马铃薯延薯4号再生体系建立

为了建立马铃薯高效、稳定离体再生体系,以延薯4号无菌试管苗茎段为材料,通过对茎段再生体系的筛选,优化了培养基内最佳激素配比浓度。结果表明:马铃薯延薯4号无菌试管苗茎段诱导愈伤组织最适培养基为:MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA1.0 mg·L~(-1)。茎段丛生芽分化的最适培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.20mg·L~(-1)+G A_31.0mg·L~(-1)。     

小果型西瓜快速繁殖技术研究

为建立小果型西瓜组织培养快速繁殖方法,对小果型西瓜重要种质材料的保存扩繁提供技术支持。以小果型西瓜为材料、MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选小果型西瓜快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果表明:子叶苗茎尖丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)效果较好,试管苗继代增殖最适培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+IBA 0.3mg·L~(-1)。     

马铃薯茎尖脱毒及病毒鉴定技术研究

为探讨利用马铃薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法,本实验以马铃薯茎尖分生组织为培养对象,通过外源激素分化愈伤组织形成组培苗,并用分子生物学的手段对病毒进行鉴定。实验中将本地小黄皮马铃薯品种的芽通过显微镜切下0.2～0.3 mm的茎尖,在基本培养基(MS)+0.5 mg·L^-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1或0.5 mg·L^-1萘乙酸(NAA)培养基中进行试管苗分化培养,当分化出的试管苗培养到苗长5～10 cm时,转接到MA+6-BA 0.15 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1培养基中进行壮苗培养,然后采用qRT-PCR的方法对小黄皮马铃薯试管苗进行病毒检测,实验表明,在试管苗中未检测出马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)、马铃薯H病毒(potato virus H,PVH)和马铃薯M病毒(potato virus M,PVM)等,大田种植的脱毒试管苗形成试管薯后,其产量和品质明显优于对照组。该研究为马铃薯...     

马铃薯新品种‘吉薯1号’茎尖脱毒及组培快繁研究

马铃薯茎尖脱毒技术是克服病毒侵害及解决马铃薯退化最为有效的途径。为保持马铃薯新品种‘吉薯1号’的品质,本研究以马铃薯新品种吉薯1号茎尖为外植体,对其脱毒方式和组织快繁培养基组分进行了优化。确定了以0.1%升汞8 min+75%酒精30 s对马铃薯茎尖脱毒后,用MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+GA_30.2 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)培养基进行茎尖分化培养,再经MS+PIX 1.0 mg·L~(-1)培养基继代,可满足工厂化育苗需要。     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

外源激素对紫马铃薯试管苗快繁的影响

[目的]为研究不同外源激素及其配比对紫马铃薯试管苗生长的影响。[方法]以紫马铃薯的无菌试管苗为试验材料,在添加不同浓度的生长素(IBA、NAA、2,4-D)和细胞分裂素(TDZ、6-BA、ZT)的MS培养基上培养,观察并分析各项生长指标。[结果]IBA、NAA两种生长素对根系生长的影响较大,IBA 1.0mg·L~(-1)时有利于紫马铃薯试管苗根的生长,对根系作用效果明显,NAA浓度在0.5mg·L~(-1)以上时不利于根系生长;2,4-D 0.5~2.0mg·L~(-1)时试管苗株高增加、茎纤细、根系极不发达,产生乳白色、块状愈伤组织。0.5mg·L~(-1)的TDZ或ZT可促进不定芽产生,利于芽增殖;单独使用6-BA时,无不定芽产生,也不利于试管苗生长。[结论]紫马铃薯试管苗生长的最适培养基成分:MS+IBA 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)、MS+NAA 0.5mg·L~(-1)+6-BA 0.2~0.5mg·L~(-1)。     

铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖

以铁皮石斛抗寒品种茎段为外植体,运用组织培养技术建立铁皮石斛无性快繁体系,筛选出铁皮石斛快繁的最佳培养基。结果显示,以铁皮石斛茎段为外植体诱导原球茎,最佳诱导培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1),诱导率为66.67%。原球茎最佳分化培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),苗整齐健壮,叶片大而浓绿。试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),生根率为100%。驯化移栽基质为碎砖瓦15%+松树皮50%+刨花25%+羊屎10%。     

霍山石斛离体培养条件优化

为建立更适宜的霍山石斛离体培养体系,选取霍山石斛原球茎和试管苗作为材料,比较不同植物生长调节剂对原球茎增殖的影响以及不同基本培养基、马铃薯粉、活性炭、IBA等因素对试管苗壮苗生根情况的影响。结果显示,6-BA是霍山石斛原球茎增殖的主要影响因素,在1/2MS+0.2mg·L~(-1) 2,4-D+0.2mg·L~(-1)6-BA+0.4mg·L~(-1) KT的培养基中原球茎增殖系数最高;活性炭是影响霍山石斛试管苗壮苗生根的主要因素,在1/2MS+1.25g·L~(-1)马铃薯粉+0.5g·L~(-1)活性炭+0.4mg·L~(-1) IBA的培养基中试管苗壮苗生根效果最好。     

啤酒花(Humulus lupulus)茎尖培养快速繁殖的研究

对啤酒花茎尖培养生比分化培养条件、生根方法及试管苗移栽作了研究。表明茎尖作外植体材料时,适合于生长和分化的培养基组合为 MS+BA10~(-5)mol·L~(-1)+2,4-D~(-6)mol·L~(-1)+GA_310~(-6)mol·L~(-1)+ 葡萄糖30 g·L~(-1)+琼脂0.94%,P~H5.1。培养周期为3周。增殖系数5～7,分化株率95%,平均嫩茎高度1.7cm。适于生根的培养基组合为 KM+BA10~(-7)mol·L~(-1)+IBA10~(-8)mol·L~(-1)+葡萄糖20～30g·L~(-1)+琼脂0.85%,GA_310~(-6)mol·L~(-1)或不加,pH5.4。生根培养时用 IBA10~(-3) mol·L~(-1)预处理小插条基部对生根有促进作用。小插条用 IBA(10~(-4)～10~(-5)mol·L~(-1))速沾5s,能在试管外扦插生根,生根株率为68%,生根苗能顺利成活和生长。     

绿色草莓再生体系的建立

建立高效、稳定的绿色草莓再生体系是构建其遗传转化体系的基础。本研究以绿色草莓匍匐茎茎尖为外植体,置于不同培养基中进行初代培养获得试管苗。在含有不同配比植物生长调节剂的培养基中对叶龄为30 d的试管苗叶盘进行脱分化处理。以叶盘诱导产生的愈伤组织为试验材料,探究不同植物生长调节剂对愈伤组织产生不定芽的影响。结果表明,最适用于绿色草莓初代培养的培养基是MS+0.2 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L赤霉素(GA₃),在此培养基中绿色草莓离体茎尖成活率最高,生长状况最好;诱导叶盘脱分化、愈伤组织再分化和诱导不定芽生根的适宜培养基分别是MS+1.5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+2.0 mg/L噻苯隆(TDZ)、1/2 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA)和1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L吲哚乙酸(IAA),其出愈率、再分化率和生根率分别为100%、91.0%、100%。本研究建立了以绿色草莓匍匐茎茎尖为试验材料获得试管苗的组织快繁体系和以叶盘为外植体经脱分化、愈伤组织再分化2个阶段...     

马铃薯茎尖组织培养技术研究

[目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1．0到1．5min长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA3、KT与6-BA和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。[结果]低浓度的GA3可促进愈伤组织的形成,过高的GA3浓度会抑制愈伤组织的形成;KT比6BA具有更好的诱导效果;在MS＋GA30．1mg/L＋NAA0．1mg／L＋BBA0．5mg／L培养基中激素配比的诱导效果较好。[结论]MS＋0．5mg／LKT＋0．2mg／LGA3＋0．1mg／LNAA是最为适宜的茎尖组织培养基。在28℃、每天光照16h、光照强度〉2000lx的培养条件下,经7d左右即可得到形态良好愈伤组织,经15d左右即可得到分化良好的试管植株。     

葡萄未成熟胚诱导体细胞胚发生和植株再生与遗传鉴定

以二倍体和四倍体葡萄杂交获得的未成熟合子胚为材料,诱导体细胞胚发生。采用的初生胚诱导培养基(SE培养基)为:NN69+1.80 mg.L-1NAA+0.4 mg.L-1水解酪蛋白+2 g.L-1活性炭+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂;次生胚诱导培养基分别为:3/4MS+0.35 mg.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(扩繁培养基)和MS+1.5 g.L-16-BA+0.2 g.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(胚状体萌发培养基)。结果表明:初生胚诱导率为11.11%和16.67%,体细胞胚在扩繁培养基上再生植株。利用流式细胞仪和SSR标记检测源自同一未成熟合子胚(胚珠)的不同株系的遗传稳定性,结果显示,所测植株均为三倍体,且都来自杂交所得的未成熟合子胚。本研究所建立的体细胞胚诱导方法及遗传稳定性检测技术,能够为植物材料保存、扩繁,转基因应用和研究植物发育及极性建成等提供途径。     

文心兰杂种胚培养研究

以文心兰‘红狐狸’与‘百万金币’杂种胚为外植体,采用种胚→原球茎→完整植株→移栽的途径,探讨植物生长调节剂、有机添加物等因素对文心兰杂种胚萌发、原球茎分化、生根等各阶段的影响,建立文心兰杂种胚离体培养及植株再生技术。结果表明,适宜萌发的培养基为花宝+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CM 150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),培养90~100d后相对萌发率为155.6%,原球茎基本不增殖,利于叶的分化;适宜分化的培养基为花宝+6-BA 0.1mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1),分化率显著最高,为87.8%,添加马铃薯泥能显著提高分化率,促进芽苗的粗壮;将分化的芽苗在花宝+NAA 0.2mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.5g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1)培养基上培养40d后生根率为100%,且根系发达,植株健壮;生根苗炼苗后以水苔作为基质,移栽成活率达91.7%。     

马铃薯茎尖玻璃化法超低温保存技术研究

为构建马铃薯茎尖玻璃化法超低温保存体系,以6个马铃薯品种为试验材料,研究了预培养时间、茎尖大小、玻璃化液、玻璃化液处理时间及恢复培养基对马铃薯存活率和再生率的影响。结果表明:茎尖大小为1mm左右时,预培养24h后,于PVS2玻璃化液中浸泡30 min,而后转入MS+0.5 mg·L-1 Zeatin+0.10mg·L-1 NAA+1.0mg·L-1 GA3培养基中培养,其成活率和再生率最高。     

尤溪金柑离体再生体系优化及试管苗保存

以尤溪金柑试管苗为材料,采用双因素试验设计,筛选出适合尤溪金柑试管苗增殖和生根的培养基;采用L3（3^4）正交表设计,研究each、甘露醇和多效唑对尤溪金柑试管苗保存的影响．结果表明：芽增殖的最优培养基为：MS＋1．2mg·L-1 6-BA＋0．05mg·L-1NAA,增殖系数最高,达10．60;生根最优培养基为：MS＋0．3mg·L-1NAA十0．2mg·L-1 IBA。生根率最高达到了83．33％．保存12个月时处理C4（MS＋0．44g·L-1 CaCl2＋0g·L-1甘露醇＋1．0mg·L-1多效唑）中尤溪金柑试管苗的存活率均为最高,达97．8％．     

浙贝母鳞茎愈伤组织诱导分化及植株再生研究

以狭叶、宽叶和多籽浙贝母品种鳞茎为材料,研究了不同消毒方法、不同激素配比培养基对浙贝母愈伤组织诱导和分化及植株再生的影响。结果表明,0.1%升汞处理20 min为最佳的消毒方法;在诱导培养基MS+NAA 1.5 mg ·L-1+KT 0.5 mg ·L-1中诱导率最高,达到36.7%;在分化培养基MS+NAA 4.0 mg ·L-1+KT 1.0 mg ·L-1中分化率最高,达到80.7%。研究结果还发现,不同基因型浙贝母对鳞茎愈伤组织诱导与分化及植株再生有较大影响。     

泰国巨竹试管快繁研究

以泰国巨竹Gigantochloa tekserah成熟种胚为材料, 研究不同激素组合对泰国巨竹丛生芽增殖及生根的影响, 建立其试管繁殖体系。结果表明:泰国巨竹丛生芽的最佳增殖培养基为MS(Murashige and Skoog)+3 mg·L-1 BA(6-苄基腺嘌呤)+0.01 mg·L-1 TDZ (噻苯隆)+0.3 mg·L-1NAA(萘乙酸), 增殖系数为2.11, 芽丛生长旺盛; 最优生根培养基为1/2MS+3.0 mg·L-1 IBA(吲哚丁酸), 生根率达70%, 根系发达、粗壮; 试管苗移栽至等配比的泥炭、蛭石、珍珠岩的基质中, 成活率达100%。     

不同生长延缓剂对马铃薯脱毒试管苗保存的影响

以马铃薯主栽品种克新13脱毒试管苗为试验材料,以添加CCC(矮壮素)500 mg.L-1、B9(丁酰肼)80 mg.L-1、PP333(多效唑)0.3 mg.L-1的培养基对其进行增殖培养,比较不同生长延缓剂对马铃薯脱毒试管苗增殖、保存的影响。结果表明:增殖培养基中附加500 mg.L-1的CCC(矮壮素)保存效果最为理想,可使马铃薯试管苗种质保存12个月以上,而且经过保存处理后对试管苗继代没有影响。     

不同穗型籼粳杂交稻F1代花药培养条件的优化

以直立穗型沈农265粳稻与泸恢99籼稻杂交F1为材料,通过筛选与优化基本培养基种类、低温处理时间及激素成分等培养条件来建立高效花药培养体系。结果表明:经过7~11d的10℃低温处理的花药组织愈伤诱导显著高于未低温处理或其他处理时间的材料;以SK3或M8为基本培养基都可以获得较好的诱导率;以SK3为基本培养基,采用复合激素水平为2 mg.L-1 2,4-D+1 mg.L-1 NAA+0.2 mg.L-1 6-BA的愈伤组织诱导培养基获得最高23.22%的诱导率;以MS为基本培养基,复合激素水平为4 mg.L-1 KT+1 mg.L-1 NAA+0.5 mg.L-1 6-BA的分化培养基上获得最高70.66%的分化率。     

铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生

为建立铁皮石斛Dendrobium officinale茎段原球茎途径的快繁技术体系,以带腋芽的无菌茎段为材料,利用正交试验的方法,研究基本培养基、植物生长调节剂、蔗糖质量浓度和添加物对原球茎的诱导、增殖与分化和生根的影响。结果表明,原球茎诱导的最佳培养基为1/2MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1);原球茎增殖与分化的最佳培养基分别为MS+蔗糖30g·L~(-1)和1/2MS+蔗糖10g·L~(-1)+马铃薯泥10%;生根的最佳培养基为1/2MS+NAA1mg·L~(-1)+马铃薯泥10%+香蕉泥10%,成功建立了铁皮石斛茎段从原球茎诱导到植株再生的组培技术体系。