应用随机PCR技术检测未知病毒基因序列的研究进展

随机引物PCR技术(random amplified polymorphic DNA,RAPD;arbitrarily primed PCR,AP-PCR)是由Welsh、Williams于1990 年几乎同时建立起来的一项DNA多态检测技术 .该技术以 PCR 为基础,利用一系列单一的人工合成的随机寡核苷酸链为引物,对所研究的基因组DNA 进行 PCR扩增.在该技术问世的短短几年内,因其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速等特点而     

RAPD技术及其应用

RAPD即随机扩增多态 DNA(Random Am-plified Polymorphic DNA,RAPD)。 RAPD标记是由美国科学家 Williams和 Welsh等人 (1990 )利用PCR的方法建立起来的。 RAPD技术因其简便快捷、多态检出率高、所需 DNA量少和不需杂交等优点 ,很快受到科学家们的重视 ,并在遗传分析中得到较为广泛应用。1　 RAPD的原理RAPD技术建立在 PCR技术的基础上 ,它利用一系列 (通常数百个 )不同的随机排列碱基序列的寡核苷酸单连 (一般为 10碱基聚合体 )为引物 ,对所研究基因组 DNA进行 PCR扩增。如果引物与模板 DNA某一片段具有互补的核苷酸…     

RAPD技术及其在动物医学中的应用

RAPD技术即随机扩增多态性DNA技术，是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术，其主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段，通过凝胶电泳分析其指纹图谱特征。该技术具有快速灵敏，程序简便等优点，现已经广泛应用于多个领域，此文综述了RAPD技术的原理、优缺点、影响因素及其在动物医学中的应用。     

RAPD技术在动物遗传育种中的应用

随机扩增多态性DNA (randomamplifiedpolymorphic,DNA)是由Williams等 (1990 )提出的一种DNA多态检测技术 ,它以PCR为基础 ,用一系列不同的碱基随机排列的寡聚核苷酸为引物 (通常为 10bp)对所研究的基因组DNA进行单引物扩增。RAPD是分子水平上的一种标记方法 ,具有简单、快速、无须标记探针和杂交实验等优点 ,因而广泛应用于动物基因定位与构建遗传图谱、MAS、预测杂种优势、性别鉴定等研究领域。1　基因定位与遗传图谱的构建家畜中大多数有经济意义的性状都受多基因控制且表型呈现连续分布的数量性状。微效多基因在基因组的分布…     

RAPD技术及其在链球菌分型中的应用

微生物的分型技术包括传统的分型方法和分子生物学分型方法两种。随机扩增多态性DNA（RAPD）是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术，已广泛地应用于微生物基因分型。其主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段，继而通过凝胶电泳分析其指纹图谱特征，揭示不同菌株间的细微差别。这种方法简单、快速，现已在链球菌的分型中得到应用。     

RAPD分子标记及其在我国蚕业研究上的应用

1 RAPD分子标记 1.1RAPD标记随机扩增多态性DNA(Randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)技术由Willams和Welsh等先后于1900提出.该技术主要利用DNA聚合酶链式反应(Polymerase Chain reaction,PCR),以人工随机合成的寡核苷酸单链(为10个核苷酸)为引物,以生物的基因组DNA为模板进行PCR扩增反应,经过琼脂糖凝胶电泳来检测DNA的多态性.     

随机扩增多态性DNA（RAPD）技术及其应用

随机引物扩增多态性DNA（RandomAmplifiedPolymorphticDNA，RAPD）是由Williams等人于1990年发展起来的一种新型分子遗传标记，他首次用7个不同的寡核耷酸引物（十聚体），扩增了人、大豆、谷类、会苔和细菌的DNA，获得了丰富的多态性，证明了RAPD的可行性。作为PCR技术的延伸，RAPD继承了PCR样品用量少、灵敏度高、检测容易等优点，又具有合成一套弓！物，可以用干不同生物基因组分析和可以大大减少多态性分析的预备性工作等特点。因而，尽管RAPD技术诞生的时间很短，但由于其独到的检测DNA多态性的方式以及快速、简便和适…     

随机扩增多态性DNA技术的原理及应用

1985年,美国人Kary Mullis等发明了PCR技术,两年后PCR自动化装置仪器的完成使基进入实际应用的阶段,该装置用于扩增特定的模板DNA,使DNA的量成倍增加,可用于各种用途的DNA分析。1990年,由杜帮公司的Williams等人基于PCR技术之上首次推出了一种简便、灵敏可行的新的遗传标记技术——随机扩增多态性DNA（Random amplified poly-morphic　DNA,RAPD）[1]。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速的特点,且具有可用引物数量大,检测区域几乎覆盖整个基因组,多态信息含量大等,使得该技术已渗透到分子生物学领域基因研究的各个方面。可以预料,该技术的发展会使分子遗传学得到更广泛的应用。     

随机引物PCR及其应用的研究进展

随机引物PCR(Random amplified polymorphic DNA,RAPD)技术是1990年由Williams等〔1〕建立起来的一项DNA多态检测技术,也称作靶序列循环扩增选择法(cyclicamplification and selection of targets,CAST),指数式富集配体系统进化法(systematic evolution of ligands by exponent     

PCR技术在畜禽细菌病诊断中的应用

聚合酶链反应（PCR）又称无细胞克隆技术，是一种根据生物体内DNA复制的某些特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术。近几年来，随着PCR技术的迅速发展及世界各国对畜禽传染病的日益重视，PCR技术在兽医实验室诊断中的应用已屡见不鲜。本文仅概述其在畜禽细菌性疾病诊断和研究中的应用。１沙门氏菌Nguyen根据肠炎沙门氏菌C７具有特异性的序列（２．１kbHingIII片断）设计出１对引物，从２３种沙门氏菌中扩增出２．０kb的产物，其它１９种肠道细菌对照没有扩增产物。李景鹏等根据H１基因序列设计１对引物扩增H１基…     

Use of arbitrarily primed polymerase chain reaction to investigate Mycoplasma bovis outbreaks

Colony lineages from three Mycoplasma bovis outbreaks representing different husbandry conditions in the United States were characterized with arbitrarily primed polymerase chain reaction (AP-PCR). Cases studied included a closed beef herd, a dairy calf ranch, and a feedlot. The DNA was obtained from colony lineages and used for AP-PCR with primers REP1R-I and REP2-I. Case A and C lineages were uniform by AP-PCR analysis. Lineages from case B showed heterogeneity with AP-PCR. Outbreaks A and C were therefore both infected by one source, while the ranch (case B) was infected by multiple calf shipments. The AP-PCR typing method provides genotypic epidemiological information to successfully characterize M. bovis from sequential sampling of outbreaks and different husbandry conditions.     

预防兽医学分子生物学技术发展概况

概括介绍了分子生物学理论、技术的发展，重点从病原学、免疫学和疫病预防与控制学三方面阐述了分子生物学在预防兽医学中的应用、发展及其贡献。同时，阐明了预防兽医学对分子生物学的贡献和促进作用。     

分子生物学技术在反刍动物营养中的应用

本文对利用分子生物学技术改造或生产动物性营养物质；在分子水平上研究营养与基因表达、调控的关系，以从根本上阐明营养对机体的作用机制；利用基因工程技术开发饲料资源等三个方面进行了综述。最后探讨了分子生物学在动物营养中的存在问题及应用前景。     

分子标记技术在植物育种中的应用

随着植物分子生物学的迅猛发展 ,诞生了许多直接操作DNA的新技术 ,分子标记便是其中之一。这种技术不仅能在分子水平上直接测定出遗传物质DNA的变异性 ,而且还能将正确的育种策略付诸实践加速育种进程。本文概要介绍这种技术的特点以及在植物育种中的应用     

反向遗传学技术及其在口蹄疫病毒研究中的应用

反向遗传操作技术(reverse genetics,RG)是一种新兴的分子生物学技术,该技术可以在DNA水平上对病毒基因组进行各种修饰或改造,然后通过拯救病毒的表型变化来判断这些基因操作的效果,从而可以对病毒基因组表达调控机制、病毒致病的分子机理等进行研究。作者就口蹄疫病毒反向遗传研究的意义、方法及应用等方面进行了综述。     

牛结核病诊断方法研究进展

牛结核病是一种严重的人畜共患病,给奶牛业造成了巨大的损失,还与人们的生命安全息息相关。结核病的早期诊断仍然是控制疫情的重要因素。近年来随着分子生物学和免疫技术的快速发展,在改善原有诊断技术的基础上也引入了多种新的结核病诊断技术。新型培养技术缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间;分子生物技术的应用(比如PCR)使得快速诊断成为可能;血清学方法的改善以及噬菌体测定、γ-干扰素试验等新技术的引入给临床诊断带来了新的希望。本文就结核病的诊断技术进行综述。     

口蹄疫检测技术的研究进展与应用

从生物学试验、血清学诊断技术和分子生物学检测技术等方面概述了目前口蹄疫检测技术的研究进展及其应用。其中生物学试验包括动物试验和细胞培养;血清学诊断技术包括补体结合试验、中和试验、凝集试验、酶联免疫吸附试验和免疫胶体金快速检测技术等;分子生物学检测技术包括反转录聚合酶链式反应、核酸探针、核酸序列分析和等电聚焦等。     

猪繁殖与呼吸综合征实验室诊断技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是一种能引起母猪繁殖障碍、新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病。其确诊依赖于实验室方法,本文就其检测技术,如病毒分离、血清抗体检测、免疫胶体金技术、分子生物学技术的研究进展作一综述。     

PCR-SSCP技术在动物育种中的研究进展

PCR—SSCP技术是新近发展起来的一种分子生物学分析方法，由于其广泛和潜在的应用价值，已被广泛应用于医学和其他生命科学的研究中。本文介绍了PCR—SSCP技术的发展、特点及其在动物遗传育种研究中的应用和发展前景。     

弓形虫病免疫学诊断方法研究进展

弓形虫病是一种分布广泛、危害严重的人兽共患病,不但在公共卫生上有很重要的意义,而且对畜牧业也造成巨大经济损失.为了寻找敏感、特异、快速的弓形虫病诊断方法,国内外学者在弓形虫病诊断方面进行了大量研究.目前,弓形虫病调查、诊断的方法有病原学方法、免疫学方法、分子生物学方法,但免疫学方法仍是进行弓形虫感染调查、弓形虫病诊断的常用方法.检测抗弓形虫抗体或循环抗原的免疫学诊断方法主要有染色试验(DT)、凝集试验(AT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫胶体金技术等.文章就该病的免疫学诊断方法的研究进展加以概述.