一株具有抑菌活性的乳酸片球菌的鉴定与培养条件优化

为了开发一种高效南美白对虾微生态制剂,试验对前期从南美白对虾肠道中筛选到的1株抑菌性较好的菌株RSP-6进行菌落特征、亚显微形态、生理生化特征及16S rDNA同源序列分析,采用四因素(温度、pH值、氯化钠和碳源)三水平的正交试验设计,优化了该菌的培养条件。结果表明:RSP-6为乳酸片球菌。温度、pH值、氯化钠、碳源均显著影响乳酸片球菌的生长,且影响次序为pH值氯化钠碳源温度。乳酸片球菌生长的最优条件为培养温度35℃, pH值6,氯化钠0,碳源为果糖。     

一株羊源粪肠球菌的分离鉴定

为了对一例疑为粪肠球菌感染的羔羊进行病原鉴定,本研究采用常规细菌分离鉴定方法和PCR方法分别进行分离与鉴定。结果根据菌落形态、细菌染色特性及生化特性,鉴定出分离的细菌为羊源粪肠球菌。     

牛瘤胃乳酸片球菌的分离鉴定与生物学特性研究

为了获得生物学特性良好的乳酸菌,试验利用厌养菌分离技术从成年牛瘤胃中分离出一株牛瘤胃乳酸菌,命名为Y-A-2,并对该菌进行了形态分析、生化试验、16S rRNA序列同源性分析和生物学特性研究。结果表明:Y-A-2菌株为乳酸片球菌,可发酵纤维二糖、水杨苷、菊糖;最适生长温度为26℃,最适生长温度下pH值随着时间的延长逐渐降低,具有一定的耐盐能力,不耐强酸强碱。说明该菌具有良好的生物学活性,有助于牛瘤胃微生态制剂的研制和控制牛瘤胃的微生物发酵进程。     

一株致病性粪肠球菌的分离与鉴定

从1羽发病雏鸡中分离到1株溶血性革兰氏阳性球菌。初步分离鉴定后经攻毒试验能够造成小白鼠和雏鸡死亡,具有致病性。药敏试验表明,该菌对多种药物均表现耐药性,仅对庆大霉素、青霉素、氧氟沙星敏感。通过BLAST软件分析该菌株的16S rRNA序列,确定该致病性细菌为粪肠球菌。     

一株西藏牦牛源肠球菌的分离鉴定

为了鉴定一株分离自西藏山南病死牦牛的病原菌并了解其耐药特性。本次试验利用生化试验、PCR扩增试验对该菌株进行种属鉴定,通过药敏试验了解该菌株的耐药情况并利用动物试验来测试枯草芽孢杆菌对肠球菌导致的腹泻的治疗作用。试验结果表明,该菌株生化试验、PCR测序结果确定属于肠球菌属。此外,药敏结果显示该肠球菌仅对β-内酰胺类的氨苄西林、苯唑西林表现出固有耐药,而对庆大霉素、链霉素、卡那霉素、阿莫西林、万古霉素等表现出敏感,由动物试验看出,枯草芽孢杆菌对肠球菌导致的家兔腹泻具有明显的治疗作用。本次试验将对今后肠球菌的临床治疗提供一定指导。     

一株乳酸片球菌的筛选、鉴定及其固态发酵饲料原料的产酸分析

本研究从猪的新鲜粪便中分离纯化出一株具有较强产酸效果的乳酸菌HF14,综合形态、生理生化、16SrDNA序列分析,初步鉴定该菌株为乳酸菌片球菌(Pediococcus acidilactici)。对HF14固态发酵豆粕、麸皮、玉米粉与稻壳粉等饲料原料的产酸类别进行分析发现,产生的有机酸以L-乳酸与乙酸为主,其中,发酵玉米粉的pH最低,为3.77,L-乳酸与丙酸含量最高,分别为21.91、1.03mg/g;发酵麸皮的pH降幅最大,丁酸含量最高,为0.72mg/g;发酵稻壳粉的乙酸含量最高,为6.15mg/g,L-乳酸含量最低;发酵豆粕的各个指标居中。     

一株母猪产道致病性粪肠球菌的分离鉴定

为了确定景德镇某养殖场患子宫内膜炎母猪感染的病原菌、筛选有效的治疗药物,试验无菌采集景德镇某养殖场患子宫内膜炎母猪产道中段阴道分泌物进行分离纯化,通过生化试验、16S rDNA测序完成菌种初步鉴定,利用毒力基因检测和小鼠致病性试验验证菌株致病性,并进行药敏试验。结果表明:分离到一株优势菌株,为粪肠球菌;检测证实该菌株携带毒力基因cylA和gelE,并且对小鼠有致病性;该分离菌株分别对头孢哌酮和恩诺沙星表现为极敏和高敏,对万古霉素、氯霉素、多黏菌素B、环丙沙星等高敏,对其他抗菌药物表现为不同程度的耐药,将敏感药物应用于临床治疗效果明显。说明本试验在母猪产道内成功分离到一株致病性粪肠球菌,该细菌可能是母猪子宫内膜炎的病原菌之一,头孢哌酮和氟喹诺酮类药物可以作为治疗该养殖场母猪子宫内膜炎的首选药物。     

一株鸡源屎肠球菌的分离及鉴定

为丰富可用作禽用微生态制剂的肠道益生菌株,研究选择7日龄健康雏鸡肠道内容物,利用KF链球菌琼脂培养基分离培养目标分离菌株,通过形态特征和培养特性、生理生化及16S r DNA分子鉴定法,最终确定1株分离菌为屎肠球菌,命名为HEW-A527,为后续禽类益生菌的益生功能及微生态制剂研究提供理论依据。     

一株仔猪屎肠球菌的分离及其种属鉴定

为分离出可用作猪用微生态制剂的肠道益生菌株,本研究选择锦州市凌海大业乡生态猪场为试验采样点,采集10日龄左右健康仔猪肠道粪样12份。利用MRS琼脂培养基分离培养初筛目标分离菌株的形态特征和培养特性,再通过生理生化鉴定法和16SrRNA基因分子鉴定法,最终确定1株分离菌为屎肠球菌,并命名为LN／EFl312株。为后续肠道益生球菌的益生功能研究奠定了物质基础。     

3株乳酸片球菌的鉴定及其耐酸耐盐特性和抑菌作用研究

为了探索从日本处理有机废弃物样品中分离的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)耐酸耐盐特性和抑菌作用,采用浸注培养法从处理有机废弃物样品中进行菌株分离,并对分离菌株R-4、B-7、D-13进行生理生化及16S rDNA鉴定;分别将其接种于pH4的MRS肉汤培养基和50 mg/mL NaCl的MRS肉汤培养基中37℃培养48 h,观察其生长情况;通过牛津杯法测其培养液对大肠埃希菌K88、枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌的抑菌作用。结果从日本处理有机废弃物样品中分离得到13株乳酸球菌,其中菌株R-4、B-7、D-13经鉴定均为乳酸片球菌;并在50 mg/mL NaCl和pH4的MRS肉汤培养基中生长良好且呈现较好的耐酸耐盐特性;3株乳酸片球菌的培养液对4种指示菌均呈现抑制作用,其中菌株B-7的培养液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈直径达17.02 mm±0.33 mm,但其培养液中酸性产物及H_2O_2产物排除结果说明,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用可能与其在生长过程中产生的酸有关。研究结果为乳酸片球菌特性及其应用的进一步研究提供了科学依据,为筛选出处理有机废弃物的微生物发酵菌奠定了基础。     

一株母猪产道益生性粪肠球菌的分离鉴定

产道作为母猪生殖系统的重要器官组织,与繁殖性能密切相关.本试验无菌采集江西省某养殖场窝产14头母猪产道中段阴道分泌物进行传统细菌分离培养,初步筛选出4株细菌,挑选其中一株通过生化反应和16S rDNA序列分析方法进行鉴定,同时进行抗生素抵抗能力试验和牛津杯法体外抑制试验.生化鉴定结果表明该菌可降解果糖、乳糖、半乳糖等,...     

一株猪源屎肠球菌的分离及其种属鉴定

为分离出可用作猪用微生态制剂的肠道益生菌株,本研究选择锦州市凌海大业乡生态猪场为试验采样点,采集10日龄左右健康仔猪肠道粪样12份。利用MRS琼脂培养基分离培养初筛目标分离菌株的形态特征和培养特性,再通过生理生化鉴定法和16SrRNA基因分子鉴定法,最终确定1株分离菌为屎肠球菌,并命名为LN/EF1312株,为后续肠道益生球菌的益生功能研究奠定了物质基础。     

鸡源乳酸乳球菌的分离鉴定与抑菌实验

为了获得无耐药性、无毒副作用的生物药物,减少抗生素的使用,将健康肉鸡肠道进行细菌分离鉴定及体外抑菌试验,结果得知:分离菌在MRS培养基上产生明显的溶钙圈,革兰氏染色阳性,呈圆形或卵圆形;发酵分解乳糖、甘露醇等糖类,H2S、V-P等试验为阴性,MR为阳性;在约1 400bp处出现目的条带,测序比对结果,分离菌与乳酸乳球菌同源性最高;该菌对阿奇霉素、红霉素等高敏,对头孢曲松、环丙沙星中敏,对诺氟沙星、四环素耐药;分离菌对病原指示菌均有抑制作用,其中对葡萄球菌、嗜水气单胞菌尤为显著;试验小白鼠均健康生长,无不良反应。结论:分离菌为乳酸乳球菌,具有广谱抑菌作用,可作为益生菌取代或减少抗生素的使用。     

一株猪源鸟肠球菌的分离鉴定及药敏试验

为了确定引起江西省某规模化养猪场保育猪发病的病原及药物敏感性,为临床预防和控制该病提供依据,试验在无菌条件下采集病死猪的肺脏进行细菌分离,并对分离菌进行形态学观察、生化鉴定、16S rDNA基因扩增和序列测定、药敏试验、动物试验、临床用药观察。结果表明:分离纯化得到1株革兰氏染色阳性、呈短链状排列的球菌,在TSA培养基上形成圆形、边缘整齐、有光泽、湿润、淡黄色的小菌落;分离菌能发酵葡萄糖产酸、产气,能利用各种糖类;分离菌的16S rDNA PCR扩增结果呈阳性,16S rDNA基因序列与GenBank上登录的鸟肠球菌相应序列的同源性为100%;分离菌对头孢噻肟、环丙沙星、氨苄西林、氟苯尼考、阿莫西林和庆大霉素高度敏感;接种小白鼠后,无异常表现;选用氟苯尼考和阿莫西林进行治疗,病情得到了有效控制。说明分离得到的鸟肠球菌对猪有较强的致病性,筛选出的敏感药物在治疗该菌感染中效果较明显。     

一株牦牛源粪肠球菌的分离鉴定及安全性评价

通过探究一株来源于健康牦牛粪便的粪肠球菌S-5的安全性及生物学特性,以获得具有治疗犊牦牛春季腹泻病的益生菌群。文章对菌株S-5的革兰氏染色镜检试验、哥伦比亚血平板试验、生化测定试验、耐受性试验、体外抑菌试验、16S r DNA测序鉴定试验,以及动物回归试验的结果进行分析,并验证其安全性及益生性。结果显示,S-5号菌株为无芽孢、无荚膜、无溶血性的阳性球菌,生化测定试验显示其能分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖等,产酸不产气,不能分解甘露醇、棉子糖,在硫化氢、硝酸盐、吲哚试验中呈阴性,且血凝试验中不发生凝血反应,耐受性试验显示S-5菌株对牛胆盐浓度为0.03～0.15 g/100 m L时和胰蛋白酶浓度为0.5%～1.3%,p H为4.3～6.5时,耐受性极佳,体外抑菌试验证明S-5菌株对大肠杆菌O111、O78有抑制作用,16S r DNA测序鉴定S-5菌株为粪肠球菌,动物回归试验显示S-5菌株对大肠杆菌O111、O78所致的犊牦牛腹泻病有治疗作用且无毒副作用。结果说明本试验将首次获得一株对大肠杆菌所致犊牦牛春季腹泻病具有治疗效果的西藏牦牛源粪肠球菌S-5,亦符合《微生态制剂的质量鉴别与选择、检测...     

一株黑叶猴源鸟肠球菌的分离鉴定及耐药分析

黑叶猴是我国一级重点保护动物,2018年11月贵州某动物园中黑叶猴出现死亡,为调查其原因,本研究采集病死黑叶猴的肺脏样品进行细菌分离纯化,并对分离菌进行革兰氏染色镜检、生化鉴定、16SrRNA基因序列鉴定、小鼠致病性试验及分离株的药敏试验和耐药基因检测.结果显示:经形态观察、培养特性鉴定以及16SrRNA的PCR鉴定,...     

乳酸乳球菌和魏斯氏菌的分离及鉴定

试验以生牛奶、自制泡菜水、青贮料、市售奶酪为样品,进行乳酸乳球菌和魏斯氏菌的筛选与鉴定。通过培养基中菌落形态观察和镜检细胞形态观察,共筛得6株疑似乳酸球菌（分别命名为ST1、ST2、ST6、ST7、ST8、ST9）。经生理生化、耐盐性、耐热性试验以及16S rD-NA序列分析鉴定,这6株菌分属两个属：ST1、ST2、ST7、ST9为乳酸乳球菌（Lactococcus lac-tis）,其中ST2为乳酸乳球菌乳脂亚种（Lactococcus lactis subsp. Cremoris）,ST7为乳酸乳球菌乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp. Lactis ）;ST6、ST8属于魏斯氏菌属（Weissella）,其中ST6为食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria）。研究表明,生牛奶和泡菜水分别是乳酸乳球菌和魏斯氏菌的优良生活环境,传统方法与分子生物技术相结合可更准确快速地分离及鉴定菌株。