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鸡传染性支气管炎病毒Real-time PCR方法的建立及其对感染鸡体内病毒的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究针对传染性支气管炎病毒(IBV)tl/CH/LDT3/03毒株的N基因(GenBank登录号为AY702975)设计并合成了一对引物,构建重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IBV核酸的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法可检测到初始模板中6.45×10copies/μL的病毒核酸。与常规PCR相比,敏感性高100倍。该检测方法特异性强,与其它禽源病毒如新城疫病毒(NDV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、禽流感病毒(AIV)、马立克氏病毒(MDV)均不发生交叉反应;重复性试验的变异系数小于2.6%。结果表明,本试验建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于传染性支气管炎的临床诊断。同时应用本方法对人工感染IBV的SPF鸡的主要脏器盲肠扁桃体、肾脏、肺和气管进行了病毒RNA定量检测,结果表明,肾脏的病毒含量最高,盲肠扁桃体中病毒持续的时间最长,从而揭示了IBV在SPF鸡体内复制的动态变化,证实了感染鸡的临床表现与病毒滴度的时间相关性。 相似文献
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检测猪肉中病毒的样品处理方法初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
进行了从猪肉样品中回收一种模拟病毒的抽提和浓集方法研究。将20g经实验性污染有脊髓灰质炎病毒1型弱毒的样品悬浮于100ml pH8.8甘氨酸-NaOH缓冲液中,置冰浴中均质。均质液中的固体猪肉成分先经聚阳离子污物凝结剂Cat-Floc凝聚成团,再以离心法和过滤法去除。每份样品抽提液均经脱水(HE)、超滤(UF)和聚合物两相分离(PTPS)三种方法之一浓缩,用HeLa细胞单层以空斑试验法作病毒的定量测定。实验表明:样品抽提方法切实可行;用HE法、UF法和PTPS法浓集,猪肉样品中病毒的平均回收率分别为53.0、68.0和65.1%;未作病毒污染的猪肉制备的样品浓集液中无空斑形成单位检出。认为本研究建立的抽提和浓集方法能用于检测猪肉中病毒的样品处理。 相似文献
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新城疫病毒毒力检测方法研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
新城疫是目前危害养禽业最严重的疾病之一,新城疫病毒毒力的鉴定对于疫情判断和控制具有重要意义,在禽产品进出口检疫中也有一定的应用价值。本文从经典法、单克隆抗体技术、分子生物学技术几大检测法对新城疫病毒强弱毒株毒力检测的研究进展作一综述。 相似文献
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《中国兽医学报》2019,(1):183-187
细小病毒(parvovirus)属细小病毒科(parvoviridae)、细小病毒亚科(parvovirinae)、细小病毒属(protoparvovirus),是单链线状DNA病毒,病毒颗粒无囊膜。细小病毒自然感染宿主范围广,包括脊椎动物、无脊椎动物及人类。由细小病毒引起的细小病毒病正在全球范围内流行并严重威胁着人与动物的健康。现阶段实验室应用广泛的细小病毒分子生物学检测方法主要包括:实时荧光定量PCR检测、核酸探针检测、环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)、DNA芯片技术等方法。本综述分别对不同细小病毒的分子生物学检测方法的研究进展进行阐述。 相似文献
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狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus,RV)引起的一种人兽共患传染病,一旦发病,病死率几乎为100%,严重威胁着人类的健康。文章综述了狂犬病病毒的生物学特征及抗原和抗体检测方法,为临床控制此病建立合理有效的检测方法提供参考。 相似文献
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