不同种家禽红细胞对水禽禽流感抗体效价的影响

为探讨不同种家禽红细胞对禽流感血清抗体效价的影响,对鸭、鹅的禽流感免疫血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,受体破坏酶(RDE)可以完全去除水禽血清中的非特异性凝集抑制因子,但RDE处理血清的成本较高,在临床中不易广泛使用。用5%或20%鸡红细胞吸附处理,可减少水禽血清中非特异性凝集因子对检测的影响,但吸附不完全,且耗时。因此,做HI试验时最好用同种禽类的红细胞来检测血清的禽流感抗体效价,即鸭禽流感血清用鸭红细胞悬液,鹅禽流感血清用鹅红细胞悬液,这样几乎可完全排除非特异性凝集和非特异性凝集抑制因子对水禽禽流感抗体检测的影响。如果没有鸭、鹅的红细胞也可以使用鸡红细胞代替检测鸭、鹅血清,但鸭、鹅血清必须进行试验前的处理。     

不同家禽红细胞悬液检测水禽禽流感抗体对比试验

用同种水禽红细胞及水禽血清经处理后用鸡红细胞检测水禽禽流感抗体,试验结果表明:用鸡的红细胞来检测鹅、鸭的禽流感免疫抗体,比用同种水禽红细胞检测的抗体滴度平均低(2～4)Log2,如果禽流感免疫抗体低于4Log2时.用鸡红细胞基本检测不到Hl抗体.而用同种水禽红细胞对水禽禽流感抗体进行检测,可完全消除j}特异性凝集因子对水禽流感抗体检测的影响.     

不同种禽类红细胞悬液对HI结果的影响

红细胞凝集抑制试验能够用于监测某些畜禽传染病,如新城疫、禽流感等的抗体水平,由于动物血清中存在某些非特异性血凝物质,致使血凝抑制试验的结果出现非特异性血凝现象。本实验采用鸡、鸭和鹅的红细胞分别与同一份血清进行血凝抑制实验,结果表明,用鸡红细胞来检测鸭、鹅血清抗体效价时,出现非特异性血凝的血清份数较少;而用鸭、鹅红细胞来检测鸡血清的抗体效价时,出现非特异性血凝的血清份数较多。     

浅谈如何消除水禽的禽流感血凝抑制试验(HI)中非特异现象

血凝及血凝抑制试验方法可用于禽流感免疫监测,或通过前后抗体滴度变化用于疾病发生的推测性诊断。然而,在近年实验中发现相当多水禽血清样品用该方法进行禽流感免疫监测时出现非特异现象,导致无法得出实验结果。经查资料,禽血清中都有低的或无法检测到的非特异因子,特别是水禽血清对鸡红细胞可能产生非特异性的凝集。在本实验室中出现非特异现象的检验对象包括鸭、鹅、鹌鹑等。为了消除非特异现象,曾用各种方法处理血清,如56℃30m in灭活加上鸡红细胞吸附、胰酶处理、过碘酸钾处理,但效果均不佳,后来用公番鸭红细胞替代1%鸡红细胞,部分血清…     

不同家禽红细胞悬液对禽流感血清抗体检测的影响

为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响，对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后，做了一系列对比试验。结果发现，经受体破坏酶(RDE)处理后，虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响，但因处理复杂，费用高，不宜推广应用；经鸡红细胞吸附处理，可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用，但处理费时；而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体，可以有效去除血清非特异性凝集的影响．且更能准确地反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而，应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。     

水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨

采用不同方法对78份白鸭免疫血清进行H5亚型禽流感血凝抑制试验(HI试验)。试验共分6个组:血清经20%的同源禽种红细胞或鸡红细胞进行吸附处理、或不经吸附处理,再用1%的同源禽种红细胞或鸡红细胞作为指示细胞进行试验。结果表明:进行鸭禽流感HI抗体检测时,可采用1%同源禽种红细胞悬液作指示细胞进行测定,并将结果降低1log2后作为测定结果。此方法可以有效排除血清中非特异性凝集因子对监测结果的影响,提高准确性。     

鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用

鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法.目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定.为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响, 在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据.     

用鸭红细胞悬液消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响

禽流感自1878年在意大利首次发生以来,该病不断蔓延。近年来,在许多国家和地区出现暴发和流行,成为严重危害养禽业健康发展的一种主要家禽传染病。加强禽流感的监测是预防和控制禽流感的重要措施。目前,基层单位大都采用微量红细胞血凝抑制试验(简称HI试验)来检测家禽禽流感血清抗体。但在检测过程中,笔者发现依照国标的要求采用鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象。本试验用鸭红细胞悬液替代鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清HI抗体,探讨是否能消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响,现报道如下。1…     

水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨

2003年国家质量监督检验检疫总局出台了<高致病性禽流感诊断技术>(GB/T18936-2003)[1],标准中要求采用鸡红细胞作为血凝与血凝抑制试验的指示细胞监测禽流感抗体,这对于免疫鸡血清中的相应抗体水平监测比较合理[2-4],但对鸭、鹅及其他免疫禽类进行HI抗体水平监测时,常出现非特异性凝集现象[2-3],对检测结果的判定影响较大.有鉴于此,本试验拟对禽流感疫苗免疫后的水禽血清HI抗体检测方法进行探讨,研究适合免疫水禽禽流感HI抗体检测的方法.     

祛除禽流感HI试验中鹅血清非特异反应现象的研究

目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。     

禽流感血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子去除方法研究

为解决在鸭禽流感血凝抑制试验中鸭血清与鸡红细胞的非特异性凝集,影响抗体效价的准确性,采用10 mL/L鸭红细胞直接测定法和50 mL/L鸡红细胞吸附法进行非特异性去除试验,并对结果加以比较。结果表明,10 mL/L鸭红细胞直接测定法检测血清无须前处理,具有操作简便、耗时短的优点,可用于大量样本的检测。在进行小样本、高精度要求的检测时,适宜使用50 mL/L鸡红细胞吸附+鸭细胞测定法,以更有效去除非特异性反应。     

水禽禽流感H5N1亚型改良HI抗体检测方法的研究

鉴于在采用1％鸡红细胞悬液作为指示细胞检测水禽血清的HI抗体效价水平过程中常出现非病毒性凝集情况,亟需要建立一种快速简便经济的适合水禽血清抗体效价检测的方法。本研究通过对未经处理与采用不同红细胞吸附处理被检水禽血清以1％鸡、鸭或鹅红细胞悬液进行测定其HI抗体效价的结果对比,结果表明建立采用1％与待检水禽血清同源1％红细胞悬液做指示细胞的改良HI试验比采用鸡红细胞悬液测定结果高1～1．5 log2,且可以有效避免非病毒性凝集情况的出现。     

不同禽红细胞对水禽禽流感血凝抑制试验结果的影响

禽流感是由正黏病毒科A型流感病毒引起的一种禽类烈性传染病,对养禽业及人类健康都会产生严重危害.对家禽进行禽流感疫苗预防接种是我国防治禽流感的主要措施之一.血凝和血凝抑制试验是监测家禽抗体水平、了解家禽免疫效果、建立合理免疫程序的有效方法,由于禽流感病毒具有凝集红细胞的特性,在禽流感血凝抑制试验中,采用鸡红细胞作为检测指示剂.在日常检测中,有许多水禽血清样品需要检测.为了解不同禽红细胞作指示剂对水禽禽流感血凝抑制试验结果的影响,进行了本次试验.……     

用鸽鸡红细胞进行禽流感血凝抑制试验的比较

分别用1％鸽红细胞和1％鸡红细胞,对经H5亚型禽流感疫苗免疫过的鹅、鸽、鸡的血清,按照不同血清处理方法,进行禽流感血凝抑制试验.结果表明,鸽红细胞作指示细胞,检测鸽免疫血清HI抗体效价效果优于鸡红细胞,但不适于检测鹅、鸡的免疫血清的HI抗体效价.     

禽流感抗体检测中鸭血清非特异性凝集因子去除方法的研究

为探讨不同方法对血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子的去除效果，通过对同一批鸭血清分别经不同方法处理后进行一系列对比试验。结果发现，使用鸡红细胞吸附处理法比水浴前处理法（56℃，1min），更能有效去除非特异反应。经20%、10%鸡红细胞悬液预处理同一批鸭血清，表明20%、10%鸡红细胞悬液吸附处理能明显降低血清中非特异凝集因子的影响，20%鸡红细胞吸附在去除非特异性凝集上整体效果最好。在消除非特异性凝集因子上，采用20%鸡红细胞能够获得理想效果。     

不同家禽的红细胞悬液对禽流感病毒血凝抑制试验的影响

目前,血凝抑制试验(HI)被广泛用于检测各种家禽的禽流感抗体及禽流感病毒的鉴定,而多数实验室都是用鸡红细胞悬液来进行该试验。为了探讨不同家禽红细胞悬液对不同家禽血清抗体HI试验中非特异性凝集作用的影响,我们进行了本试验,现总结如下:一、材料与方法1.试验材料(1)待检血清:采取进行过禽流感H5亚型灭活油乳剂疫苗免疫的鸡、鸭鹅、鸽血各10份,分离血清备用。(2)抗原:禽流感H5诊断抗原,哈尔滨兽医研究所生产〔哈研生药中试字(2000)8818号,批号:20021225〕。(3)红细胞悬液:采取不具有特异性禽流感H5抗体的鸡、鸭、鹅、鸽的血按农业部标…     

水禽新城疫血凝抑制试验存在的问题

新城疫病毒能够与鸡红细胞发生凝集现象,这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制,即红细胞凝集抑制试验(HI)。由于血凝反应可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,出现凝集抑制现象。该方法具有以下优点:①敏感性强,可以检测到微量的抗体,结果也较为准确,是较敏感的血清学反应之一;②特异性强,病毒凝集红细胞只能被特异的抗体所抑制;③检测速度快,1次HI试验只需2 h左右,即可判定结果;④HI试验对环境要求不高,操作简单,1次还可检测大量的样品。因此血凝抑制试验用于水禽血清,可以检测血清中的抗…     

野生禽鸟禽流感病毒免疫抗体检测

除鸡外,有多种禽类的血清中含有非特异性抑制物,它们能影响HI试验的特异性。除了血凝的非特异性抑制物以外,其他禽类的血清也能引起HI试验中使用的鸡红细胞凝集,可掩饰低水平的HI活性。以微量血凝抑制法检测鸡以外的家禽和野生禽鸟的禽流感免疫抗体,应对血清进行处理,除去其非特异性抑制物和血凝活性。     

禽流感血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。 1试验器材的质量控制     

禽流感血凝抑制试验中应注意的一些问题

禽流感病毒能够与鸡红细胞发生凝集现象，这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制，即红细胞凝集抑制实验(HI)。由于血凝反应可被特异性抗体所抑制，抗体与病毒结合后，血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上，因此血凝抑制试验可以用于：①检涮血清中的抗体水平；②鉴定病毒；③辅助诊断病毒性疾病；④作为适时免疫的辅助手段，