流式细胞仪测定百合花粉倍性的研究

[目的]为利用百合未减数花粉进行有性多倍化育种。[方法]利用流式细胞仪测定百合花粉的倍性,以Marlon、Viviana的花粉为材料,以叶片为对照,比较两种不同细胞核提取液的效果差异。[结果]Cy Stain UV Precise T提取液明显优于WPB提取液;Marlon、Vivian叶片测定结果显示其为二倍体,花粉测定的图像显示两个品种都能自发产生2n花粉。[结论]流式细胞仪可以快速地测定百合花粉的倍性。     

流式细胞术检测乌克兰鳞鲤倍性

[目的]筛选测定乌克兰鳞鲤（Cyprinus carpio）倍性的合适的方法。[方法]建立3种流式细胞术样品制备方法：肾组织单细胞悬液法、红细胞甲醛固定法和红细胞乙醇固定法。采用BD FACS tar Puls型流式细胞仪测定倍性。[结果]3种制样方法均能得到结果,但红细胞甲醛固定法最佳。[结论]流式细胞术可精确、快速地检测乌克兰鳞鲤倍性,适应其多倍体产业化的需要。     

流式细胞仪在果树作物倍性鉴定上的应用

综述了流式细胞仪的发展历史、工作原理、使用方法及其在果树作物倍性鉴定上的应用进展,并对存在问题及今后的研究提出了建议。     

利用流式细胞术鉴定桦木染色体倍性和DNA含量

基于流式细胞术（FCM）研究体系,构建能快速、准确鉴定桦木属植物倍性和测定DNA含量的研究体系,是测定不同桦木属植物倍性与基因组大小的有效方法。使用流式细胞术检测7种桦树属类物种,以物种不同生长状态（嫩叶、幼叶、成熟叶）为实验材料,不同存储方式（常温、冷藏和聚乙烯吡咯烷酮保存PVP）进行实验处理,对9种常用的裂解液进行筛选与优化。结果表明：桦木属植物DNA含量测定中,新鲜幼叶以1% PVP浸泡常温保存,并使用MgSO₄裂解液制备细胞核悬浮液上机效果最佳;桦木属植物中,基因组倍性依次为黑桦（(2.09 ± 0.04) Gb,8倍体） > 坚桦（(1.53 ± 0.08) Gb,6倍体） > 光皮桦（(0.87 ± 0.05) Gb,4倍体）=岳桦（(0.80 ± 0.07) Gb,4倍体） > 垂枝桦（(0.46 ± 0.03) Gb,2倍体）=河桦（(0.51 ± 0.01) Gb,2倍体）。因此,桦木属植物DNA倍性和DNA含量可以通过FCM研究体系进行测定,且3倍体（(0.66 ± 0.02) Gb）子代的鉴定结果表明光皮桦与河桦之间不存在生殖隔离。     

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相关近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的     

流式细胞术(FCM)在贝类倍性检测中的应用

对某种生物来说 ,体内细胞核内所含的DNA量总是一定的。利用流式细胞仪(FCM)可在短时间内准确测出细胞中DNA的含量 ,鉴别有机体的倍性。作者系统地介绍了用流式细胞仪检测鲍鱼、牡蛎、扇贝等经济贝类倍性的方法 ,包括机械法、化学法、抽取血液法及固定贝样的制备法等。另外 ,还报道了实验中新发现的一些现象 ,如牡蛎嵌合体及诱导过程中的非整倍体等。     

流式细胞术应用及植物种质资源倍性研究进展

流式细胞术是一种应用流式细胞仪进行分析和分选的方法,该方法操作简捷,高效,且对样品的破坏性小。近年来,科学技术不断进步、农业不断发展,但很多古老的资源却逐渐消失。因此,植物种质资源的保护和合理的开发利用是当前科研的一项重要工作,且植物种质资源是作物遗传育种与创新的重要物质基础,而其倍性的鉴定则是了解其遗传背景和进一步应用的基础。目前,流式细胞术应用于多个领域,如在医学领域、生物学领域等,但在植物种质资源倍性鉴定上的应用较少。本文综述了近几年流式细胞术的发展及在医学、生物学领域和植物种质资源倍性鉴定上的应用。     

流式细胞术(FCM)在贝类倍性检测中的应用

对某种生物来说,体内细胞核内所含的ＤＮＡ量总是一定的。利用流式细胞仪（ＦＣＭ）可在短时间内准确测出细胞中ＤＮＡ的含量,鉴别有机体的倍性。作者系统地介绍了用流式细胞仪检测鲍鱼、牡蛎、扇贝等经济贝类倍性的方法,包括机械法、化学法、抽取血液法及固定贝样的制备法等。另外,还报道了实验中新发现的一些现象,如牡蛎嵌合体及诱导过程中的非整倍体等。     

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相差近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的可靠性。     

基于流式细胞仪鉴定菊芋倍性方法的建立及应用

【目的】利用流式细胞仪检测菊芋种质的染色体倍性,为菊芋的种质鉴定及遗传育种研究提供基础数据。【方法】建立基于流式细胞仪检测菊芋倍性的检测体系,并针对不同电压（（340,365.3和422 V））、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)添加与否、取样部位（老叶、嫩叶、块茎和根）对体系进行优化。利用建立的稳定优化体系对302份菊芋种质资源的倍性进行检测。【结果】针对菊芋材料,选取幼嫩叶片,在样品处理时添加PVP溶液消除多酚及多糖物质的干扰,检测电压选用365.3 V,以流式细胞仪进行倍性检测的效果较好,准确性较高。302份菊芋种质资源倍性检测结果表明,整体变异系数在2.17~9.74,二倍体共3份,仅占资源总数的0.99%;四倍体共25份,占资源总数的8.28%;六倍体共274份,占资源总数的90.73%。【结论】基于流式细胞仪建立的菊芋种质资源倍性鉴定方法检测效果较好,准确性较高。     

利用流式细胞术鉴定杏及其部分近缘植物的倍性

果树多倍体生长旺盛、果实大且无籽或少籽、产量高、适应性和抗性强,多倍体砧木能够诱导嫁接植株矮化、提高植株对干旱等非生物胁迫的耐受能力。基于多倍体的诸多优点,发掘、培育与利用多倍体种质资源是果树育种的重要内容。利用流式细胞术鉴定植物倍性技术简单、效率高、结果准确。为了鉴定150 份杏、7份李和9份李杏砧木种质资源的倍性,发掘多倍体资源,采集其幼嫩叶片,利用Partec试剂盒制备细胞核悬液及染色,通过流式细胞仪检测DNA相对含量。以二倍体杏品种''巴斗''为外标,其他种质资源DNA相对含量值与其比较,确定各自倍性水平,若与二倍体''巴斗''DNA相对含量比值近似1,为二倍体;比值近似2,为四倍体;比值近似3,为六倍体。结果表明：150份杏均为二倍体;7份李资源中,2份欧洲李和1份黑刺李为六倍体,4份杏李为二倍体;9份李杏砧木资源中二倍体5份,四倍体1份,六倍体3份。     

流式细胞术在蔬菜倍性鉴定中的应用

倍性鉴定一直是蔬菜育种研究的重要内容之一,而流式细胞术(FCM)是一种快速准确鉴定蔬菜倍性的方法。综述了流式细胞术倍性鉴定的原理、操作步骤、优缺点及其在蔬菜作物上的应用进展。     

利用流式细胞术检测甜菜染色体倍性和DNAC-值

[目的]研究流式细胞技术快速、准确、方便测定甜菜体内染色体倍性和DNAC-值,为甜菜染色体倍性、分子生物学领域的相关研究提供参考依据.[方法]以二倍体M39-8-4嫩叶为材料,以已知基因组的新疆野杏洛浦洪待克为外标,建立适合于甜菜染色体倍性和基因组的流式细胞术测定方法.[结果]经7种常用细胞解离液筛选,Marie's为...     

适合草莓倍性鉴定的流式细胞术方法的建立

比较了3种提取液制备红颊、川九1号、吉林草莓细胞核悬液流式细胞术检测效果,结果显示,提取液Ⅲ主峰粒子团清晰而集中,背景碎片少,试剂配方简单配制容易,且3种草莓材料倍性差异区分明显,优于其他2种提取液。对红颊草莓不同部位或不同来源的材料进行流式细胞术检测效果比较,结果表明,组培苗的检测效果明显优于大田试材,组培苗叶片因取材容易、主峰清晰、杂峰少、细胞碎片少而成为最佳试材。     

用气孔性状鉴定100份百合倍性的研究

为快速、准确地鉴定百合的倍性,在显微镜下观测了不同倍性百合叶表皮的气孔性状。通过文献查阅,明确了210份百合的倍性。以气孔密度为横坐标、气孔周长为纵坐标,制作百合气孔的散点图,以24个倍性已知的百合为参照,划分出不同倍性的分布区域:二倍体的气孔周长范围为57.75～70.05μm、气孔密度为42.63～97.37个/mm²;三倍体的气孔周长范围为70.42～93.59μm、气孔密度为24.73～46.84个/mm2;三倍体的气孔周长范围为70.42～93.59μm、气孔密度为24.73～46.84个/mm²;四倍体的气孔周长范围为99.44～113.69μm、气孔密度为17.36～28.42个/mm2;四倍体的气孔周长范围为99.44～113.69μm、气孔密度为17.36～28.42个/mm²。以此为依据,明确了68份百合的倍性,有8个品种处于三倍体与二倍体分布区交集处,倍性有待进一步确定。总之,以大量倍性已知的百合为参照,结合表皮气孔周长和密度特征,可以在早期快速鉴定百合的倍性。     

用气孔性状鉴定100份百合倍性的研究

为快速、准确地鉴定百合的倍性,在显微镜下观测了不同倍性百合叶表皮的气孔性状.通过文献查阅,明确了210份百合的倍性.以气孔密度为横坐标、气孔周长为纵坐标,制作百合气孔的散点图,以24个倍性已知的百合为参照,划分出不同倍性的分布区域:二倍体的气孔周长范围为57.75～70.05μm、气孔密度为42.63～97.37个/m...     

流式细胞术鉴定苹果花药培养再生植株倍性的方法

苹果花药培养再生获得的纯合基因型植株倍性各异。为了进一步在育种和遗传分析中应用这些株系,需要准确鉴定其倍性,而流式细胞术测定植物细胞DNA含量是一种简单、快速、精确的倍性鉴定方法。试验用4种不同的解离液对苹果花药培养再生植株的叶片样品进行解离,并进行了DNA含量检测。结果表明,WPB解离液解离样品后上机检测,主峰高且明显。利用WPB解离液对苹果花药培养再生植株叶片进行解离,解离后不经过离心,直接染色,是用流式细胞术鉴定苹果花药培养再生植株倍性的最佳方法。     

抱子甘蓝花培苗倍性的快速鉴定

采用花药培养获得加倍单倍体 (DH)是甘蓝类蔬菜自交不亲和系选育的主要方法之一 .然而 ,花药培养后代是倍性水平不同的混合群体 ,及早鉴定出真正的 DH具有重要的意义 .本文阐述 DNA流式细胞仪测定法和形态学鉴定法在花培苗倍性鉴定上的应用 ,并以抱子甘蓝的花培苗群体为材料 ,采用这两种方法鉴定其倍性组成 .结果表明 ,DNA流式细胞仪测定法可以鉴别群体的各种倍性水平 ,而形态学鉴别法可以把群体中的二倍体与单倍体、四倍体及其它倍体分开 .若以 DNA流式细胞仪测定法的鉴定结果为标准 ,苗期形态学鉴定的准确率可达 94.2 % .与 DNA流式细胞仪测定法相比 ,形态学鉴定方法具有更快速、简便和实用性强等特点