不同基因型番茄高效组培再生体系的建立

以‘特大瑞光’、‘菜都982F1’和‘菜都六号’3种番茄为试材,用番茄的下胚轴、子叶、真叶为外植体,研究了不同基因型、不同外植体材料和不同激素浓度对番茄再生体系的影响,以期筛选出适宜不同基因型番茄离体培养的最佳培养条件.结果表明:3个番茄品种均在MS+2.0 mg/L BA+0.30 mg/L NAA培养基中的愈伤组织诱导率最高.‘特大瑞光’诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L BA+0.10 mg/L NAA;“菜都982F1”诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L BA+0.05 mg/L NAA;“菜都六号”,诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+3.0 mg/LBA+0.05 mg/L NAA.3个不同番茄品种在MS+0.05 mg/L NAA培养基中均获得了最佳的生根效果.     

番茄植株再生体系的建立

选用杂交番茄早丰(07-13)为材料,以下胚轴、子叶作为外植体,根据控制单一变量与多重比较的原则,设计添加不同种类和不同浓度的植物生长物质的培养基配方,建立了一套简便有效地番茄再生体系。结果表明:愈伤组织的诱导及增殖,以配方MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA0.3 mg/L为佳;诱导不定芽的分化,以培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L为佳;生根培养基以MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L为佳,生根率高且根粗壮。     

番茄活体再生中反式玉米素含量的变化

以番茄活体植株为试材,采用高效液相色谱(HPLC)法研究了番茄活体再生中反式玉米素含量的变化。结果表明:在愈伤组织的形成过程中,反式玉米素逐渐增加,并且在愈伤组织最发达时达到峰值。随着愈伤组织分化,其含量略有降低。此变化规律与番茄离体再生中外源反式玉米素使用浓度由高到低的变化规律基本吻合。活体再生中,用细胞分裂素合成抑制剂洛伐他丁处理伤口不影响再生进程。     

提高农杆菌介导番茄遗传转化效率的研究

利用农杆菌介导法对番茄进行遗传转化,比较了不同的农杆菌种类、农杆菌侵染时间、外植体种类及番茄品种对农杆菌侵染效率的影响.转化后得到的再生植株,利用PCR、Southern杂交检测GUS基因是否整和进入基因组.结果表明:农杆菌介导法成功介导了GUS基因导入番茄.农杆菌EHA105侵染番茄的效率明显高于LBA4404,侵染时间3 min较好.子叶外植体的转化明显优于下胚轴,黄色串珠樱桃番茄的遗传转化效率高于中蔬5号;优化的转化条件可以使番茄获得较高的遗传转化效率.     

番茄“嘉宝”子叶再生体系的建立

以番茄品种‘嘉宝’为试材,研究了20%次氯酸钠和0.1%升汞处理不同时间对番茄种子表面消毒和萌发的影响,同时研究不同的激素组合对再生芽形成和生根的影响。结果表明:用20%次氯酸钠对番茄种子进行消毒15 min,可获得较多的无菌苗;IAA浓度为0.2 mg/L和6-BA浓度为2 mg/L组合时,外植体再生芽频率较高为86.3%,促进不定芽生根最佳激素浓度为MS培养基中添加IAA 0.2 mg/L;再生苗移栽到灭菌处理后土壤中成活率较高,可达90%。     

番茄“白果强丰”子叶再生体系的建立

以番茄品种白果强丰为试材,研究20%次氯酸钠和0.1%升汞处理不同时间对番茄种子表面消毒和萌发的影响及不同激素组合对该品种再生芽形成和幼苗生根的影响。结果表明:用20%次氯酸钠对番茄种子进行消毒20 min,可获得较多的无菌苗,同时发现,IAA浓度为0.2 mg/L和6-BA浓度为2 mg/L组合时,外植体再生芽频率较高为87.2.2%,促进不定芽生根最佳激素浓度为MS培养基中添加0.5 mg/L IAA。再生苗移栽到灭菌处理后土壤中成活率较高,可达88%。     

加工番茄新番72号再生体系的建立

为建立一套优化的组织培养和遗传转化再生体系,以加工番茄新品种新番72号为试材,分别选取4～8 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同苗龄、外植体、激素浓度配比对番茄愈伤组织诱导、不定芽分化的影响,以建立番茄再生体系,为下一步基于CRISPR-Cas9定点突变改良新疆加工番茄耐贮性奠定基础.结果表明,新番72号加...     

紫罗兰再生体系的建立

本研究以紫罗兰(Matthiola incana R.Br)无菌苗的叶片、茎段为外植体,通过组织培养的方法诱导愈伤组织,并进一步诱导分化出芽及再生植株.结果表明,建立紫罗兰再生体系的最佳外植体为生长8～10d的无菌幼苗的子叶;愈伤组织诱导最佳培养基为MS 6-BA(0.5mg/L) NAA(0.5 mg/L)培养基;最佳分化培养基为MS 6-BA(2.0mg/L) NAA(0.1 mg/L)培养基;最佳生根培养基为1/2MS NAA(0.5 mg/L) C(0.05mg/L).     

辣椒子叶离体培养和植株再生体系的建立

选用辣椒４个栽培品种和２个杂交亲本的子叶进行诱导不定芽分化、生长及生根成苗试验,从中筛选出３个较好的激素配方,建立了辣椒栽培品种的高效快速离体植株再生体系。外植体分化频率可达１００％,每外植体平均分化不定芽数１０．９个,出苗８￣１０株。发现添加氨基酸混合物（ＬＹ）对不定芽的诱导分化及生长有较强的促进作用。从子叶外植体培养起至再生苗出瓶需５０￣５５ｄ,最快的１批仅４４ｄ。     

不同番茄品种再生体系的比较

以"大红番茄"、"红牛奶番茄""粉冠888"3种番茄为试材,选取7 d苗龄无菌苗的子叶和胚轴为外植体,对外植体基因型、分化培养基及生根培养基进行筛选,建立番茄再生体系,以期为进一步进行人参大片段DNA转化番茄的研究奠定基础。结果表明:"粉冠888"可为遗传转化提供大量稳定的外植体来源,适宜的分化培养基为MS+6-BA 1.0~2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L,生根培养基为MS+IAA 0.5 mg/L。     

‘雪青’梨叶片高频再生体系的建立

 以‘雪青’梨叶片为外植体, MS为基本培养基, 培养温度(25 ±1) ℃, 光照强度2 000 lx,14 h /d, 继代周期30 d。在MS + 2,4-D 2 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1}培养基中, 外植体脱分化率达100% ,愈伤组织增殖倍数达12.05; 在MS + 6-BA 5 mg·L ^{- 1} + IAA 0.1 mg·L ^{- 1}中, 不定梢诱导率达100% , 在MS+ 6-BA 2 mg·L ^{- 1} + IAA 0.1 mg·L ^{- 1} +CH 100 mg·L ^{- 1}中, 1～6代不定梢平均繁殖系数达7; 在1 /2MS +IBA 2 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +AC 500 mg·L ^{- 1}中, 不定梢生根率达67.50%; 68株试管苗移栽到珍珠岩营养钵中, 30 d成活46株, 成活率为67.65 %。     

番茄06P28子叶受体系统建立的研究

以番茄06P28为试材,对其子叶分化培养基及该材料对潮霉素和羧苄青霉素的天然耐性进行了研究.结果表明:适宜的分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 0.2 mg/L,潮霉素的筛选浓度和羧苄青霉素的抑菌浓度分别以10mg/L、35mg/L为宜.     

番茄真叶愈伤组织诱导及植株再生研究

对番茄外植体诱导愈伤组织、愈伤组织分化和根的诱导条件进行研究.结果表明:适合外植体形成愈伤组织的培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适合愈伤分化的培养基为MS+BA 3.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L;适合生根的培养基为1/2MS+IAA 0.1 mg/L.     

异戊烯基转移酶基因导入番茄及转基因植株再生

通过根癌农杆菌（Ａgrobacteriens）介导,利用特异启动子Ｐsag12与异戊烯基转移酶（Ｉsopenyl transferase,ipt）基因构建的嵌合基因Ｐsag12－ipt对５个番茄品种进行遗传转化,结果共获得来自３１个不同外植体的４４株转化再生植株。感染子叶的分化再生及转化植株田间生长正常。对其中部分转化再生植株进行ＰＣＲ检测证明为转基因植株,并且在田间表现出生长旺盛及抗叶片衰老的特性。     

红心柚外植体无菌系建立的初步研究

对柚成年态茎段的消毒方法和离体培养进行了研究,结果表明:70%乙醇浸泡30 s,0.1%HgC l2消毒20 m in,2 d后再消毒1次,灭菌效果最好,获得了85.6%的成活率;柚茎段离体培养最佳培养基配方为MT BA 2.0 mg.L-1 GA30.5 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1 葡萄糖30 g.L-1,腋芽平均萌发率为92.4%。     

蕨菜愈伤组织高效再生体系的建立

 报告了蕨菜不同外植体在含有不同激素的培养基上诱导、分化及生根情况，建立起高效再生体系。诱导愈伤组织的最适培养基为1/2 MS+BA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+NH₄H₂PO₄ 200 mg/L; 诱导愈伤组织芽分化的最适培养基为1/2 MS，芽分化率为100％; 不定苗在1/2 MS+IAA 0.2 mg/L 培养基上生根率为100％，同时可以形成健壮根茎；具有根茎的试管苗移栽成活率达94％。     

超敏反应辅助蛋白基因(hrap) 转化番茄的研究

 将可以诱发植物对病原菌抗性的甜椒hrap基因置于35S启动子的驱动下, 经农杆菌介导引入番茄。再生植株经过含卡那霉素的培养基的选择, 后经PCR 检测和Southern杂交鉴定含有目标基因。Northern杂交检测其表达后, 初步的抗菌检验显示其提高了对青枯病原菌的抵抗力。     

卡麦若莎草莓离体再生体系的研究

卡麦若(Camarosa)为草莓新品种,果大,抗痛性强,在我国广泛种植.试验对卡麦若莎(Camarosa)进行组织培养,选择最佳外植体,最佳消毒时间,最佳诱导培养基,最佳分化培养基与生根培养.结果表明:最佳外植体是叶片,0.1%升汞对外植体消毒2 min时效果最好;诱导愈伤的最佳培养基为:MS 1.5 mg·L-16-BA 0.1 mg·L-1NAA;最佳分化培养基:MS 2.0mg·L-16-BA 0.2 mg·L-1NAA;最佳生根培养基:1/2MS 0.25 mg·L-16-BA,此品种容易形成高效再生体系.