一株新饲用乳杆菌的分离鉴定及益生性研究

从猪粪便中分离得到一株新饲用乳杆菌,对其16S rDNA基因进行了测序,该段基因序列已提交GenBank,登录号为HQ641209。将该菌株16S rDNA基因序列进行在线BLAST比对并与其他乳杆菌属菌株的16S rDNA序列建立系统发育树,结果显示该菌16S rDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii (AB295648)的同源性为99.7%,因此该菌鉴定为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),将其命名为"Lactobacillus johnsonii Sun001"。经测试,该菌株对E.coli K88、K99菌株的生长有抑制作用,在pH为2.5的模拟胃液中处理3 h存活率为68.8%,在0.3%胆盐浓度的模拟肠液中处理3 h存活率为21.4%。     

一株凝结芽孢杆菌的分离鉴定及益生性研究

试验旨在分离鉴定一株来源于池塘底泥的具有益生功能的凝结芽孢杆菌,并研究其益生性能。从自然池塘底泥分离得到一株产酸能力强的杆状细菌,通过生理生化特征分析和16S rDNA序列比对,鉴定分离菌为凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）。该分离菌株对大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、无乳链球菌和嗜水气单胞菌有抑制作用;在pH 2.5的模拟胃液中处理12 h存活率为71.9%;在胆盐浓度为0.3%的模拟肠液中处理12 h,存活率为84.4%。该分离菌株可有效降解亚硝酸盐,48 h降解率达到96.80%。将270只1日龄AA肉鸡分成3个处理组,日粮分别添加0（Ⅰ组）、1.0×10⁶（Ⅱ组）和1.0×10⁷ CFU/g（Ⅲ组）剂量的凝结芽孢杆菌NJ102,试验期42 d。结果显示,Ⅱ、Ⅲ组肉鸡的平均日增重和终末体重显著高于Ⅰ组（P<0.05）,料重比显著低于Ⅰ组（P<0.05）,各组间平均日采食量差异均不显著（P>0.05）。结果表明,来源于池塘底泥的凝结芽孢杆菌NJ102有一定的抗逆性和益生能力,能改善肉鸡的生长性能,具备作为微生物饲料添加剂开发的潜力。     

一株鸡源芽孢杆菌的分离鉴定和益生性研究

芽孢杆菌是家禽微生态制剂中应用最多的益生菌,对家禽消化道保健具有很好的临床功效。为了筛选出鸡源芽孢杆菌用于临床肉鸡养殖保健,试验从肉鸡的盲肠中分离获得一株芽孢杆菌,并对其理化特性和益生性进行了研究。结果显示:芽孢杆菌的染色、菌落和生化性质符合枯草芽孢杆菌的特征。益生试验显示枯草芽孢杆菌具有耐酸、耐高温、产酶的特性。药敏试验显示枯草芽孢杆菌对抗生素敏感。说明分离到的枯草芽孢杆菌具有临床应用的价值。     

6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究

本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨大芽孢杆菌、1株死谷芽孢杆菌、2株解淀粉芽孢杆菌和2株枯草芽孢杆菌;分离菌对多黏菌素和青霉素耐药性较强,对其他12种常用药物较敏感,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好;4种芽孢杆菌均可在酸性、高胆盐和高温条件下生存,特别是巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌耐受能力较强;分离的芽孢杆菌对小鼠均无致病性,其中巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌有较明显的促进试验动物生长的作用。结果提示,巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌可作为益生性芽孢杆菌的初步选择。     

虾源罗伊氏黏液乳杆菌的分离鉴定及其性质研究

本试验旨筛选一株防治水产致病菌能力强的虾源乳酸菌,并对其抑制水产致病菌的性质进行研究。以健康南美白对虾的不同肠段菌群为菌株分离来源,采用CaCO3-MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,再通过抑菌能力试验和溶血试验复筛获得安全菌株。对筛选的乳酸菌菌株进行16S rRNA测序鉴定,并评价其生长特性、耐受性、抗生素敏感性及不同处理的发酵上清液对水产病原菌的抑菌能力。结果显示：对常见水产致病菌抑菌能力最强的安全菌株经16S rRNA测序鉴定为罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G。在菌株的生长特性上,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G的最适培养pH为5.0,最适培养温度为39℃,4～14 h为其对数生长期;从耐受性上看,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G对人工胃肠液和渗透压均具有一定的耐受性,在pH 3.0条件下静置培养4 h存活率为90.7%,3.0 g/L的胆盐浓度下培养4 h存活率为85.3%,60‰高盐度条件下静置培养4 h存活率为98.7%;在不同处理对罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G发酵上清液抑菌能力影响方面,发酵上清液对致病菌的抑菌能力为创伤弧菌>金黄色葡萄球菌>副溶血弧菌...     

一株布氏乳杆菌的分离鉴定

研究从发酵秸秆中分离获得1株抑菌性能较强的乳酸菌(BS6),并通过形态学、生理生化和分子鉴定对该菌株进行鉴定,最终确定菌株BS6为布氏乳杆菌,并对布氏乳杆菌BS6的生长曲线、产酸曲线及耐酸性能进行研究,结果表明,菌株BS6生长速率快、产酸性能强且能够耐受pH环境,为青贮饲料接种剂提供有力的理论依据。     

一株发酵乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究

研究以青贮饲料为材料,分离筛选获得2株乳酸杆菌R1和R3,1株肠球菌R2。采用形态学、生理生化和16S rDNA方法对2株乳酸杆菌R1和R3进行鉴定,最终确定R1为发酵乳杆菌,R3为约氏乳杆菌。并对发酵乳杆菌R1的生物学特性进行研究,为其在青贮饲料中的应用提供依据。     

一株布氏乳杆菌的分离、鉴定及其特性研究

为寻找抗性菌,以替代部分抗生素,并研究其特性,试验以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌为指示菌,采用牛津杯法从传统发酵食品中筛选出1株对3种病原菌均具有拮抗作用的菌株。利用菌落形态、革兰氏染色、16SrDNA序列分析来鉴定菌株,并测定其生长曲线。结果显示,试验筛选得到了1株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌均具有抑制作用的益生菌,经鉴定为布氏乳杆菌(Lentilactobacillus buchneri)。此分离菌为革兰氏阳性菌,单生或成对生长。此菌在抑菌方面具有良好的应用前景。     

一株植物乳杆菌的分离鉴定及其生长特性研究

从健康仔猪肠道内容物中分离筛选得到一株抗逆性较好、产酸及抑菌能力较强的菌株LYP06-2,结合其生理生化特性及16SrDNA序列分析,鉴定该菌株为乳杆菌属的植物乳杆菌（Laetobaeillus plantarum）。菌株LYP06-2在pH2．0的人工胃液中处理3h后存活率为31．3％,人工肠液中存活率为33．0％,胆盐浓度为0.3％时存活率为3．7％,对大肠杆菌K88、K99具有较强的抑制作用,也有较强的产酸能力,这为将来规模化生产有效的微生态制剂产品奠定了基础。     

一株母猪产道益生性粪肠球菌的分离鉴定

产道作为母猪生殖系统的重要器官组织,与繁殖性能密切相关.本试验无菌采集江西省某养殖场窝产14头母猪产道中段阴道分泌物进行传统细菌分离培养,初步筛选出4株细菌,挑选其中一株通过生化反应和16S rDNA序列分析方法进行鉴定,同时进行抗生素抵抗能力试验和牛津杯法体外抑制试验.生化鉴定结果表明该菌可降解果糖、乳糖、半乳糖等,...     

一株猪源乳杆菌的分离鉴定

从猪小肠中分离得到一株乳杆菌,对其进行生理生化鉴定、16S r DNA基因测序和同源性分析。分析结果显示,该菌株的菌落有溶钙圈,白色圆形,边缘光滑,无鞭毛,无荚膜,无芽孢的革兰氏阳性杆菌,16SrDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus gasseri的同源性为98.7%,将该菌株鉴定为格氏乳杆菌。     

一株干酪乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本研究旨在分离既能用于微生态制剂又能用于青贮饲料发酵剂的优良乳酸菌,采集规模化牛场青贮饲料,取梯度稀释液涂布MRS平板,进行厌氧培养,筛选优势菌株,观察其菌落形态,并进行生化试验和特异性PCR鉴定。研究自筛乳酸菌的生长曲线、产酸曲线、培养温度及培养基初始pH对菌株生长的影响,并研究其抑菌特性、药物敏感性和安全性。试验筛选到1株菌落形态圆形、边缘整齐、表面光滑、乳白色、镜检为革兰氏阳性的无芽孢杆菌。生化结果显示,分离菌株可厌氧生长,运动性试验、过氧化氢酶试验、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、吲哚试验结果均为阴性,15种糖醇发酵试验结果符合干酪乳杆菌生化特征。用干酪乳酸杆菌特异性引物对菌株进行PCR鉴定,琼脂糖凝胶电泳结果显示在727 bp处出现特异性扩增条带,与生化鉴定结果相符,将分离菌株命名为RS1。RS1在0~4 h时发酵液pH变化不明显,处于生长延迟期;4~16 h时发酵液pH下降较快,进入对数生长期;16~36 h时发酵液pH下降缓慢,进入稳定期。RS1在培养温度为20~50 ℃范围内均能生长,适宜生长温度为25~40 ℃;在培养液初始pH 1.0~9.0条件下均能生长,最适pH为6.0~8.0;对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为23 mm,对大肠杆菌的抑菌圈直径为17 mm;对恩诺沙星和头孢他啶耐药;经14 d灌服小鼠生长状况良好。上述结果表明,本试验筛选到的干酪乳杆菌RS1安全、无致病性,在微生态制剂及生物饲料添加剂领域具有潜在的开发价值。     

一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究

为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16SrDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多重耐药性,测试的20种药物中,该菌株对恩诺沙星、青霉素等13种药物具有完全耐药性,仅对头孢曲松、头孢他啶、头孢拉定、哌拉西林、舒巴坦5种药物敏感。人工感染试验结果显示,该菌对草鱼、黄颡鱼、罗非鱼、禾花鲤具有较强的致病性。本试验结果阐明了罗非鱼患病的原因,同时在养殖过程中可指导养殖户合理用药。     

一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究

为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多重耐药性,测试的20种药物中,该菌株对恩诺沙星、青霉素等13种药物具有完全耐药性,仅对头孢曲松、头孢他啶、头孢拉定、哌拉西林、舒巴坦5种药物敏感。人工感染试验结果显示,该菌对草鱼、黄颡鱼、罗非鱼、禾花鲤具有较强的致病性。本试验结果阐明了罗非鱼患病的原因,同时在养殖过程中可指导养殖户合理用药。     

一株牛源副干酪乳杆菌的分离与鉴定

为了分离有研究价值的益生菌,从牛肠道中分离到1株疑似乳酸菌,通过对参考菌株的16S r RNA基因序列的归纳分析,证实存在种间特异性可变区,最终确定为副干酪乳杆菌,分离菌作为一种益生菌在饲料添加剂方面存在重要研究价值。     

罗伊氏乳杆菌所产细菌素的研究

试验对罗伊氏乳杆菌6126的发酵上清液进行了系统研究。结果表明:罗伊氏乳杆菌6126发酵上清液可以产生细菌素,并研究了6126发酵上清液中细菌素的部分特性。该细菌素抑菌谱广,可以抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,对热(100℃,30min)和pH(2.0～10.0)稳定,胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K等多种蛋白酶可使其部分失活。     

猪源罗伊氏乳杆菌GL001的分离与益生特性研究

为了给猪源益生菌制剂的研究与开发提供更多理论依据,从小型巴马猪粪便中分离获得罗伊氏乳杆菌GL001,对该分离菌株的生长特性、产酸性能、模拟胃肠道环境下的耐受能力、药物敏感性及动物安全性进行检测。结果显示：罗伊氏乳杆菌GL001能迅速进入对数生长期,在16 h达到最高生长点后,pH值也相应变平稳;罗伊氏乳杆菌GL001在模拟的胃液环境中,1.5 h的存活率为93.84%,3 h后为88.41%;对0.3%的胆盐环境耐受性强;罗伊氏乳杆菌GL001对阿莫西林、链霉素、多西环素、氧氟沙星敏感,但对青霉素不敏感;细菌的上清液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑制作用;大鼠安全性试验表明,分离的罗伊氏乳杆菌GL001对雌鼠、雄鼠的生长和脏器指数均无影响,大鼠脏器没有细菌异位情况。研究表明,分离得到的罗伊氏乳杆菌GL001可作为潜在饲用益生菌进一步研究。     

一株水貂源乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为研究适用于水貂的专用菌制剂,试验采集健康成年母貂的新鲜肠粘膜和粪便,用改良MRS培养基,对肠道与粪便中的微生物进行分离培养,筛选优势菌株,观察其菌落形态,并进行生化试验和16SrRNA分子生物学鉴定,并对其生长情况和安全性等生物特性进行了研究。结果表明,优势菌株(RSJ)为乳酸杆菌;生长6h进入对数期,前18h菌株繁殖较快,pH急速下降;18~36h,菌株维持在稳定期;pH 2.0和3.0时菌株不生长,pH 5.0和6.0时生长良好;对青霉素和环丙沙星的耐药性较强,对其余的抗生素则表现为敏感;菌株RSJ对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有抑菌作用。安全性试验显示,RSJ对小鼠无毒性。RSJ菌株具备了益生菌的基本条件,为进一步研究与开发微生态制剂奠定了基础。     

2株地衣芽孢杆菌抗逆性及益生性的研究

对2株地衣芽孢杆菌(Bacillus clicheniformis)C10和C46进行耐酸性及耐胆盐等抗逆性试验,进而进行抑菌测定、产酸和产酶等益生性试验,对13种抗生素进行药敏性测定.结果表明,2株地衣芽孢杆菌C10和C46在pH 2.0、3.0和4.0的人工胃液中处理2和6 h,存活率均为94 %,0.03 %～0.3 %胆盐溶液里存活率均超过91 %,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌K88和鸡白痢沙门菌均有明显的抑制作用,有机酸总量分别达到1 230.99和298.69 mg/L,蛋白酶活力分别为256和291 IU/mL,对10种抗生素有耐药性,对3种抗生素有药敏性.说明2株地衣芽孢杆菌具有很强的抗消化道生境及较好的益生功能.     

一株鲈塘源植物乳杆菌的分离鉴定及其对养殖水体影响研究

利用MRS培养基和LB培养基对广东顺德大口黑鲈养殖池塘水体样品进行了乳酸菌的分离和筛选,共获得27株乳酸菌。以引起大口黑鲈烂身病的嗜水气单胞菌为指示菌进行拮抗作用试验,筛选获得一株具有显著抑菌活性的乳酸菌XTL3,并对该菌株进行了生理生化试验、16Sr DNA序列分析及其对大口黑鲈池塘养殖的安全性和效果进行了研究。结果表明,菌株XTL3对嗜水气单胞菌的生长具有较好抑制作用。生理生化试验、16S r DNA序列分析表明,XTL3与植物乳杆菌的相似性为100%,初步鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。室外养殖池塘安全性和效力检验结果表明,在使用过程中的一个月内,无异常死亡,无病害发生,池塘的溶氧变化差异不显著(P0.05),氨氮的变化差异显著(P0.05),实验塘的水环境保持更稳定。筛选的植物乳杆菌具有良好的抑菌和调水能力,且其生长特性适应大口黑鲈的池塘养殖环境,这为大口黑鲈疾病的生态防控及乳酸菌资源的开发利用奠定了基础。