铁皮石斛原球茎的增殖培养研究

为探索最适宜铁皮石斛原球茎增殖的固体培养基配方,以获得高质量的组培苗,为工厂化育苗提供技术支撑,在相同的实验室培养条件下,把同一阶段的原球茎接种于不同激素比的4种培养基中,培养周期为60 d,每隔15 d取样检测1次,对不同生长状况的试验结果进行分析研究.结果表明,在基本培养基1/2 MS中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA、0.5 mg/L的NAA和浓度为20%的马铃薯提取液进行固体培养,铁皮石斛原球茎的增殖效果好.     

铁皮石斛原球茎液体悬浮培养研究进展

铁皮石斛是我国传统的名贵中药,具有很高的药用价值。为了解决铁皮石斛组织培养中存在的组培苗生产成本高、移栽苗成活率低等问题,铁皮石斛原球茎悬浮培养的研究日益增多。从影响原球茎增殖和石斛多糖积累的因素及石斛多糖药理研究等方面阐述了关于铁皮石斛原球茎悬浮培养的研究概况。     

铁皮石斛原球茎固体培养和液体悬浮培养动力学研究

为筛选适合铁皮石斛原球茎的最佳培养方式，采用固体培养和液体悬浮培养两种培养方式，并研究液体悬浮培养的营养消耗变化规律，同时考察了液体培养液中pH值和电导率的变化。结果表明：原球茎在固体培养条件下，培养60d后干重达到最大，为13．40g／L，多糖产量最大值为2412．5mg／L；在液体悬浮培养条件下，干重仅需要50d可达到17．64g／L，多糖产量最大值为3081．2mg／L。液体培养在生物量、多糖产量上均优于固体培养；原球茎生长与碳源、氮源和磷的消耗存在着密切关系，培养基电导率变化与原球茎的生物量积累呈线性关系。     

沼肥对铁皮石斛原球茎增殖培养的影响

以铁皮石斛无菌原球茎作为外植体,研究沼肥以不同比例替换铁皮石斛原球茎增殖培养基中部分营养成分后对铁皮石斛原球茎增殖的影响。结果表明,沼肥按一定比例替代培养基中的部分营养成分后可以促进原球茎增殖。当沼肥以10%的替代比例替代大量元素时,铁皮石斛原球茎增殖情况最好,原球茎呈深绿色,分布紧密,仅有少量分化。表明在铁皮石斛组培过程中,可以按一定的比例用沼肥替代部分营养成分,从而达到提高产量、降低生产成本以及资源合理化利用的目的。     

霍山石斛原球茎的诱导及培养方式对原球茎增殖的影响

以霍山石斛试管苗带节的茎段为材料,研究不同激素组合对霍山石斛原球茎诱导的影响,并比较4种不同培养方式对霍山石斛原球茎增殖的影响。结果表明,生长物质2,4-D是霍山石斛原球茎诱导的关键因子,霍山石斛原球茎诱导的适宜培养基为Knudson 2,4-D 0.1 mg.L-1 KT 0.05 mg.L-1;霍山石斛原球茎增殖培养阶段,主要采用液体振荡培养方式,适时转接于固体培养基上交替培养,调节原球茎生长状态,采用这种改进的培养方式生产的原球茎可用于生物反应器的大规模培养。     

不同培养条件对流苏石斛原球茎增殖的影响

为了找到适合流苏石斛原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑,以流苏石斛种子诱导出的原球茎为试验材料,研究不同基本培养基、不同碳源与活性炭对其增殖的影响.结果显示:在5种基本培养基中,以MS培养基增殖效果较佳,平均增殖系数为8.47;碳源的筛选中,使用30 g/L的葡萄糖或白糖可达到较好增殖效果,且经济实惠.在原球茎增殖的基本培养基中加入0.5 g/L活性炭有利于提高原球茎的增殖系数,同时,对原球茎的长势有促进作用.当流苏石斛原球茎的增殖培养基为MS+30 g/L的葡萄糖或白糖+0.5g/L活性炭时,有利于提高原球茎的增殖系数及长势.     

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。     

铁皮石斛类原球茎液体悬浮培养增殖体系构建

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)类圆球茎为研究材料,系统地研究了影响其液体悬浮培养增殖的诸多因素,如不同质量浓度的MS基本培养基、NAA、蔗糖、椰乳以及培养基pH值和接种量,旨在构建铁皮石斛类圆球茎液体悬浮培养增殖体系。研究结果表明:在液体悬浮培养条件下,最有利于铁皮石斛类原球茎的生长增殖的培养基为1/2MS基本培养基中添加1.0 mg/L NAA,50 g/L椰乳,蔗糖30 g/L;接种量为40 g/L。     

美花石斛原球茎增殖及分化的研究

将美花石斛原球茎培养于含有不同生长调节物质的SH培养基上,结果发现,不同生长调节物质对美花石斛原球茎分化的不同阶段产生不同的影响.含有香蕉提取物和BAP2.0 mg/L+KT2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L的SH培养基对鲜重增加影响较显著;白萝卜汁对叶片分化有一定的促进作用;含有酵母提取物的SH培养基对增殖芽和不定根分化效果最好;马铃薯、香蕉和椰子汁对生根分化影响较大.建议在美花石斛原球茎不同分化阶段,根据其生长和分化需要,继代培养于相应的培养基上,以获得优质美花石斛组培苗.     

蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究

就分别添加 1～ 7mg/LBA和 1mg/LNAA的MS、1/ 3MS和改良KC 3种基本培养基对蝴蝶兰 (Phalenopsishybrid)原球茎增殖的影响进行了研究 .结果表明 ,改良KC的效果最好 ,1/ 3MS的效果次之 ,MS的效果最差 在改良KC基本培养基中 ,加入BA的浓度以 1mg/L对原球茎增殖的效果最好 ,随BA浓度的增加原球茎增殖率下降 在添加 1mg/LBA的改良KC培养基中 ,NAA浓度 (0 1～ 2 0mg/L)对原球茎增殖的效果以 0 1mg/L处理组较好 ,且出苗率也高 在添加 1mg/LBA和 0 1mg/LNAA的改良KC培养基中 ,活性炭低浓度 (0 5～ 1 0g/L)时对原球茎增殖影响不明显 ,高浓度 (2～ 3g/L)时对原球茎增殖有促进作用 ,但原球茎有黄化现象 ;从出苗情况看 ,以添加 1 0g/L组出苗率最高 .     

秋石斛离体快速繁殖技术研究

以秋石斛‘三亚阳光’幼芽为外植体,采用丛生芽诱导途径,并利用正交设计法,探讨基本培养基(花宝1号、改良1#、改良2#、改良3#)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、白糖等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立秋石斛‘三亚阳光’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对秋石斛丛生芽增殖影响的主次关系为基本培养基6-BANAA白糖;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良2#+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达6.25;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3#+NAA 0.3mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+香蕉泥100.0g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽60d成活率达96.5%。     

铁皮石斛圆球茎增殖影响因素的研究

[目的]探讨培养基的不同组成对铁皮石斛圆球茎增殖的效果及影响,为提高其组培种苗的商业化生产效率提供技术参考。[方法]以无菌播种获得的铁皮石斛圆球茎为材料,对影响铁皮石斛圆球茎增殖的几种因素进行了研究。[结果]铁皮石斛圆球茎在1/2MS培养基中增殖效果较好;在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L培养基中加入BA 2.0 mg/L可促进铁皮石斛圆球茎增殖;培养基中加入天然物质有利于铁皮石斛圆球茎的增殖生长,以加入椰子汁100 ml/L为最佳。[结论]铁皮石斛圆球茎在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋BA 2.0mg/L＋椰子汁100 ml/L培养基上增殖效果最佳,增殖系数达到4.8。     

春石斛的组织培养和快速繁殖研究

试验结果表明:春石斛不定芽诱导、增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA1 mg/L+NAA 1 mg/L+香蕉泥100 g/L;原球茎诱导的培养基以1/2MS+NAA最佳;不加任何生长调节剂的1/2MS培养基最适宜原球茎的增殖;原球茎分化的最适基本培养基为1/2MS;最适宜的壮苗生根培养基为1/2MS+NAA2 mg/L+香蕉泥100 g/L。     

齿瓣石斛种子培养及扩繁技术研究

研究了齿瓣石斛种子培养及扩繁技术。结果表明：低盐和椰子乳及适当的激素（BA 1.0-1.5 mg/L、NAA 0.02-0.2 mg/L）组合对石斛种子萌发有促进作用;在NAA一定时,随BA的提高,原球茎的扩繁系数提高;在BA一定时,随NAA的提高,原球茎的扩繁系数降低,但诱导出的原球茎体积大,分化的苗健壮。     

铁皮石斛组培快繁技术的研究

为了建立铁皮石斛快速繁殖体系,以其茎段为材料,研究了不同培养基组分、激素浓度对铁皮石斛增殖和生根的影响。结果表明:铁皮石斛在初代培养中用酒精消毒30s后再用0.1%升汞杀菌6min最为适宜;最适培养基为MS基本培养基;在MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.5mg·L-1 NAA中铁皮石斛的增殖效果最佳,在MS培养基中添加3.0mg·L-1 IBA生根效果最好,生根率可达100%;试管苗移栽的最佳基质为苔藓,单独使用成活率可达90.6%。     

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

以MS培养基为基本培养基,采用液体培养的方式,通过调节2,4-D,6-BA及蔗糖浓度,对粳稻南农4007愈伤组织的增殖进行了初步研究。结果表明：2,4-D浓度在0.0～4.0mg/L时对水稻愈伤组织的增殖和生长有一定的影响,6-BA浓度在0.2～3.2mg/L、蔗糖浓度在10～50g/L时对愈伤组织增殖生长差异不显著,但当2,4-D为2.0mg/L、6-BA为0.8mg/L,蔗糖为20g/L时,其愈伤组织不论从生长状态,还是增殖速度上都较好且褐化程度相对较轻。适合粳稻南农4007愈伤组织液体增殖培养的基本配方为MS＋NAA0.5mg/L＋2,4-D2.0mg/L＋水解络蛋白1g/L＋蔗糖20g/L＋6-BA0.8mg/L。     

铁皮石斛拟原球茎的发生过程

以铁皮石斛Dendrobium officinale的茎尖为外植体,在特定条件下诱导产生拟原球茎,进一步培养形成幼苗。结果表明：原球茎最优诱导培养基为1/2MS（Murashige and Skoog）+ 0.5 mg·L^-1 6-苄基嘌呤（6-BA） + 0.05 mg· L^-1萘乙酸（NAA） + 0.1 mg·L^-1激动素（KT） + 1.0 g·L^-1水解乳蛋白（LH）。复合添加物的试验表明,土豆汁对拟原球茎（PLBs）的增殖有很好的促进作用。对铁皮石斛拟原球茎的解剖学研究表明：拟原球茎是由位于顶端分生组织下的薄壁细胞脱分化形成的胚性细胞发育而来。外植体接种后20 d左右外植体基部开始膨大,40 d左右出现肉眼可见的乳白色突起,这些突起逐渐增大,成为圆形至卵圆形的乳白色拟原球茎。在条件适宜的拟原球茎增殖培养基上继续培养,拟原球茎边缘的薄壁细胞继续脱分化,进一步发育形成球形的细胞团,可继续形成突起,使拟原球茎不断增殖。图1表2参13     

青山百合的组织培养与快速繁殖

试验结果表明，运用植物组织培养技术，以青山百合的鳞片、茎尖为外植体，选用MS培养基，在添加0．4mg／L 6-BA与0．5mg／L NAA或0．2mg／L 6-BA、0．5mg／L NAA与0．1mg／L KT条件下，能快速繁殖青山百合种苗，同时也有助于解决品种退化、脱毒等问题。     

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖

实验以铁皮石斛优良品种的茎段为外殖体,诱导丛生芽,壮苗生根,从而实现大量繁殖.当NAA的浓度为0.3 mg/L,6-BA的浓度为5 mg/L时,铁皮石斛丛生芽的增殖率最高.在MS培养基中,铁皮石斛壮苗生根的最好培养基为MS+6-BA(2 mg/L)+20%香蕉汁.不同激素浓度的6-BA对铁皮石斛壮苗生根的影响比较得出,不加6-BA的培养基小苗生根率低、发根迟、根数少;而加入6-BA后以大幅度提高生根率,尤以在6-BA 0.4 mg/L的培养基中小苗生根快,根数多.从不同培养基对铁皮石斛试管苗生长的影响看出,幼苗用MS培养基比用KC培养基培养生长好.铁皮石斛培养60 d左右时生长速度最快.香蕉提取液能促进生长,从而使苗的生长加快.以MS+香蕉汁20%的培养基为最好.