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恩诺沙星完全抗原的制备及免疫抗体的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
恩诺沙星(ENR)是动物专用的氟喹诺酮(FQs)类药物,主要用于治疗畜禽细菌性疾病和支原体感染。ENR进入畜禽机体后,在动物体内消除缓慢,半衰期长。自20世纪80年代以来,越来越多的试验结果证实动物或人类对FQs类药物可产生耐药性。我国对ENR的残留限量做了规定,要求动物肌肉中的残留量不得超过100ng/kg。因此,通过有效的技术手段对动物组织中的药物残留量进行检测是非常必要的。对ENR建立免疫学检测方法已有报道,但关于不同条件下合成完全抗原及其对抗体影响的报道很少。试验采用不同方法和条件耦联半抗原并对抗体进行筛选,进而对后续单抗的制备和检测方法的建立提供最佳条件。 相似文献
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In order to gain polyclonal antibody against α-casein, the commercial α-casein were linked with carrier protein BSA and OVA, respectively, as immunogen (α-casein-BSA) and coating antigen (α-casein-OVA). The reaction products were identified by nondenaturing PAGE and SDS-PAGE. New Zealand White rabbits were immunized with the immunogen (α-casein- BSA) to produce polyclonal antibody. The results showed that the titer of the antibody was 1∶256000 and had high cross reactivity with κ-casein. It could be used to detect the total amount of α-casein and κ-casein in milk. 相似文献
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为了进一步研究DJ-1蛋白在J亚群禽白血病病毒感染中的生物学作用,本研究从DF-1细胞的cDNA中扩增DJ-1基因编码区,并克隆入pET-32a载体进行原核表达。结果表明:表达的重组蛋白以可溶性形式存在,最佳表达条件为IPTG终浓度为0.4mmol/L,37℃诱导3h;ELISA和Western结果证明融合蛋白免疫BALB/c小鼠后获得的多抗血清具有良好的特异性和反应性。本试验中鸡源DJ-1蛋白及小鼠多抗血清的获得,为后期DJ-1蛋白功能性研究提供了实验材料。 相似文献
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本试验采用兔病毒性出血症灭活疫苗、兔病毒性出血症灭活疫苗和兔病毒性出血症病毒强毒两种不同的免疫程序来免疫家兔.采用血凝及血凝抑制试验检测血清的抗体效价。结果表明:经3次免疫后,疫苗免疫程序组免疫家兔的抗血清平均效价为9log2,未免疫家兔的抗体平均效价为2log2。 相似文献
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氯霉素全抗原合成及多克隆抗体的制备 总被引:4,自引:0,他引:4
用重氮化方法将氯霉素与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原和包被抗原,用ELISA方法进行鉴定。将偶联抗原用弗氏佐剂乳化后免疫德国大白兔。制备多克隆抗体,并用硫酸铵沉淀法初步纯化。用亲和层析法进一步纯化。用所得抗体建立竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)用于氯霉素检测,最低检查限为0.3ng/mL。 相似文献
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氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 总被引:9,自引:0,他引:9
将氯霉素以重氮化方法使之分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、人血清白蛋白(HSA)载体蛋白连接.三种偶联物选择其中两个分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验,结果产生了特异性抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与氯霉素反应明显,与其他类似物交叉反应不明显。 相似文献
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三聚氰胺抗原合成及其多克隆抗体的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
以2-氯-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪为原料,强碱条件下与3-巯基丙酸反应,制备三聚氰胺半抗原并经质谱和红外鉴定;应用碳二亚胺法将半抗原与BSA和OVA偶联制备三聚氰胺免疫原和包被原,完全抗原经紫外扫描鉴定偶联成功,偶联比分别为16:1和10:1,通过免疫新西兰大白兔成功制备三聚氰胺多克隆抗体,抗体效价可达1:128000以上。本研究为三聚氰胺人工抗原的制备提供了有效途径,为三聚氰胺免疫检测方法的研发奠定了基础。 相似文献
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Using spectinomycin (SPE), carboxyl methyl hydroxylamine hydrochloride (CMO), glycol diglycidyl ether (EDE), bovine serum albumin (BSA) and ovalbumin (OVA) as the main stuff, four artificial-immunogens had been obtained by the N-hydroxysuccinimide-activated ester method and the EDE double functional group method. Ten female rabbits were immunized with this two artificial-immunogens. Animal immune test demonstrated that there were antibodies against SPE in rabbits sera. The polyclonal antibody was measured with indirect ELISA test. The titer was 1∶160000 and the IC50 was 0.484 ng/mL. This study laid the basis for further research on the immune test kit for the SPE remnant. 相似文献
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为研制犬腺病毒相关制品的检验用阳性血清,以健康易感山羊为免疫靶动物,深入优化免疫原和免疫程序,无菌采血后分离血清,并分装冻干。通过常规检验方法进行纯净性检测、特异性检测、抗体效价测定和中和指数测定,并将其应用于代表性的含犬腺病毒组分的活疫苗制品的外源病毒检验和鉴别检验等。结果显示,该批血清的纯净性检验和特异性满足要求,中和抗体效价为1∶9364,中和指数10~(6.0)。结果表明,该血清对犬腺病毒具有良好的中和作用,能够应用于犬腺病毒相关制品的外源病毒检验和特异性检验等,是兽用生物制品国家标准物质的重要候选标准品。 相似文献
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磺胺甲噁唑抗原合成及其抗体的制备 总被引:1,自引:2,他引:1
采用重氮化法将磺胺甲噁唑(SMZ)与人血清白蛋白偶联形成免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体。通过紫外扫描和高效液相色谱分析偶联物,免疫抗原的偶联率为19∶1,改良辛酸-饱和硫酸铵纯化抗体,多克隆抗体效价达1∶105,间接酶联免疫吸附试验建立的SMZ检测的线性范围在0.1ng/mL~10μg/mL之间,50%抑制率检测限为22.53ng/mL,抗体与磺胺甲噁唑交叉反应率为100%,与其他7种磺胺药交叉反应率很低。表明制备的磺胺甲噁唑多克隆抗体具有很高的特异性,可用于SMZ在动物性产品中残留的检测。 相似文献
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本研究以氯羟吡啶原药为基础,合成了带羧基的氯羟吡啶衍生物,经质谱鉴定结构正确,并用活性酯法和氯甲酸异丁酯法合成抗原,紫外测定偶联比率和最终抗原蛋白浓度,免疫制备抗血清并测定血清特异性和灵敏度,为建立氯羟吡啶酶联免疫法(ELISA)奠定坚实基础。 相似文献