取反应混合物离心除去未与MHCⅠ类分子结合的抗原多肽；然后取BF2-linker-β2m分别与抗原多肽形成的复合体，利用酸洗法将结合的多肽白MHCⅠ类分子的抗原多肽结合槽中洗脱，洗脱后的蛋白和多肽混合物离心收集洗脱的多肽溶液，随后利用C18柱对洗脱的多肽进行去盐、脱酸处理；将多肽样品冻干，用基质溶解后直接点样进行一级质谱（MS）和二级质谱（MSMS）测定，结果表明，3类体外重建的BF2-linker-β2m可与禽流感病毒多肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV结合，而不与禽流感病毒多肽TIGECPKYV以及猪口蹄疫病毒和草鱼呼肠孤病毒的4条多肽结合。证实由于MHCⅠ类分子的多态性导致复等位基因的MHCⅠ类分子结合病毒抗原表位的能力存在差异；病毒的T细胞抗原表位是MHCⅠ类分子限制性的；KILTIYSTV和LLLAIVsLV是禽流感病毒的候选表位。     

鸡主要组织相容性复合体分子结构与抗病性关系研究进展

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)作为鸡免疫系统中的一个重要部分，主要负责将抗原表位递呈到特异性T淋巴细胞中，诱导免疫应答反应。鸡MHC优势表达1个MHCⅠ分子BF2和1个MHCⅡ分子BLB2,其中MHCⅠ分子结合来自细胞质中蛋白多肽，MHCⅡ分子结合来自细胞内囊泡中蛋白多肽和细胞外源性多肽。MHC等位基因多态性对其分子空间结构和结合肽段特性非常重要。不同单倍型MHC由于等位基因的差异其肽结合基序也存在差异，进而影响MHC分子递呈抗原肽数量，影响T细胞免疫应答强度，最终导致不同单倍型鸡对同一病原体表现出抗性或易感性。与人MHC分子相比，紧凑且简单的鸡MHC优势表达单个Ⅰ类分子的特性可以决定鸡是否会对某种病原体存在抗性。为了更好地认识鸡MHC分子在病毒感染过程中的作用及抗病性机制，解析其结构并进行功能研究非常必要。作者主要介绍了鸡MHC的分子结构特征，重点比较了不同单倍型MHC分子结构差异与抗病性的关系，总结了鸡MHC肽结合基序和禽流感病毒抗原肽的鉴定工作，为进一步理解MHC分子递呈肽给T淋巴细胞的机制和开发T细胞表位疫苗奠...     

鸡主要组织相容性复合体的结构与功能研究进展

鸡主要组织相容性复合体(MHC)分子是免疫应答过程中抗原递呈的分子基础,利用其多肽结合特性可鉴定病原的T细胞表位,阐述不同单倍型鸡的抗病机制。论文总结了鸡MHCⅠ类分子的结构特征,分析了与哺乳动物MHC分子在结构上的差异,并对鸡MHCⅠ、MHCⅡ、MHCⅣ类分子在免疫应答过程中功能的研究进展做了综述。     

DNA疫苗在兽医学中的应用

DNA疫苗又称DNA免疫、核酸免疫和基因免疫等.它是指将编码抗原的基因以重组表达载体的形式经各种基因转移途径转入机体细胞,借用宿主细胞的表达加工机构合成抗原分子,以MHC-Ⅰ和/或MHC-Ⅱ类分子抗原处理和输送途径将抗原递呈给T淋巴细胞,从而激发体液免疫和细胞免疫.     

畜禽MHCⅠ分子抗原结合槽研究进展

主要组织相容性复合体Ⅰ（major histocompatibility complex, MHCⅠ）结构的解析可直观地阐释其结合抗原表位的机理,进而有效利用其特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）免疫应答。目前已报道的畜禽MHCⅠ精细结构包括牛（N*01301、N*01801）、猪（SLA-1*0401）和鸡（BF2*2101、BF2*0401、BF2*0201、BF2*1401）,以上MHCⅠ复合体结构由α1、α2和α3共3个α链和β₂m组成。其抗原结合槽多肽由A、B、C、D、E、F 6个口袋组成,一般B、F口袋决定了不同MHCⅠ分子结合不同性质的抗原多肽。鉴于同一物种不同的MHCⅠ等位基因及不同物种MHCⅠ基因的序列差异性,使得不同的MHCⅠ分子结合不同性质的抗原多肽片段,此外,不同MHCⅠ分子也可递呈同样的抗原多肽,实现不同MHCⅠ分子的交叉递呈。畜禽MHCⅠ的结构清晰地阐释其递呈抗原多肽的机理,促进了畜禽免疫学和疫苗应用的研究。     

蝙蝠pMHC I的独特晶体结构揭示了其结合高亲和力多肽的新机制

正蝙蝠是天然的病毒宿主,可无症状携带100多种病毒,其中一些病毒甚至对畜禽和人类是致命的。作为唯一可以持续飞行的哺乳动物,蝙蝠可以快速扩散所携带的病毒,形成野生交叉感染环境,直接关系动物卫生和人类健康。蝙蝠与病毒的无症状共存被认为与其独特免疫系统有关。主要组织相容性抗原分子复合体I类分子(MHC I),通过递呈外源抗原肽来激活细胞毒性淋巴细胞(CTL),与细胞免疫反应密切关联,在抗病毒免疫中发挥着重要作用。近年来关于蝙蝠免疫系统的相关研究成为了热点,并引起了普遍的关注。最新发表于美国免疫学     

鸡β2微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与纯化

β2微球蛋白（β2m）是组成主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类分子复合体的轻链分子,对于MHCⅠ类分子在细胞表面稳定表达和有效递呈抗原肽必不可少。本试验从来航鸡全血细胞中克隆了鸡β2m（Chβ2m）全基因,利用软件预测了其信号肽序列,并构建了表达成熟Chβ2m的重组载体,在大肠杆菌表达系统中以包涵体形式高效表达。将所得包涵体溶于8 mol/L脲,并在变性条件下对包涵体中的重组Chβ2m进行纯化,获得了高纯度的Chβ2m,为制备MHCⅠ四聚体及探索禽类MHCⅠ类分子结构与功能的关系提供了条件。     

SLA-Ⅰα链和β链的原核表达与抗血清制备

猪主要组织相容性复合体Ⅰ类分子又称猪白细胞抗原Ⅰ类分子(SLA-Ⅰ),参与内源性抗原在体内的递呈过程,其结构包括重链(α链)和轻链(β链)两部分。本研究首先采用RT-PCR从原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)中扩增出SLA-Ⅰα链胞外区基因和β链基因;继而利用原核表达系统获得包涵体形式表达的SLA-Ⅰα链胞外区和β链重组蛋白质;将目的重组蛋白质洗涤、复性、纯化后,经Western blot及质谱技术进行验证。以纯化的重组蛋白质免疫兔制备抗血清,经间接ELISA检测其效价达1∶256 000。以制备的抗血清进行Western blot和间接免疫荧光试验,结果显示,所制备的抗血清能够特异性地识别原代及传代PAM表达的SLA-Ⅰα链及β链蛋白。研究结果不仅为SLA-Ⅰ类分子的功能研究提供了有用的分析试剂,也为病毒感染的免疫机制研究奠定了必要的基础。     

结核杆菌感染过程中凋亡细胞通过MHC-I和CD1途径强化递呈抗原给T淋巴细胞

主要组织相容性复合体I(MHC-I)、CD1限制性CD8 T淋巴细胞具有抗结核杆菌免疫保护作用,但是它的抗原递呈分子机理仍然不清楚。本试验结果证明结核杆菌吞噬体在以MHC-I参与的免疫途径中隐蔽于胞浆中,结核杆菌感染细胞失去抗原递呈能力。此试验也证明结核杆菌诱导感染的巨噬细胞凋亡,并释放凋亡囊泡,凋亡囊泡携带抗原递呈给未感染的抗原递呈细胞(APCs)。阻断细胞凋亡则减少抗原递呈给树突状细胞和CD8 T细胞。在以MHC-I和CD-1b参与的抗原递呈途径中,未感染的树突状细胞吞噬细胞外囊泡是必不可少的环节。在结核杆菌感染诱导细胞凋亡过程中,这条递呈吞噬体中的抗原递呈补救途径无论是对结核杆菌蛋白抗原还是糖脂抗原都具有重要的意义。     

病毒干扰抗原递呈途径和细胞杀伤作用的研究现状

病毒与宿主免疫系统的相互作用非常复杂.在病毒感染早期,除了病毒抗原诱发少量抗体的中和作用外,天然免疫防御体系也发挥重要的作用,诸如巨噬细胞的吞噬作用和自然杀伤细胞的直接杀伤作用等.随着病毒感染程度的深入,需要细胞介导的细胞免疫的不断强化才能清除病毒,其中细胞毒性T细胞的杀伤作用尤为重要.但是CTL细胞的杀伤需要一系列辅助条件才能实现,即病毒进入细胞内,在特定细胞器内被特异性酶降解为断肽,并且与多态性MHC分子结合后表达于抗原递呈细胞表面,被免疫细胞识别杀伤后才能终止感染.在病毒与宿主细胞相互制约的过程中,病毒会利用其特殊的病毒编码产物干扰和拮抗宿主免疫反应,使得病毒能长期潜伏生存.近年来,随着病毒学和分子免疫学研究的不断深入,对病毒肽的加工、递呈以及细胞识别等方面都取得了一定进展.本文就这一方面作简要综述.     

新型免疫佐剂--免疫刺激复合物(ISCOM)的研究进展

免疫刺激复合物(immunostimulating complex,ISCOM)是由抗原物质与由皂树皮提取的一种糖苷QuilA及胆固醇按1：1：1混合后自发形成的一种具有较高免疫活性的脂质小泡。每个小泡直径40nm,约含10～12个分子的蛋白质。ISCOM是一种全新的抗原递呈系统,对机体有免疫增强作用,具有佐剂和抗原递呈的双重功能。应用于多种细菌、病毒和寄生虫病的疫苗,具有产生“全面”免疫应答的效力,可长期增强特异性抗体应答。     

淮南麻黄鸡MHCⅠα链基因的克隆及序列分析

典型的主要组织相容性复合体(MHC)是抗原递呈的关键分子,具有重要的免疫功能,与多种疾病密切相关。为深入了解地方品种鸡MHCⅠ类α分子的特征,尤其是抗原结合区域的特点,通过RT-PCR技术获得了29个淮南麻黄鸡完整的α链基因,并进行了分析。结果显示,淮南麻黄鸡MHCⅠα分子高度多态,但主要集中在α1和α2区域,该区变异氨基酸位点共68个,其中高度变异22个。淮南麻黄鸡MHCⅠ分子α1和α2区域氨基酸序列同源性介于79.3%~99.5%之间,仅少部分序列完全一致。鸡氨基酸序列同源性与鸭较高,介于57.6%~64.1%之间;其次为人和鼠。进化分析显示,淮南麻黄鸡MHCⅠ分子α1和α2区域分属于两个类群,但未显示明显的品种差异。此外,鸡与鸭的亲缘关系较近,与其他物种则遗传距离较远。研究结果表明,淮南麻黄鸡MHC分子在进化过程中呈现高度的多态性,但受到病原体的选择压力,多态性主要位于抗原肽结合部分的α1和α2区域。     

基因免疫与基因疫苗

基因免疫是九十年代初发展起来的新兴免疫学技术，它是将编码目的抗原的基因以重组表达载体的形式经各种基因转移途径转入机体细胞，借用容量主细胞表达加工合成抗原分子，以MHC～I或（和）MHC～II类分子抗原处理和输送途径将抗原信息递呈给T细胞和B细胞。全过程模拟了病毒自然感染提呈过程，既产生了体液免疫，又启动了细胞免疫，使得免疫效果极大的改善。因此，基因疫苗也被誉为第三次疫苗革命，它将成为我们今后预防疾病的重要武器。基因免疫的优点是毋庸置疑的，其化学结构是比蛋白质稳定得多的DNA，便于保存和运输，很适合做疫苗…     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

<正>猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Diseases,PCVD)或称猪圆环病毒相关性疾病(PCVAD)是主要由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的免疫抑制性疾病,临床表现为仔猪先天性震颤(CT)、断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道病综合征(PRDC)、母猪繁殖障碍(RF)等[1]。猪圆环病毒2型(PCV-2)主要在机体的单核细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞中生长和复制。引起这类抗原递呈细胞的抗原递呈能力下降,导致机体的免疫机能受到抑制。使得畜体免疫功能受到损害,造成其他细菌或者病毒的并发和继发感染[2]。最近几年我国养猪业面     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响

采用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染后不同时相猪肺泡巨噬细胞（PAM）中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DR、Ii链和SLA-DM分子及共刺激分子CD40、CD80、CD86的mRNA转录动态进行了定量检测。结果表明,PRRSV感染后PAM的SLA-DR mRNA转录水平在3、7和14 d下调,低于对照组;感染后3 d,Ii链、SLA-DM和CD40的mRNA转录水平极显著下调（P〈0.01）;CD80和CD86mRNA转录水平也在感染后3 d明显下调（P〈0.05）。用流式细胞术检测PAM表面的SLA-DR抗原的结果表明,在感染后3 d短暂上升,7 d之后一直低于对照组。由此说明,PRRSV感染早期对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能产生显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降,进而影响机体的体液免疫应答。     

干酪乳杆菌的免疫及其作为载体的应用研究进展

干酪乳杆菌是公认的保健类肠道益生菌,能在肠道内长期存在并诱发机体的先天性和特异性免疫应答。它作为一种新型疫苗的抗原递呈载体与传统的载体相比,可以诱导产生更强烈的肠道黏膜免疫应答。论文综述了干酪乳杆菌作为抗原递呈载体的国内外最新研究进展,阐述其作为抗原递呈载体的应用价值,为相关研究提供借鉴。     

A型流感病毒核衣壳蛋白研究进展

A型流感病毒核衣壳蛋白参与病毒生活周期的多个阶段,影响病毒的转录、复制、装配及转运功能。另外,核衣壳蛋白是细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别的主要抗原,CTL通过识别MHC类分子递呈的核衣壳蛋白抗原肽而清除感染的流感病毒。与核衣壳蛋白有关的CTL免疫逃避的研究证实了CTL反应对于控制病毒感染的重要性。由于核衣壳蛋白诱导产生的细胞免疫反应能针对同型不同亚型的流感病毒株产生交叉反应,将核衣壳蛋白作为疫苗成分有可能提供更加广泛、有效的保护作用。因此,对流感病毒核衣壳蛋白的深入研究,将有利于理解流感的发病机理,并为设计有效的流感疫苗奠定理论基础。